蔬菜、水果及制品中农兽药残留检测方案

保留时间校准软件的使用 4 AN_C-GCMS-2014-008 关键词 单四级杆质谱仪；农药； TG-5sil色谱柱；呆留时间校准 目标 利用农药的单四极杆质谱扫描的数据库，库中包含596种农药的名称、保留时间、定量离子、定性离子等信息，并结合 thermofisher 独一无二的 T-SIM功能快速建立用户所需要的多农残分析的仪器采集方法和数据处理方法，解决了建立多农农监控 SIM 方法中繁琐的分组时间确定问题，简化了多农残 SIM方法建立过程中的离子输入；此外保留时间校准软件，可以实现数据库可以在任何一台使用相同类型色谱柱的仪器上进行使用，常规的色谱柱的维护也能保证一致的保留时间，因而可以大大节约在数据处理上更新保留时间所花费的时间。 引言 近年来，农药的种类和应用规模不断扩大，化学结构组成日益复杂，并且日趋高效和低剂量化，特别是人们对长期摄入低水平农药残留所导致的各种慢性及远期效应的关注和国际贸易等的原因，使农药残留的分析对象、样本数量和测定难度大大增加。因此，建立省时、省力的农药测定系统平台是快速、准确的进行农药多残留控制的基础和保障。 农药残留分析中主要包括样品前处理、仪器分析、数据处理等步骤，样品前处理技术发展至今QuEChERS 方法公认是比较简单、省时省力、节约溶剂、高通量的样品前处理方法；对于农药多残留分析，仪器分析和数据处理也是一项耗时费力的工作。本文的目的在于建立常见的596种农药的数据库，包含保留时间、定量离子、定性离子等信息，并结合 thermofisher 独一无二的 T-SIM 功能快速建立用户所需要的多农残分析的仪器采集方法和数据处理方法，解决了建立多农残监控 SIM 方法中繁琐的分组时间确定问题，简化了多农残 SIM 方法建立过程中的离子输入问题；此外保留时间校准软件，，可以实现数据库 可以在任何一台使用相同类型色谱柱的仪器上进行使用，常规的色谱柱的维护也能保证一致的保留时间，因而可以大大节约在数据处理上更新保留时间所花费的时间。 所建立的方法用于果蔬中有机磷农药的测定，效果良好。 仪器 Thermo Scientific'M ISQ 单四极杆气质联用仪，包括： -TRACE 1310气相色谱，配程序升温进样口 -ISQLT 单四极杆质谱 -AS1310自动进样器 Thermo ScientificTraceFinder 3.1 数据处理系统 恒温干燥箱(Thermo Scientific) 离心机 (Thermo Scientific ) 天平 漩涡混合器 (Thermo Scientific) 耗材 色谱柱： TG-5silMS (30mx0.25 mm×0.25pm) (ThermoScientific， PN 26096-1420) 试剂与标准品 乙腈：色谱级。 冰醋酸。 无水醋酸钠。 0.1%醋酸-乙腈溶液：加10mL冰醋酸到990 mL 的乙腈。 无水硫酸镁，用前在500℃马弗炉内烘5h，200℃时取出贮存于干燥器中，冷却备用。 C18吸附剂：40-60pm。 乙二胺-N-丙基硅烷(PSA)吸附剂：40-60pm。 农药标准物质：标准物质清单见表1，标准物质纯度>95%。 标准溶液的制备 标准储备溶液 准确称取适量标准品(精确至0.1mg)，用丙酮溶解，配制成成度为1000 pg/mL 的标准储备溶液，-18℃避光保存，有效期为3个月。 混合标准中间溶液 移取一定体积的单个农药标准储备溶液于 100mL 容量瓶中，用丙酮+正己烷混合溶剂定容至刻度。混合标准溶液避光4℃保存，可使用一个月。 基质混合标准工作溶液 根据需要将混合标准中间溶液用空白基质稀释成适当浓度的基质标准工作液，现用现配。 农药数据库的建立 农药数据库的内容包括596种常见农药的名称、CAS号、分子式、分子量、保留时间、定量离子、定性离子等信息，储存于 Tracefinder 软件的化合物数据库当中。 农药残留分析方法的建立 建立分析方法时，可以直接从数据库中选取要分析的目标化合物，相关化合物的所有信息即刻转入到方法中，无需手动输入化合物的任何信息，使用方便，节约了大 量的工作时间，也避免了手动输入引起的错误. 建立的农药分析方法包包含了仪器采集方法和数据处理方法，可直接用于相同配置的另一仪器上对农药残留进行分析。 保留时间校准软件可以实现两台相同配置仪器间的保留时间重现，方法是采用正构烷烃分别在两台仪器上进样，分别记录保留时间，采用保留时间校准软件计算，即可实现保留时间的完全重现。该功能也可用于色谱柱柱头维护后的保留时间修正，即使色谱柱柱头截去一段后通过保留时间校准软件修正仍可实现保留时间的完全重现，仪器采集方法和处理方法无需进行修改。 取试样可食用部分，粉碎并混合均匀，准确称取15g(精确至0.01g)，置于100mL塑料离心管，加入6.0g无水硫酸镁，1.5g醋酸钠，15mL0.1%冰醋酸/乙腈溶液，均质提取2 min。以 10000 r/min 离心 10 min。准确吸取10mL提取液于旋蒸瓶中，蒸至近干，Nz吹干，用2.0mL乙腈涡混溶解残渣。于另一塑料离心管中分别称入200mgC18、150 mg PSA 吸附剂，将上述2mL溶解液转入此离心管中，涡混2 min， 5000 r/min 离心3 min。用一次性注射器取上清液，过 0.45 pm 滤膜，供气相色谱-质谱测定。 实验条件 色谱柱： TG-5silMS (30mx0.25 mm×0.25 pm)； 柱温：40℃(1.5 min)， 25℃ /min 到90℃(1.5min))， 25℃ /min 到180℃ (0min)， 5℃ /min 到280℃ (0min)， 10℃ /min 到300℃ (5min) ； 进样模式：不分流进样，不分流时间为 1min； 进样量：1pL； 进样口温度：75℃(0.1min) ， 2.5℃ /sec 到 300℃ (3min)，14.5℃ /sec 到330℃ (20 min)；载气：氦气(99.999%)，恒流模式， 1.2 mL/min； 质谱离子源温度：300℃，传输线温度：300℃； 扫描模式：定时选择离子监测模式 (timed-SIM) 结果与讨论 建立的农药分析方法包应用于46种有机磷农药的检测，结果如下。 线性关系及测定低限：准确移取标准中间液适量，添加到空白样品按上述前处理方法处理得到的基质溶液中，分别配制得到浓度小0、20、50、100、200、500pg/L的基质标准工作液，供气相色谱质谱测定。以测定峰面积为纵坐标，对应的标准溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线。 定量离子、保留时间、方法检出限(3倍信噪比)列于表1。 回收率及精密度实验：用标准添加法，在空白胡萝卜样品中，添加农药标准溶液，做加标回收实验，按规定方法进行提取、净化和测定，添加浓度为 10pg/kg、50pg/kg两个水平，各做5个平行，结果见表1。 表1.检测化合物名称、定量离子、检出限、回收率和精密度 农药名称 定量离子 保留时间 方法检出限(ug/kg) 准确度及精密度 添加10pg/kg 添加50pg/kg 回收率(%) RSD(%) 回收率(%) RSD(%) Methamidophos 94.00 8.00 5.0 87.0 8.7 88.6 3.5 Dichlorvos 109.00 8.09 5.0 91.9 6.5 90.1 6.2 Mevinphos 127.00 9.29 5.0 89.0 6.9 90.7 9.5 Acephate 136.00 9.35 5.0 87.1 4.9 85.4 8.6 Omethoate 156.00 10.59 5.0 90.6 3.3 79.5 7.0 Ethoprophos 158.00 10.98 5.0 80.9 3.0 90.6 7.1 Dicrotophos 127.00 11.16 5.0 85.9 6.9 85.5 5.9 Naled 109.00 11.19 5.0 92.8 7.6 85.9 4.7 Sulfotep 322.00 11.29 5.0 97.6 7.7 91.4 4.7 Monocrotophos 127.00 11.33 5.0 90.8 8.7 92.9 5.8 Phorate 75.00 11.54 5.0 87.3 8.1 93.8 5.2 Dimethoate 87.00 11.86 5.0 84.9 2.9 85.9 5.6 Terbufos 231.00 12.38 5.0 97.0 8.9 83.6 7.2 Diazinon 179.00 12.50 5.0 92.2 3.2 82.9 1.9 建立的农药数据库利用 tracefinder 软件可以实现数据库的共享，无需用户自行进标准品确定保留时间，也无需自行对分析物保留时间、选择离子等进行设定。Tracefinder软件中的样品分析方法包可直接为用户提供农药残留检测的服务，即使在没有标准品的情况下也可对未知样品 的农药残留进行筛选。 将该方法用于实际样品中46种有机磷农药的测定，结果表明，46种农药的平均回收率为76.9-105.9%，5次平行测定的 RSD 值≤9.5%，方法测定低限为5pg/kg。该数据库用于实际样品测定效果良好，可行性强。 赛默飞世尔科技(中国)有限公司 免费服务热线：800810 5118400 6505118(支持手机用户)