肉制品中农兽药残留检测方案

Best ValueGuaranteed Product QualityInnovation to Benefit Customers Agela Technologies 畜禽肉中头孢噻呋残留量检测LC-MS/MS法 应用编号：AF10030 头孢噻呋(ceftiofur)又名赛得福，是第一个畜禽专用的第三代头孢类广谱抗生素，具有优良的抗菌活性和药动学特点，用于治疗牛、马和猪的呼吸系统疾病。随着头孢噻呋在畜牧业中的广泛使用，不可避免地引起其在动物组织或其产品中的残留。GB/T21314-2007规定了在畜禽肉中头孢噻呋方法检出限为50 ug/kg。 1.样品提取 称取5.00 g(精确到0.01 g)均质好的样品，置于50.0 mL离心管中，加入15.0 mL 乙腈-水(15：2，v/v)， 用均质器均质30 s， 洗涤均质器刀头，洗涤液倒回离心管中，在振荡器上振荡1 min， 4000 rpm离心5 min， 合并上清液于50mL离心管中，再重复用10 mL乙腈-水(15：2，v/v)洗涤刀头提取一次合并上清液，用乙腈-水(15：2，v/v)定容至40mL， 准确移取20mL于100mL鸡心瓶中，35℃旋蒸去除乙腈。 2.净化方法 先将Cleanert" C18 (500mg/3mL)小柱分别用3.0mL甲醇、3.0mL水活化平衡；向除去乙腈层的瓶中加入25 mL0.05 mol/L磷酸盐缓冲溶液，涡旋混匀1 min，用0.1 mol/L NaOH溶液调节pH值为8.5，再以1 mL/min流速过柱；然后用2mL磷酸盐缓冲液淋洗2次，再用2mL超纯水淋洗，最后3mL乙腈洗脱(流速1 mL/min)， 洗脱液于45℃氮气吹干。用1 mL 0.01 mol/L乙酸铵溶液(pH=4.5)溶解残留物，过0.22um滤膜后待测。 3.检测方法 3.1色谱条件 色谱柱：： VenusilASB C18， 2.1×100mm， 5 um， 150 A： 流动相：A相-10mM乙酸铵溶液 (pH=4.5)， B相-乙腈柱 温：35℃； 进样量：5uL； 梯度洗脱：见表1 表1液相色谱梯度洗脱条件 时间(min) 流速(mL/min) A/% B/% 0.00 0.35 98.0 2.0 1.50 0.35 98.0 2.0 3.00 0.35 60.0 40.0 3.01 0.35 10.0 90.0 5.00 0.35 10.0 90.0 5.01 0.35 98.0 2.0 7.00 0.35 98.0 2.0 3.2质谱条件 离子源：电喷雾离子源 扫描方式：正离子扫描 电喷雾电压：5500V 雾化气压力：50 psi 气帘气压力：13 psi 辅助气压力：55 psi 离子源温度：550℃ 采集方式：多反应监测(MRM) Q1、Q3均为单位分辨率 质谱参数(见表2) 表2头孢噻呋的质谱参数 化合物 Q1 Q3 CE/V 头孢噻呋 (Ceftiofur) 524.4 241.2 25 210.2 25 4.实验结果 由表3可知，采用固相萃取结合液相色谱-串联质谱法检测头孢噻呋，加标量为50.0 ug/kg加标回收率大于75%，能够满足检测要求。由图1可看出经Cleanert" C18固相萃取柱净化，采用VenusilASB C18色谱柱检测得到的头孢噻夫峰形良好，且保留时间稳定。 表3头孢噻呋加标回收实验结果(n=3) 物质名称 加标量/(ug/kg) 处理加标回收率/% RSD/% RT/min 头孢噻呋 (Ceftiofur) 50.0 77.32 2.80 1.86 图1头孢噻呋样品加标 50.0 pg/kg液相色谱/串联质谱质量色谱图 结论： 本实验建立了头孢噻呋残留量检测的LC-MS/MS检测方法，并结合固相萃取技术对禽畜类肉中头孢噻呋的残留量进行了测定。对于加标量为50.0 pg/kg的样品进行了检测，回收率大于75%，符合国标要求，固相萃取方法稳定并且色谱柱重现性良好，说明本方法能够用于检测动物源性食品中的头孢噻呋残留量。 5.订货信息 产品名称 规格包装 订货号 VenusilASB C18 5 um， 150 A， 2.1×100 mm VS951002-0 Cleanert"S C18 500mg/3mL， 50/pk S185003 保护柱套 适用于4.6×10 mm和2.1×10 mm SH-100 直联式保护柱芯 5 um， 150 A， 2.1×10 mm VS950102-0S 1.5 mL样品瓶 短螺纹透明带书写32×11.6 mm， 100/pk 1109-0519 1.5mL样品瓶盖 9mm中心孔蓝盖，红色橡胶/米色PTFE隔垫， 45. ShoreA1.0 mm， 100/pk 0915-1819 针式过滤器(Nylon) 13 mm， 0.22um， 200/pk AS021320 一次性注射器 2mL两件式无针头， 100/pk LZSQ-2ML 乙腈UV级 4L/瓶，色谱纯 015-4 甲醇 4L/瓶，色谱纯 S230-4 本手册所有应用均可在博纳艾杰尔官方网站以应用编号搜索下载! www.agela.com.cn