奶粉和奶制品中硝酸盐、亚硝酸盐检测方案(离子色谱仪)

奶粉和奶制品中的硝酸盐、亚硝酸盐的检测：离子色谱法 自然界中存在一定的硝酸盐及亚硝酸盐，当大量的亚硝酸盐被人体血液吸收后，可使正常的血红蛋白（二价铁）变成变性血红蛋白（三价铁），从而失去携带氧气的功能，出现组织缺氧现象；另外亚硝酸盐与蛋白质代谢的中间产物仲胺反应，还能生成亚硝胺，亚硝胺具有一定的致癌性。 在奶牛的喂养过程中，如果环境水源、喂养饲料的添加剂以及奶牛生长环境等硝酸盐、亚硝酸盐含量过高，都会发生牛奶中的硝酸盐及亚硝酸盐的超标。 可采用离子色谱检测牛奶及奶制品中硝酸盐、亚硝酸盐，该方法对亚硝酸盐和硝酸盐检出限分别为0.05 mg/L和0.075 mg/L。 测定方法 1 提取： 牛奶：准确量取5 mL试样于25 mL比色皿中，加5-10 mL纯水，加入3%乙酸2 mL，摇匀超声10 min，75℃放置5 min。采用定量滤纸初步过滤。取部分溶液于10000 rpm速度离心15 min，取上清液净化备用。 奶粉，奶制品：准确称取试样2.50 g，置于50 mL容量瓶中，加水40 mL，加入3%乙酸2 ml，摇匀，超声30 min，置75℃水浴中放置5 min，用水稀释至刻度。溶液经滤纸过滤后，取部分溶液于10000 rpm离心15 min，取上清液净化备用。 2 色谱条件： 色谱柱：氢氧化物选择性，可兼容梯度洗脱的高容量阴离子交换柱。 淋洗液：淋洗液自动发生器，浓度为6～70 mmol。或选配二元或四元梯度泵混合产生梯度程序（使用高纯的、质量浓度为50%浓氢氧化钠溶液，配制成含OH-为100 mmol/L的淋洗液，然后再进行调整稀释）。淋洗液流速：1.0 mL/mi 抑制器：连续自动再生膜阴离子抑制器； 检测器：电导检测器，检测池温度：35℃测定； 进样体积：50 µL； 3 标准曲线绘制： 移取硝酸盐和亚硝酸盐混合标准使用液，加水稀释，制成系列标准溶液，制作不同标准曲线，含硝酸盐浓度为0.0、0.03、0.75、0.15、0.3、0.45、0.6 mg/L或0.0、 5.0、10.0、20.0、50.0、75.0和100.0 mg/L和亚硝酸盐浓度为0.00、0.005、0.010、0.025、0.50、0.75、1.00 mg/L的混合标准溶液，用1.0mL注射器从低到高浓度依次进样，得到上述各浓度标准溶液的色谱图。以硝酸盐和亚硝酸盐的浓度（µg/L）为横坐标，以峰高或峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，并计算线性回归方程。 4 样品测定 ： 用1.0 mL注射器分别吸取空白和试样溶液，在相同工作条件下，依次注入离子色谱仪中，记录色谱图。根据保留时间定性，分别测量空白和样品的峰高或峰面积。   自然界中存在一定的硝酸盐及亚硝酸盐，当大量的亚硝酸盐被人体血液吸收后，可使正常的血红蛋白（二价铁）变成变性血红蛋白（三价铁），从而失去携带氧气的功能，出现组织缺氧现象；另外亚硝酸盐与蛋白质代谢的中间产物仲胺反应，还能生成亚硝胺，亚硝胺具有一定的致癌性。  在奶牛的喂养过程中，如果环境水源、喂养饲料的添加剂以及奶牛生长环境等硝酸盐、亚硝酸盐含量过高，都会发生牛奶中的硝酸盐及亚硝酸盐的超标。  可采用离子色谱检测牛奶及奶制品中硝酸盐、亚硝酸盐，该方法对亚硝酸盐和硝酸盐检出限分别为0.05 mg/L和0.075 mg/L。  测定方法  1 提取：  牛奶：准确量取5 mL试样于25 mL比色皿中，加5-10 mL纯水，加入3%乙酸2 mL，摇匀超声10 min，75℃放置5 min。采用定量滤纸初步过滤。取部分溶液于10000 rpm速度离心15 min，取上清液净化备用。  奶粉，奶制品：准确称取试样2.50 g，置于50 mL容量瓶中，加水40 mL，加入3%乙酸2 ml，摇匀，超声30 min，置75℃水浴中放置5 min，用水稀释至刻度。溶液经滤纸过滤后，取部分溶液于10000 rpm离心15 min，取上清液净化备用。  2 色谱条件：  色谱柱：氢氧化物选择性，可兼容梯度洗脱的高容量阴离子交换柱。  淋洗液：淋洗液自动发生器，浓度为6～70 mmol。或选配二元或四元梯度泵混合产生梯度程序（使用高纯的、质量浓度为50%浓氢氧化钠溶液，配制成含OH-为100 mmol/L的淋洗液，然后再进行调整稀释）。淋洗液流速：1.0 mL/min  抑制器：连续自动再生膜阴离子抑制器；  检测器：电导检测器，检测池温度：35℃测定；  进样体积：50 µL；  3 标准曲线绘制：  移取硝酸盐和亚硝酸盐混合标准使用液，加水稀释，制成系列标准溶液，制作不同标准曲线，含硝酸盐浓度为0.0、0.03、0.75、0.15、0.3、0.45、0.6 mg/L或0.0、 5.0、10.0、20.0、50.0、75.0和100.0 mg/L和亚硝酸盐浓度为0.00、0.005、0.010、0.025、0.50、0.75、1.00 mg/L的混合标准溶液，用1.0mL注射器从低到高浓度依次进样，得到上述各浓度标准溶液的色谱图。以硝酸盐和亚硝酸盐的浓度（µg/L）为横坐标，以峰高或峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，并计算线性回归方程。  4 样品测定 ：  用1.0 mL注射器分别吸取空白和试样溶液，在相同工作条件下，依次注入离子色谱仪中，记录色谱图。根据保留时间定性，分别测量空白和样品的峰高或峰面积。