鱼贝类,肌肉中β-雌二醇检测方案(固相萃取仪)

Best ValueGuaranteed Product QualityInnovation to Benefit Customers本手册所有应用均可在博纳艾杰尔官方网站以应用编号搜索下载!118 气代同位素内标测定鱼贝类肌肉中β-雌二醇残留GC-MS法 应用编号：MF10011 1.样品处理 1.1匀质和提取 取鱼贝类肌肉组织，用家庭用搅拌器制样后于-18℃冷冻保存备用。准确称取 5 g试样于50 mL离心管中，加入100 uL 内标标准工作溶液及5mL 乙酸钠缓冲溶液，用匀质器以18000 r/min 匀质2次，每次 30s后，加入10 mL 乙腈，充分旋涡混合1 min， 室温下超声提取 15 min。取出离心管，以 10000 r/min于4℃ 离心10 min， 上清液倒入另一离心管中。残渣中加入10 mL 乙腈，按上述方法再提取一次，合并上清液。 1.2净化 加入 10 mL 正己烷，加塞剧烈振荡1~2 min， 以10000 r/min 于4℃离心5 min， 吸弃正己烷层，下层溶液用正己烷重复洗涤一次，合并离心后的溶液于鸡心瓶。加入0.5 mL 正丙醇，于45℃水浴条件下旋转蒸发至干。残渣中加入1mL乙腈，超声波清洗瓶壁1 min 后，吸至5 mL注射器中。再用1mL 乙腈提取一次，合并溶液并经有机系针头过滤器过滤，再用水稀释至10 mL。 Cleanert C18 SPE 小柱置于 Qdaura 卓睿全自动固相萃取仪中，样品提取液转移至上样管中并设定操作程序如下：6mL甲醇、3 mL 0.1%乙酸溶液和3mL水活化，加样，3mL水淋洗，抽干小柱，最后用9mL 乙腈洗脱并接收(以上操作流速为1mL/min)接收液氮气吹干。 1.3衍生化 在1.2残渣中准确加入100 uL MSTFA2DTE2TM IS 衍生化试剂，盖紧塞子并旋涡混合1 min， 在60℃烘箱中反应 30 min， 冷却至室温，于48 h内进行气相色谱2质谱分析。进行标准溶液的衍生化时，先吸取雌二醇和内标标准工作溶液于去活样品反应瓶中，旋涡混合并氮气吹干，然后同上进行衍生化应。 2.色谱条件 气相色谱柱： DA-5MS毛细管柱(25m×0.32 mm×0.52 um)； 程序升温：柱初始温度120℃(2 min)----250℃(15℃/min)---300℃(5min， 5℃/min)； 载气： He(≥99.999%)； 进样口温度：250℃； 不分流进样1pL； 流速：：1.0 mL /min： 离子源：EI离子源 四极杆温度分别为230℃和150℃； 接口温度280℃； 电离电压 70 Ev； 溶剂延迟3 min； 电子倍增器电压为1106 V； 扫描质量范围为40~500amu。 3.订货信息 产品名称 规格包装 订货号 Qdaura卓睿 全自动固相萃取仪 4通道24位 SPE-40 CleanertS C18 500mg/3mL， 50支/pk S185003 固相萃取柱 DA-5MS气相色谱柱 25 m×0.32mm×0.52 um 1532-2505 针式过滤器 (Nylon) 0.22um，直径13mm，200个/pk AS021320 一次性无针头注射器 5mL，100/pk ZSQ-5ML 1.5mL样品瓶 短螺纹透明带书写 32×11.6 mm， 100/pk 1109-0519 1.5mL样品瓶盖 9 mm 中心孔蓝盖，红色 橡胶/米色 PTFE 隔垫，45. Shore A 1.0 mm，100/pk 0915-1819 甲醇 4×4L/箱 AH230-4