粮食中赭曲霉毒素A检测方案(液相色谱仪)

Suruit应用方案 Surwit赛智科技(杭州)有限公司 赛智科技(杭州)有限公司 赭曲霉毒素的高效液相色谱 HPLC检测方案 【赭曲霉毒素】 赭曲霉毒素由曲霉菌，如赭曲霉、硫色曲霉、蜂蜜曲霉以及绿青霉等产生的一类毒素。 包括7种结构类似的化合物，结构通式：R1=CI或H； R2=H、CH3或 C2H5。其中赭曲霉毒素A(R1=C1，R2=H)毒性最大，在霉变谷物、饲料等最常见。 赭曲霉毒素A是一种无色结晶化合物。可溶于极性有机溶剂和稀碳酸氢钠溶液。微溶于水。其苯溶剂化物熔点94~96℃，二甲苯中结晶熔点169℃。有光学活性[a]D-118°o。其紫外吸收光谱随 pH值和溶剂极性不同而有别，在乙醇溶液中最大吸收波长为 213nm 和 332nm。有很高的化学稳定性和热稳定性。 【作用】 赭曲霉毒素A是由多种生长在粮食(小麦、玉米、大麦、燕麦、黑麦、大米和黍类等)、花生、蔬菜(豆类)等农作物上的曲霉和青霉产生的。动物摄入了霉变的饲料后，这种毒素也可能出现在猪和母鸡等的肉中。赭曲霉毒素主要侵害动物肝脏与肾脏。这种毒素主要是引起肾脏损伤，大量的毒素也可能引起动物的肠黏膜炎症和坏死。还在动物试验中观察到它的致畸作用。 【样品处理过程】 标准储备液：准确称取一定量标准品，用甲醇+乙醇(1+1)溶解，配成 0.1mg/ml的标准液。标准工作液：根据使用需要准确吸取一定量的赭曲霉毒素储备液，用流动相稀释，分别配成相当于1ng/ml、10ng/ml、25ng/ml、50ng/ml、100ng/ml 的标准工作液。用 0.45um的有机系滤膜过滤，精密量取10uL，注入液相色谱仪，记录色谱图。 样品处理：准确称取试样50.0g(准确到0.1g)于均质器配置的搅拌杯中，加入5.0g氯化钠，加入100mL甲醇+水(8+2)。将搅拌杯置于均质器上，于20000r/min 高速搅拌提取 1min。提取液经槽纹折叠滤纸过滤于干净的烧杯中。准确移取 10.0mL 滤液并加入40.0mL水稀释，混合均匀，经玻璃纤维滤纸直接过滤入10mL注射器。 净化过程略。 【色谱条件】 色谱柱：C18反相色谱柱，4.6mm*250mm， 粒度 5 um 流动相：水+乙腈+冰乙酸=102+96+2 波长：：入 ex333nm 入em460nm 流速： 1.0mL/min 进样量：10uL 柱温：30℃ 应用方案 【谱图】 【仪器配置】 高压输液泵 0.001-9.999m1/min 1台 荧光检测器 1台 手动进样阀 含触发开关 1套 阀安装支架 1套 液相色谱柱 C18 反相色谱柱 1支 微量进样器 100u1 1支 维护工具包 液相色谱专用启动工具 1套 色谱工作站 N2000 或 C1arify 1套 超声清洗仪 1套 真空抽滤装置 带真空泵 1套 分析天平 感量 0.1mg 1台 赛智科技(杭州)有限公司E-mail： surwit@hplc.com.cnTel： ax： 江省杭州市东冠路金盛科技技号楼-楼网址： www.surwit.com www.hplc.com.cn 赛智科技(杭州)有限公司E-mail： surwit@hplc.com.cn浙江省杭州市东冠路金盛科技技号楼-楼Tel： 址： www.surwit.com www.hplc.com.cnFax： 【作用】    赭曲霉毒素A是由多种生长在粮食（小麦、玉米、大麦、燕麦、黑麦、大米和黍类等）、花生、蔬菜（豆类）等农作物上的曲霉和青霉产生的。动物摄入了霉变的饲料后，这种毒素也可能出现在猪和母鸡等的肉中。赭曲霉毒素主要侵害动物肝脏与肾脏。这种毒素主要是引起肾脏损伤，大量的毒素也可能引起动物的肠黏膜炎症和坏死。还在动物试验中观察到它的致畸作用。 【样品处理过程】    标准储备液:准确称取一定量标准品，用甲醇+乙腈（1+1）溶解，配成0.1mg/ml的标准液。标准工作液：根据使用需要准确吸取一定量的赭曲霉毒素储备液，用流动相稀释，分别配成相当于1ng/ml、10ng/ml、25ng/ml、50ng/ml、100ng/ml的标准工作液。用0.45µm的有机系滤膜过滤，精密量取10µL，注入液相色谱仪，记录色谱图。    样品处理：准确称取试样50.0g（准确到0.1g）于均质器配置的搅拌杯中，加入5.0g氯化钠，加入100mL甲醇+水（8+2）。将搅拌杯置于均质器上，于20000r/min高速搅拌提取1min。提取液经槽纹折叠滤纸过滤于干净的烧杯中。准确移取10.0mL滤液并加入40.0mL水稀释，混合均匀，经玻璃纤维滤纸直接过滤入10mL注射器。    净化过程略。 【色谱条件】色谱柱： C18反相色谱柱, 4.6 mm*250 mm，粒度5 µm流动相:水+乙腈+冰乙酸=102+96+2波长：λex333nm   λem460nm流速：1.0mL/min进样量：10µL柱温：30℃