高效液相色谱HILIC模式测定吗啡

刘兴国 金燕赛默飞世尔科技(中国)有限公司 关键词 高效液相色谱； HILIC模式；吗啡 引言吗啡(Morphine) 是一种精神科药物，为镇痛剂，，可减轻末期癌症病患、大面积烧烫伤患者的痛苦，其具有成瘾性，因此也是一种毒品。品文建立了在 HILIC 模式下测定吗啡的方法，相对于2010版药典中使用离子对试剂的方法，操作简单，重现性好，流动相对色谱柱损伤小，是一个简便快速的测定方法。对照品浓度(0.1mg/mL，甲醇溶解)。 图 2. Syncronis HILIC 测定吗啡谱图 图1.吗啡结构 色谱柱： Acclaim hilic-10 3um 4.6×150mm(P/N 074257； S/N 001019)； 柱温：30℃； 测试条件1 进样量：3pL； 仪器： Ultimate 3000 系列，包括LPG3400四元梯度泵和VWD3400多波长检测器；；自动进样器、柱温箱。 流动相组成： ( A： ACN B： 10mM NH，AC PH5.0 ， A：B=85：15 ) 色谱柱： Syncronis HILIC 5um 2.1×150mm(P/N97505-152130； S/N 10032877)； 流速：1.2mL/min 柱温：30℃； 进样量：3pL； 流动相组成：A： ACN B： 10mM NHAC PH5.0， A：B=90：10 流速：0.7mL/min 图3.Acclaim HILIC-10 测定吗啡谱图 测试条件3 色谱柱： Acclaim hilic-1 5um 4.6×150mm(P/N 066843； S/N 001112)； 柱温：30℃； 进样量：3pL； 流动相组成： A： ACN B：10mM NH4AC PH5.0， A：B=85：15 流速：1.2mL/min HILIC-1色谱柱键合相为二醇基、HILIC-10 为脲基、 Syncronis HILIC 为季铵和亚硫酸基团，这三款色谱柱代表了 HILIC 色谱柱键合相的三种类型，即 neutral、charged 和zwitterionic；根据 HILIC 模式保留机理：1、水层和乙腈/水之间的分配作用；2、离子交换作用；3、氢键作用力。HILIC-10 和 Syncronis HILIC 与离子性不突出的吗啡结构之间离子交换机理较弱，在PH5.0时 HILIC-1的离子交换作用也较弱。对于保留起作用的是固定相键合相基团与吗啡氨基和羟基之间的氢键作用力，所以吗啡在键合相为二醇基的 HILIC-1色谱柱上保留最强。在 HILIC-10 和 SyncronisHILIC 上保留应该差不多，但本实验所用 Syncronis HILIC 色谱柱柱体积较小，所以对于该款色谱柱采用了洗脱能力较乙腈/水(85：15)更弱的乙腈/水(90：10)。三款色谱柱在对于吗啡测定上表现出了不同的特点。吗啡在Acclaim HILIC-1上出峰时间最晚，便于将复方药物中的吗啡与其他组分分开，更适合于应用于该化合物的分 析，本方法可结合双三元 SPE 测定复方甘草片中的吗啡方法使用，能够较快地得到分析结果，并且减少离子对试剂的使用，获得较长的色谱柱使用寿命。 ThermoFisherSCIENTIFIC AB_C_LC-