肉制品中添加及非法添加检测方案

深圳逗点生物技术有限公司-biocomma biotech co.，ltd.- 食品中苏丹红染料检测的固相萃取方法 (Silibase TM ALN) 一、实验目的 本实验利用固相萃取法作为样品的前处理方法， HPLC法作为检测手段。该方法可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂的用量。 二、实验目标物 苏丹红1(CAS：842-07-9)， 苏丹红Ⅱ (CAS：3118-97-6)，苏丹红Ⅲ(CAS：85-86-9)，苏丹红Ⅳ(CAS：85-83-6)。 三、应用范围 本方法适用于食品中苏丹红染料的HPLC检测及确证。 四、参考标准 推荐性国家标准《GB/T 19681-2005食品中苏丹红染料的检测方法高效液相色谱法》。 五、实验材料 Biocomma° SilibaseALN固相萃取柱500mg/3mL。 六、实验方法 1、样品提取 称取均质试样2.0g试样(精确至0.001g)于50mL离心管中，加入20mL正己烷，超声5min，过滤，用10mL正己烷洗涤残渣数次，至洗出液无色，合并正己烷液，用旋转蒸发仪浓缩至5mL以下。 2、SPE柱净化 (1)活化：向氧化铝柱小柱中加入6.0mL正己烷活化。 (2)上样和洗脱：在柱中保持正己烷液面为2mm左右时上样，立即倒入上述待净化溶液，用正己烷少量多次淋洗浓缩瓶，一并注入层析柱，待样液完全流出后，视样品中含油杂质的多少用10-30mL正己烷洗柱，直至流出液无色，弃去全部正己烷淋洗液，用含5%丙酮的正己烷液60mL洗脱，并收集洗脱液。 (3)重新溶解：50℃缓慢氮气流条件下吹至近干，用丙酮转移并定容至5mL，经0.45um有机滤膜过滤后上液相色谱仪测定。 3、HPLC条件 色谱谱： XR-ODSⅡ C18(2.0mmX75mmX2.2um) 流动相：A[0.1%甲酸水溶液-乙腈=85：15]；B[0.1%甲酸的乙腈溶液]：丙酮=80：20]梯度洗脱 表1梯度洗脱条件 时间/min A(%) B(%) 0.00 25 75 1.50 25 75 4.00 100 0 8.00 100 0 8.01 25 75 13.00 Stop 流速：1mL/min 柱温：30℃ 进样体积：10pL 七、实验结果 1、10ppb甜橙基质中苏丹红染料的添加回收结果 加标回收率均大于80%，平行样间标准偏差小于5%，符合标准要求。 表210ppb甜橙基质中苏丹红染料的添加回收结果 回收率(%) 名称 1 2 3 平均回收率(%) RSD(%) 苏丹红1 90.24 95.67 94.35 93.42 3.03 苏丹红Ⅱ 92.56 95.98 99.13 95.89 3.43 苏丹红Ⅲ 95.49 99.84 90.19 95.17 5.08 苏丹红Ⅳ 90.59 95.16 101.23 95.66 5.58 2、空白样品添加苏丹红染料残留物色谱图 本号：ALN-Ww.biocomma.cn