食品中抗生素检测方案(蒸发光检测器)

Surwit应用方案 Suruit 赛智科技(杭州)有限公司 11种四环素类抗生素的高效液相色谱 HPLC 检测方案 【四环素】 四环素类抗生素(Tetracyclines)是由放线菌产生的一类广谱抗生素，包括金霉素(Chlotetracycline)、土霉素 (Oxytetracycline)、四环素 (Tetracycline)、及半合成衍生物甲烯土霉素、强力霉素、二甲胺四环素等，其结构均含并四苯基本骨架；广泛用于多种细菌及立克次氏体、衣原体、支原体等所致之感染。四环素类抗生素在酸性和碱性多羟基、烯醇羟基及羰基，在中性条件下能与多种金属离子形成不条溶件性下螯均合不物稳，定与，钙四或环镁素离类子药形物成中不含溶有许性的钙盐或镁盐：与铁离子形成红色络合物，与铝离子形成黄色络合物，在体内Tetracvclines药物与钙离子形成的络合物呈黄色沉积在骨骼和牙齿上，小儿服用会发生牙齿变黄，孕妇服用后其产儿可能发生牙齿变色，骨骼生长抑制。因此小儿和孕妇对此药因慎用或禁服。 关于国家标准中四环素的检出限： 一-动物源性食品中四环素(二甲胺四环素、土霉素、四环素、去甲基金霉素、金霉素、美他环素及多西环素)的检出出-u—50Hg/kg； 化妆品中四环素的检出限： 二甲胺四环素—25mg/kgg定量限： 50mg/kg 土霉素、四环素、去甲基金霉素-——10mg/kg定量限：25mg/kg 金霉素、美他环素、多西环素-5mg/kg 定量限： 10mg/kg 脱水四环素、差向脱水四环素- -2.5mg/kg 定量限：5mg/kg -牛奶及奶粉中土霉素、四环素、金霉素、多西环素的检出限： 牛奶中：土霉素、四环素-s5一g/kg 金霉素、多西环素-——10lg/kg 奶粉中：土霉素、四环素- -25ug/kg 金霉素、多西环素-——50lg/kg 本方案分离检测的11种四环素类抗生素：二甲胺四环素(MINO)、土霉素(OTC)、四环素(TC)、差向四环素 (ETC)、金霉素 (CTC)、差向金霉素 (MCTC)、脱水四环素 (ATC)、差向脱水四环素 (ETAC)、甲烯土霉素(MTC)、去甲基金霉素(DMCTC)、多西环素(DC)。 【样品处理过程】 动物肝脏、肾脏、肌肉组织及水产品：产取均匀式样5g(精确到0.01g)， 置 50mL 聚丙烯离心管中，分别用 20mL、20mL、10mL 0.1mol/L EDTA-Mcllvainc缓冲溶液冰水浴超声提取三次，每次漩涡混匀1min，超声提取 10min， 3000r/min离心10min(温度低于15℃)，合并上清液(控制总提取液的体积不超过50mL)， 定容至50mL， 混匀， 5000r/min 离心 10min (温度低于15℃)，用快速滤纸过滤，待净化。 净化：准确吸取10mL 提取液(相当于 1g样品)以1滴/s的速度过 HLB 固相萃取柱，待样液完全流出后，依次用5mL 水水 5mL 甲醇-水淋洗，弃去全部流出液。2.0Kpa 以下减压抽干 5min， 最后用 10mL甲醇+乙酸乙酯洗脱。将全部洗脱液氮吹干(温度低于40℃)，用适量的甲醇溶解残渣，过0.45Hm 滤膜，待测定。 【色谱条件】 色谱谱： C18， 4.6 mm*250 mm，粒度5m 检测波长：350nm 检测温度：室温 流 速：1mL/min 流动相： A：乙腈 B： 0.01moL/L草酸水溶液；梯度洗脱； Fax： 0571-86631735 应用方案 赛智科技(杭州)有限公司 【谱图】 1-MINO，2-ETC， 3-0TC， 4-TC， 5-DMCTC， 6-MCTC， 7-CTC， 8-MTC， 9-DC， 10-EATC， 11-ATC 【仪器配置】 高压输液泵 0.001-9.999mlmin 2台 紫外检测器 1台 手动进样阀 含触发开关 1套 阀安装支架 1套 液相色谱柱 C18 1支 微量进样器 100uL 1支 维护工具包 液相色谱专用启动工具 1套 色谱工作站 N2000或 Clarify 1套 超声清洗仪 1套 真空抽滤装置 带真空泵 1套 赛智科技(杭州)有限公司E-mail： surwit@hplc.com.cn浙江省杭州市东冠路金盛科技园号楼-楼Tel： 址： www.surwit.com www.hplc.com.cn 关于国家标准中四环素的检出限： ——动物源性食品中四环素（二甲胺四环素、土霉素、四环素、去甲基金霉素、金霉素、美他环素及多西环素）的检出限——50µg/kg；——化妆品中四环素的检出限：二甲胺四环素—25mg/kg  定量限：50mg/kg土霉素、四环素、去甲基金霉素——10mg/kg  定量限：25mg/kg      金霉素、美他环素、多西环素——5mg/kg     定量限：10mg/kg 脱水四环素、差向脱水四环素——2.5mg/kg   定量限：5mg/kg ——牛奶及奶粉中土霉素、四环素、金霉素、多西环素的检出限：牛奶中：土霉素、四环素——5µg/kg        金霉素、多西环素——10µg/kg奶粉中：土霉素、四环素——25µg/kg        金霉素、多西环素——50µg/kg     本方案分离检测的11种四环素类抗生素：二甲胺四环素（MINO）、土霉素（OTC）、四环素（TC）、差向四环素（ETC）、金霉素（CTC）、差向金霉素（MCTC )、脱水四环素（ATC）、差向脱水四环素（ETAC）、甲烯土霉素（MTC）、去甲基金霉素（DMCTC）、多西环素（DC）。