猪瘦肉中克仑特罗检测方案(液相色谱柱)

电话：021-31233605QQ：3259981160 上海宸乔生物科技有限公司 电话：021-31233605QQ：3259981160 猪肉中克仑特罗检测 猪肉预处理(卜照 GB/T 5009.192-2003) 称取猪瘦肉10克并捣碎 加入20毫升0.1摩尔/升高氯酸匀浆后超声提取20分钟 80度下加热处理30分钟 冷却后以4500转/分钟离心15分钟 转移离心液上层并用1摩尔/升的氢氧化钠调节 pH值到pH9.5 加入8g 氯化钠，用10毫升异丙醇和15毫升乙酸乙酯萃取 在振荡器上振荡提取20分钟，提取完毕，静置5分钟 以 4000转/分钟离心上层乳浊液5分钟 转移并干燥上清液，用1摩尔/升的磷酸二氢钠溶解残留物，使终体积为 10毫升 用0.45微米孔径针式过滤器过滤上述溶液 配制终浓度为40微克/毫升的克仑特罗加标猪肉提取液 HPLC 检测条件： HPLC 仪器 ：Agilent 1100 流动相 A：0.05%磷酸水溶液，用三乙胺调 pH3.0 流动相B：甲醇 洗脱模式：32%流动相B等度洗脱 色谱柱 ：Alltima C18 5u，4.6*150， 货号：88052 检测波长 ：UV244nm 流速：1毫升/分钟 柱温箱：30度 进样体积：10微升 SPE 回收率 =SPE 处理后所得克仑特罗质量/SPE处理前克仑特罗质量 公司限有科技 = SPE 处理后所得克特特罗质量/(加标猪肉提取液中克仑特罗浓度×SPE 上样体积)=380ug/(40微克/毫升*10毫升)=95% SPE 产品： Gracepure SPE C18 fast，500 毫克/3毫升 Cat.No.5138758 SPE 步骤： SPE小柱平衡：先用2倍柱床体积甲醇冲洗柱床，再用2倍柱床体积蒸馏水冲洗柱床上样：缓慢将10毫升克仑特罗加标猪肉提取液加到柱床上 冲洗：2倍柱床体积蒸馏水冲洗柱床 洗脱：3倍柱床体积甲醇冲洗柱床 SPE 回收率 =SPE 处理后所得克仑特罗质量/SPE处理前克仑特罗质量 = SPE 处理后所得克仑特罗质量/(加标猪肉提取液中克仑特罗浓度×SPE 上样体积)=380ug/(40微克/毫升*10毫升)=95% HPLC 检测条件： HPLC 仪器 ：Agilent 1100 流动相A：0.05%磷酸水溶液，用三乙胺调 pH3.0 流动相B：甲醇 洗脱模式：32%流动相B等度洗脱 色谱柱 ：Alltima C18 5u，4.6*150，货号：88052 检测波长 ：UV244nm 上海宸乔生物科技有限公司 流速：1毫升/分钟 柱温箱：30度 进样体积：10微升 克仑特罗线性 进样体积(微升) 峰面积 克罗特罗质量(微克) 0.1 121 0.1 0.5 581.8 0.5 1 1173 1 5 5854.1 5 10 11674.9 10 20 23335.7 20 SPE处理前后HPLC检测图谱 SPE 产品: Gracepure SPE C18 fast,500毫克/3毫升称取猪瘦肉 10克并捣碎加入 20毫升 0.1摩尔/升高氯酸匀浆后超声提取20分钟80度下加热处理30分钟冷却后以4500转/分钟离心15分钟转移离心液上层并用1摩尔/升的氢氧化钠调节pH值到pH9.5加入8g 氯化钠,用10毫升 异丙醇和 15毫升乙酸乙酯萃取在振荡器上振荡提取20分钟,提取完毕,静置5分钟以4000转/分钟离心上层乳浊液5分钟转移并干燥上清液,用1摩尔/升的磷酸二氢钠溶解残留物,使终体积为10毫升用0.45微米孔径针式过滤器过滤上述溶液配制终浓度为40微克/毫升的克仑特罗加标猪肉提取液