中国允许在食品中添加的合成色素共计28种,如何检测高蛋白食品中人工合成色素的含量,液相色谱法检测高蛋白食品中人工合成色素的含量。
液相色谱法检测高蛋白食品中人工合成色素的含量 合成色素即人工合成的色素,其优点不少,如色泽鲜艳,着色力强,色调多样,但它有一个大缺点,即具毒性(包括毒性、致泻性和致癌性)。这些毒性源于合成色素中的砷、铅、铜、苯酚、苯胺、乙醚、氯化物和硫酸盐,它们对人体均可造成不同程度的危害。中国允许在食品中添加的合成色素共计28种,合成色素的分类如下所示: 有机合成色素:苋菜红、胭脂红、柠檬黄、新红、赤藓红、诱惑红、日落黄、亮蓝和靛蓝及其铝色淀,喹啉黄;无机合成色素:二氧化钛和合成氧化铁;天然等同合成色素:β-胡萝卜素,番茄红素;其他合成色素:叶绿素铜钠(钾)盐:叶绿素铜(钾)盐。 有机合成色素的铝色淀是通过纯有机合成燃料与氧化铝反应后,经清洗和干燥等工序,使水溶性色素沉淀在不溶性基质上所制备的特殊着色剂,其不溶于任何介质,通过扩散在某种载体中(如砂糖、油、甘油、糖浆)进行着色。 有机合成色素从结构上分为偶氮色素类(苋菜红、胭脂红、日落黄、柠檬黄等)和非偶氮色素类(赤藓红、亮蓝、靛蓝等)。这些色素的分子量在450-880之间,最大吸收波长在428-630nm之间。其耐氧化还原性能均较差;耐热、耐光性能稳定(靛蓝除外);胭脂红、诱惑红、日落黄、靛蓝在碱性条件下不稳定,赤藓红、靛蓝在酸性条件下不稳定。 对食用合成色素的安全性存在争议主要集中在有机合成色素,有机合成色素可以改善商品外观并吸引消费者购买,于是有不法分子在利欲驱使下,突破允许使用品种、范围和数量,滥用、重剂量使用色素,更使食品安全面临挑战。许多合成色素有一定毒性,必须严格控制使用品种、范围和数量,限制每日允许摄入量(ADI)。有些色素长期低剂量摄入,也存在致畸、致癌的可能性。 仪器介绍 LC600B二元高压梯度液相色谱 (http://www.kj17.com.cn/fenxiyiqi/yxspy.html" \t "http://www.kj17.com.cn/jishuzhichi/_blank)系统(南京科捷分析仪器有限公司)配备高压梯度泵1台(内含2台恒流泵和1台梯度混合器),梯度混合器(专利)性能优越,16:9的TFT彩屏支持脱机时通过仪器触屏输入和显示所有信息。支持手动进样,可选配自动进样器,采用注射器定量,流动相过针,电脑控制进样量大小,无需更换定量环即可改变进样体积,极大的方便用户操作。 实验方法 样品处理:1.取样样品可食用部分提取前经匀浆处理; 2.提取准确称取样品5±0.005g于30mL离心管中,加入无水乙醇:氨水:水(7:2:1)溶液10mL混匀,超声10min,4000r/min离心10min,取上清液转移至新的离心管中,沉淀继续加入无水乙醇:氨水:水(7:2:1)溶液10mL、5mL提取两次; 3.冷冻除蛋白合并上清液,于低温冰箱中-42℃冷冻0.5、1、3、5、12h,快速取出于冷冻离心机5℃条件下8000rpm离心5min,取上清液; 4.浓缩除氨上清液转移至水浴锅中在接近沸腾的水中进行蒸发至8~12mL,取出冷却至室温,以0.1mol/L柠檬酸溶液调节pH至6~7,得到提取液的浓缩液; 5.净化聚酰胺小柱经6mL0.1mol/L柠檬酸溶液活化后,加入浓缩液,弃掉滤出液,以12mL柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液(pH=4)洗涤小柱,分别以纯甲醇、无水乙醇:氨水:水(7:2:1)溶液和0.1mol/L的氢氧化钠洗脱,每种洗脱剂分别使用1、3、5mL进行优化,弃掉最初0.3mL流出液,收集剩余流出液并抽干小柱。流出液在50℃下氮气吹至0.8mL以下,加乙酸铵溶液至1mL,充分溶解残渣,样液经0.22μm水相微孔滤膜过滤,滤液供液相色谱测定。 色谱条件: 色谱柱 C18柱250mm×4.6mm,5μm 流动相 A:20mmol/L乙酸铵溶液,20mmol/L乙酸铵+0.1%氨水溶液和纯水; B:甲醇 梯度洗脱 1~4min,以10%比例的水相进行洗脱,4~10min,线性提高甲醇的比例至100%,10~13min,100%甲醇比例,13~16min进行清洗色谱柱并回至初始流动相比例 流速 1mL/min 柱温 30℃ 进样量 25μL 检测波长 赤藓红 靛蓝 苋菜红 诱惑红 胭脂红 日落红 柠檬黄 亮蓝 530 602 523 512 510 490 430 630 合成色素即人工合成的色素,其优点不少,如色泽鲜艳,着色力强,色调多样,但它有一个大缺点,即具毒性(包括毒性、致泻性和致癌性)。这些毒性源于合成色素中的砷、铅、铜、苯酚、苯胺、乙醚、氯化物和硫酸盐,它们对人体均可造成不同程度的危害。中国允许在食品中添加的合成色素共计28种,合成色素的分类如下所示: 有机合成色素:苋菜红、胭脂红、柠檬黄、新红、赤藓红、诱惑红、日落黄、亮蓝和靛蓝及其铝色淀,喹啉黄;无机合成色素:二氧化钛和合成氧化铁;天然等同合成色素:β-胡萝卜素,番茄红素;其他合成色素:叶绿素铜钠(钾)盐:叶绿素铜(钾)盐。有机合成色素的铝色淀是通过纯有机合成燃料与氧化铝反应后,经清洗和干燥等工序,使水溶性色素沉淀在不溶性基质上所制备的特殊着色剂,其不溶于任何介质,通过扩散在某种载体中(如砂糖、油、甘油、糖浆)进行着色。 有机合成色素从结构上分为偶氮色素类(苋菜红、胭脂红、日落黄、柠檬黄等)和非偶氮色素类(赤藓红、亮蓝、靛蓝等)。这些色素的分子量在450-880之间,最大吸收波长在428-630nm之间。其耐氧化还原性能均较差;耐热、耐光性能稳定(靛蓝除外);胭脂红、诱惑红、日落黄、靛蓝在碱性条件下不稳定,赤藓红、靛蓝在酸性条件下不稳定。 对食用合成色素的安全性存在争议主要集中在有机合成色素,有机合成色素可以改善商品外观并吸引消费者购买,于是有不法分子在利欲驱使下,突破允许使用品种、范围和数量,滥用、重剂量使用色素,更使食品安全面临挑战。许多合成色素有一定毒性,必须严格控制使用品种、范围和数量,限制每日允许摄入量(ADI)。有些色素长期低剂量摄入,也存在致畸、致癌的可能性。 仪器介绍 LC600B二元高压梯度液相色谱系统(南京科捷分析仪器有限公司)配备高压梯度泵1台(内含2台恒流泵和1台梯度混合器),梯度混合器(专利)性能优越,16:9的TFT彩屏支持脱机时通过仪器触屏输入和显示所有信息。支持手动进样,可选配自动进样器,采用注射器定量,流动相过针,电脑控制进样量大小,无需更换定量环即可改变进样体积,极大的方便用户操作。 实验方法 样品处理:1.取样样品可食用部分提取前经匀浆处理; 2.提取准确称取样品5±0.005g于30mL离心管中,加入无水乙醇:氨水:水(7:2:1)溶液10mL混匀,超声10min,4000r/min离心10min,取上清液转移至新的离心管中,沉淀继续加入无水乙醇:氨水:水(7:2:1)溶液10mL、5mL提取两次; 3.冷冻除蛋白合并上清液,于低温冰箱中-42℃冷冻0.5、1、3、5、12h,快速取出于冷冻离心机5℃条件下8000rpm离心5min,取上清液; 4.浓缩除氨上清液转移至水浴锅中在接近沸腾的水中进行蒸发至8~12mL,取出冷却至室温,以0.1mol/L柠檬酸溶液调节pH至6~7,得到提取液的浓缩液; 5.净化聚酰胺小柱经6mL0.1mol/L柠檬酸溶液活化后,加入浓缩液,弃掉滤出液,以12mL柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液(pH=4)洗涤小柱,分别以纯甲醇、无水乙醇:氨水:水(7:2:1)溶液和0.1mol/L的氢氧化钠洗脱,每种洗脱剂分别使用1、3、5mL进行优化,弃掉最初0.3mL流出液,收集剩余流出液并抽干小柱。流出液在50℃下氮气吹至0.8mL以下,加乙酸铵溶液至1mL,充分溶解残渣,样液经0.22μm水相微孔滤膜过滤,滤液供液相色谱测定。 色谱条件:色谱柱C18柱250mm×4.6mm,5μm流动相A:20mmol/L乙酸铵溶液,20mmol/L乙酸铵+0.1%氨水溶液和纯水;B:甲醇梯度洗脱1~4min,以10%比例的水相进行洗脱,4~10min,线性提高甲醇的比例至100%,10~13min,100%甲醇比例,13~16min进行清洗色谱柱并回至初始流动相比例流速1mL/min柱温30℃进样量25μL检测波长赤藓红靛蓝苋菜红诱惑红胭脂红日落红柠檬黄亮蓝530602523512510490430630
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南京科捷分析仪器有限公司为您提供《高蛋白食品中人工合成色素的含量检测方案(液相色谱仪)》,该方案主要用于糕点/月饼/粽子中食品添加剂检测,参考标准--,《高蛋白食品中人工合成色素的含量检测方案(液相色谱仪)》用到的仪器有科捷仪器LC600C 梯度液相色谱仪