肉类制品中抗生素代谢残留物的含量检测方案(液相色谱仪)

肉类制品中抗生素代谢残留物的含量的检测：高效液相色谱法 呋喃类药物是一类人工合成的广谱抗菌药物，对大多数革兰氏阳性菌和阴性菌、某些真菌和原虫均有作用，低浓度抑菌，高浓度杀菌。目前使用的呋喃类药物有10余种，较常用的有呋喃妥因、呋喃唑酮、呋喃西林等。呋喃妥因抗菌范围较广，对多种革兰氏阳、阴性细菌均有抑制作用，但对绿脓杆菌无效。呋喃唑酮抗菌谱对消化道的多种细菌有抑制作用，也可抑制滴虫。     呋喃类药物在家禽、家畜等养殖业应用范围比较广，一般用来预防和治疗动物传染病，但在动物体内会有代谢物残留，对人体有一定毒性，引起致癌、致畸胎副作用。中国卫生部于2010年3月22日将硝基呋喃类药物呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃妥因、呋喃西林列入可能违法添加的非食用物质黑名单。本文中，采取固相萃取-液相色谱法对鸡鸭鱼等肉产品中的硝基呋喃类药物残留量进行分析检测。     仪器准备     LC600A等度智能全控液相色谱仪 (​http:​/​​/​www.kj17.com.cn" \t "http:​/​​/​www.kj17.com.cn​/​jishuzhichi​/​_blank​)（南京科捷分析仪器有限公司）、JL-120DTH台式超声仪（湖南创特科技发展有限公司）、MW系列实验室级超纯水器（南京科捷分析仪器有限公司）等。 LC-600A等度智能全控液相色谱系统由1台P600高压恒流泵与1台UV600紫外检测器直接构成等度分析系统。使用WS600工作站可以同时控制数台P600高压恒流泵、UV600紫外检测器及恒温柱箱等，实行多元高压洗脱、波长扫描等功能。     样品处理     准确称取均匀样品10.0g，加10g无水硫酸钠和40mL乙腈，经组织匀浆后，超声萃取10min。以5000r/min离心5min，取上清液置于250mL分液漏斗中（棕色），如有沉淀物，再加入20mL乙腈，涡旋3min，再超声5min后离心，合并的乙腈液中加入经乙腈饱和的正己烷25mL，振提3min，去掉正己烷层，乙腈液在＜40℃下减压蒸馏浓缩近干，加入5mL 0.01mol/L（PH=2.5）的磷酸盐缓冲液溶解残渣，残渣经活化的HLB柱净化，10mL甲醇洗脱待测成分，氮气吹至近干，流动相定容2mL，经0.45μm滤膜过滤，收集滤液待测。     分析条件 色谱柱 Inertsil ODS-3（250×4.6mm，5μm） 流动相 乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钠（PH=4.0，体积比20：80） 流速 1.2mL/min 柱温 室温 紫外检测波长 365nm，AUFS=0.02 进样量 25μL       谱图分析 A、混合标准溶液；B、样品加标；C、阳性鸡肉样品；D阴性鸡肉样品 1.呋喃它定 2.呋喃西林 3.呋喃妥因 4.呋喃唑酮     呋喃类药物是一类人工合成的广谱抗菌药物，对大多数革兰氏阳性菌和阴性菌、某些真菌和原虫均有作用，低浓度抑菌，高浓度杀菌。目前使用的呋喃类药物有10余种，较常用的有呋喃妥因、呋喃唑酮、呋喃西林等。呋喃妥因抗菌范围较广，对多种革兰氏阳、阴性细菌均有抑制作用，但对绿脓杆菌无效。呋喃唑酮抗菌谱对消化道的多种细菌有抑制作用，也可抑制滴虫。    呋喃类药物在家禽、家畜等养殖业应用范围比较广，一般用来预防和治疗动物传染病，但在动物体内会有代谢物残留，对人体有一定毒性，引起致癌、致畸胎副作用。中国卫生部于2010年3月22日将硝基呋喃类药物呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃妥因、呋喃西林列入可能违法添加的非食用物质黑名单。本文中，采取固相萃取-液相色谱法对鸡鸭鱼等肉产品中的硝基呋喃类药物残留量进行分析检测。    仪器准备    LC600A等度智能全控液相色谱仪（南京科捷分析仪器有限公司）、JL-120DTH台式超声仪（湖南创特科技发展有限公司）、MW系列实验室级超纯水器（南京科捷分析仪器有限公司）等。LC-600A等度智能全控液相色谱系统由1台P600高压恒流泵与1台UV600紫外检测器直接构成等度分析系统。使用WS600工作站可以同时控制数台P600高压恒流泵、UV600紫外检测器及恒温柱箱等，实行多元高压洗脱、波长扫描等功能。    样品处理    准确称取均匀样品10.0g，加10g无水硫酸钠和40mL乙腈，经组织匀浆后，超声萃取10min。以5000r/min离心5min，取上清液置于250mL分液漏斗中（棕色），如有沉淀物，再加入20mL乙腈，涡旋3min，再超声5min后离心，合并的乙腈液中加入经乙腈饱和的正己烷25mL，振提3min，去掉正己烷层，乙腈液在＜40℃下减压蒸馏浓缩近干，加入5mL 0.01mol/L（PH=2.5）的磷酸盐缓冲液溶解残渣，残渣经活化的HLB柱净化，10mL甲醇洗脱待测成分，氮气吹至近干，流动相定容2mL，经0.45μm滤膜过滤，收集滤液待测。    分析条件色谱柱Inertsil ODS-3（250×4.6mm，5μm）流动相乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钠（PH=4.0，体积比20：80）流速1.2mL/min柱温室温紫外检测波长365nm，AUFS=0.02进样量25μL     谱图分析A、混合标准溶液；B、样品加标；C、阳性鸡肉样品；D阴性鸡肉样品1.呋喃它定 2.呋喃西林 3.呋喃妥因 4.呋喃唑酮