粮食及加工品中农兽药残留检测方案

anon海能仪 器民族仪器 品质典范 食品中汞的测定方法 (冷原子吸收光谱法) 1.原理 样品经过硝酸-硫酸、硝酸-硫酸-五氧化二钒或硝酸-过氧化氢高压消解，使样品中的汞转为离子状态，在强酸性中以氯化亚锡为还原剂，将离子状态的汞定量的还原为汞原子。在常温下易蒸发为汞原子蒸气，以氮气或干燥清洁空气为载气，将汞吹出。而汞原子对波长 253.7nm的共振线具有强烈的吸收作用，在一定浓度范围其吸收大小与汞原子浓度的关系符合比尔定律，与标准系列比较定量。最低检出浓度为0.11-0.30ng/ml，最低检出量为 0.002mg/kg。该方法适用于各类食品中总汞的测定。 2.试剂 除特别注明外，本标准所用试剂均为分析纯试剂，水均为去离子水。 玻璃对汞有吸附作用，因此测汞所用一切器皿需用硝酸溶液(1+3)浸泡，洗净后备用。 )硝酸(优极纯) 硫酸(优极纯) 30%过氧化氢 300g/L 氯化亚锡溶液：称取 30g氯化亚锡(SnCl2·2H20)，加少量水，再加2ml硫酸使溶解后，加水稀释至100ml，放置冰箱保存。 变色硅胶：干燥用。 硫酸+硝酸+水混合酸液(1+1+8)：量取10ml硫酸，再加入10ml硝酸，慢慢倒入80ml水中，混匀后冷却。 五氧化二钒。 50g/L 高锰酸钾溶液：配好后煮沸10min，静置过夜，过滤，贮于棕色瓶中。 )200g/L 盐酸羟胺溶液。 (10)汞标准储备溶液：精密称取 0.1354g 于干燥器干燥过的二氯化汞，加混合酸(1+1+8)溶解后移入100ml容量瓶中，并稀释至刻度，混匀，此溶液每毫升相当于1mg 汞。 **为了避免在配制稀汞标准溶液时玻璃对汞的吸附，最好先在容量瓶内加进部分底液，再加入汞贮备液。 为保证汞贮备液稳定性，通常在溶液中加少量重铬酸钾。配制方法：取0.5g重铬酸钾，用水溶解，加50ml优极纯硝酸，加水至1L。用此保存液来配制汞标准贮备溶液(1ml含10pg汞)可保存2年不变，若配制汞标准应用液(1ml含0.1ug汞)，置于冰箱中保存10天不变。 (11)标准使用液：吸取1.0ml 汞标准溶液，置于100ml容量瓶中，加混合酸(1+1+8)稀释至刻度，此溶液每毫升相当于10 ng汞。再吸取此液1.0ml，置于100ml容量瓶中，加混合酸(1+1+8)稀释至刻度，此溶液每毫升相当于0.1g汞，临用时现配。 3.仪器 消化装置。 压力消解器(或压力消解罐或压力溶弹)100ml容量。 微波消解装置。 测汞仪。 汞蒸气发生器器25ml布氏吸收管代替。 4.操作方法 实验前先做试剂空白实验，检查所用试剂、实验用水及器皿是否符合要求，如空白值过高，实验用水、试剂须提高纯度，仪器再次清洗，必要时用稀硝酸煮沸热洗。 4.1样品消化 (1)回流消化法 A. 粮食或水分少的食品：称取10.00g样品，置于消化装置锥形瓶中，加玻璃珠数粒，加45ml硝酸、10ml硫酸，转动锥形瓶，防止局部炭化。装上冷凝管后，小火加热，待开始发泡即停止加热，发泡停止后，加热回流2h。如加热过程中溶液变棕色，再加5ml硝酸，继续回流2h，放冷后从冷凝管上端小心加20ml水，继续加热回流10min， 放冷，用适量水冲洗冷凝管，洗液并入消化液中，将消化液经玻璃棉过滤于100ml容量瓶内，用少量水洗锥形瓶、滤器，洗液并入容量瓶内，加水至刻度，混匀。取与消化样品相同量的硝酸、硫酸，按同一方法做试剂空白试验，待测。 B..植植物油及动物油脂：称取5.0g样品，置于消化装置锥形瓶中，加玻璃珠数粒，加入7ml硫酸，小心混匀至溶液颜色变为棕色，然后加40ml硝酸，装上冷凝管后，以下按4.1.1.1自“小火加热"起依法操作。 **含油脂较多的食品，消化时易发泡外溅，可在消化前在样品中先加少量硫酸，变成棕色(轻微炭化)，然后加硝酸可减轻发泡外溅现象，但避免严重炭化。 C. 类类、豆制品：称取20.00g捣碎混匀的样品(类类须预先洗净晾干)，置于消化装置锥形瓶中，加玻璃珠数粒及30ml硝酸、5ml硫酸，转动锥形瓶，防止局部炭化。装上冷凝管后，以下按4.1.1.1自"小火加热"起依法操作。 D. 肉、蛋类：称取10.00g捣碎混匀的样品，置于消化装置锥形瓶中，加玻璃珠数粒及30ml硝酸、5ml硫酸，转动锥形瓶，防止局部炭化。装上冷凝管后，以下按4.1.1.1自"小火加热“起依法操作。 E.牛乳及乳制品：称取20.00g牛乳或酸牛乳，或相当于20.00g牛乳的乳制品(2.4g全脂乳粉，8g甜炼乳， 5g淡炼乳)，置于消化装置锥形瓶中，加玻璃珠数粒及30ml硝酸，牛乳或酸牛乳加10ml硫酸，乳制品加5ml硫酸，转动锥形瓶，防止局部炭化。装上冷凝管后，以下按4.1.1.1自"小火加热"起依法操作。 **在消化过程中，由于残余在消化液中的氮氧化物对测定有严重干扰，使结果偏高。尤其硝酸-硫酸回流法，硝酸用量大，消化后需加水继续加热回流10min， 使剩余二氧化氮排出，消解液趁热进行吹气驱赶液面上的氮氧化物，冷却后滤去样品中蜡质等不易消化物质，避免干扰。 (2)五氧化二钒消化法 本法适用于水产品、蔬菜、水果中总汞的测定。 取可食部分，洗净，晾干，切碎，混匀。取 2.50g水产品或 10.00g蔬菜、水果，置于50~100ml锥形瓶中，加50mg五氧化二钒粉末，再加8ml硝酸，振摇，放置4h，加5ml硫酸，混 匀，然后移至140℃砂浴上加热，开始作用较猛烈，以后渐渐缓慢，待瓶口基本上无棕色气体逸出时，用少量水清洗瓶口，再加热5min，放冷，加5ml 50g/L高锰酸钾溶液，放置4h(或过夜)，滴加200g/L 盐酸羟胺溶液使紫色褪去，振摇，放置数分钟，移入容量瓶中，并稀释至刻度。蔬菜、水果为 25ml，水产品为100ml。待测。 取与消化样品相同量的五氧化二钒、硝酸、硫酸，按同一方法进行试剂空白试验。 (3)高压消解法：本方法适用于粮食、豆类、蔬菜、水果、瘦肉类、鱼类、蛋类及乳与乳制品类食品中总汞的测定。 A. 粮食及豆类等干样：称取1.00g经粉碎混合均匀后过40目筛孔的样品，置于聚四氟乙烯塑料内罐内，加5ml硝酸放置过夜，再加3ml过氧化氢，盖上内盖放入不锈钢外套中，将不锈钢外盖和外套旋紧密封，然后将消解器放入普通干燥箱(烘箱)隔板上，关好箱门，通电加热，温升至120℃后保持恒温2~3h，至消解完成，关断电源，自然冷至室温，开启消解罐，将消解液用玻璃棉过滤至25ml容量瓶中，用少量去离子水淋洗内罐，经玻璃棉滤入容量瓶内，定容至25ml，摇匀。同时做试剂空白试验，待测。 B..蔬菜、瘦肉、鱼类及蛋类水分含量高的鲜样：将鲜样用捣碎机打成匀浆，称取匀浆3.00g置于聚四氟乙烯塑料罐内，加盖留缝，于65℃烘箱中鼓风干燥或一般烘箱至近干，取出，加5ml硝酸放置过夜，以下按4.1.3.1自"再加3ml过氧化氢"起依法操作。 (4)微波消解法：称取0.10~0.50g样品于消解罐中，加入1~5ml硝酸、1~2ml过氧化氢，盖好安全阀后，将消解罐放入微波炉消解系统中，按照预先设定的程序(表1)进行升温消化，至消解完全，冷却后用硝酸溶液(1+9)定量转移并定容至25ml(低含量样品可定容至10ml)，混匀待测。 微波消化升温程序 步 骤 1 2 3 4 5 功率，% 100 100 100 100 100 压力，Psi 20 40 85 135 175 升压时间， min 10 10 10 10 10 保压时间， min 5 5 5 5 5 排风量，% 100 100 100 100 100 注：1Psi=6.89kPa (Psi：磅力每平方英寸，是进口仪器常用非法定压力单位，为便于使用，本方法不再换算成法定压力单位)。 4.2测定： 按仪器要求调整好，备用。 测汞仪中的光道管、气路管道均要保持干燥、光亮、平滑、无水气凝集，否则应分段拆下，用无汞水煮，再烘干备用。 从汞蒸气发生瓶至测汞仪的连接管道不宜过长，宜用不吸附汞的氯乙烯塑料管。测定时应注意水气的干扰，从汞蒸气发生器产生的汞原子蒸气，通常带有水汽，进仪器前如不经干燥，会被带进光道管，产生汞吸附，降低检测灵敏度。因此通常汞原子蒸气必须先经干燥管吸水后再进入仪器检测。常用的干燥剂以变色硅胶为好，当干燥管硅胶吸水变色后，提示需更换 干燥齐，以保证仪器光道管的干燥。 (1)吸取10.0ml样品消化液，置于汞蒸气发生器内，连接抽气装置，沿壁迅速加入1ml 300g/L氯化亚锡溶液，立即通入流速为 1.5L/min 的氮气或舌活性炭处理的空气，使汞蒸气经过硅胶干燥管进入测汞仪中，读取测汞仪上最大读数，同时做试剂空白试验。 (2) 标准曲线的绘制：：吸取0.00，0.10，0.20，0.30，0.40，0.50ml汞标准使用液(相当0， 0.01，0.02，0.03，0.04，0.05ng汞)，置于试管中，各加3.4mol/L 混合酸至10ml，以下按4.2.1自"置于汞蒸气发生器内"起依法操作，绘制标准曲线。 (3))五氧化二钒消化法标准曲线的绘制：吸取0.0，1.0，2.0，3.0，4.0， 5.0ml汞标准使用液(相当0，0.1，0.2， 0.3，0.4，0.5ug汞)，置于6个50mL容量瓶中，各加1ml硫酸(1+1)、1mL 50g/L 高锰酸钾溶液，加20ml水，混匀，滴加(200g/L)盐酸羟胺溶液使紫色褪去，加水至刻度混匀，分别吸取10.00ml(相当0，0.02，0.04，0.06，0.08，0.10ug汞)，以下按4.2.1自"置于汞蒸气发生器内"起依法操作，绘制标准曲线。 5.计算 (A1-A2)×11000 X=MXV2/V1×1000 式中：X-样品中汞的含量， mg/kg或 mg/L； A1-测定用样品消化液中汞的质量，ng； A2-试剂空白液中汞的质量， u g； M-样品的质量或体积，g或ml； V1-样品消化液总体积，ml； V2-测定用样品消化液体积， ml。 6. 注意事项 (1)本方法在不同实验室分别应用F732-G、F732-S、CG-1型、590型测汞仪及 WFX-1F2冷原子吸收方式进行验证，最低检出浓度为0.11~0.30ng/ml，标准曲线相关系数范围为0.9994~0.9999；在各类食品中的回收率为 90.1%~102.2%，油样回收偏低；相对标准偏差为9.5%~12.2%；用标准参考样品 NBS1570 核对结果的准确性，在五个实验室进行准确度试验均获得好的结果。 (2)用五氧化二钒消解可直接在50~100ml 锥形瓶中进行，不需要回流装置，适宜大批样品的消解，如在锥形瓶口加一个长颈漏斗效果更好(回流作用)，但注意不能加热时间过长，更不能烧干，如能按照上述条件控制，用五氧化二钒消解与回流法消解，经统计t检验，，二者无显著差别。 高压消解法消化样品具有快速、简便、防污染的特点。但使用高压消解器时必须按使用说明操作，应注意控温、消解器内罐容量和取样量等方面。为了防止在消解反应中产生过高的压力，将样品先冷消化放置过夜是必须的。 微波消解法是目前汞测定中消化样品的最佳方法，它具有消解时间最短，污染可能性最小，方法简便安全的优点。如果条件允许，推荐使用此方法。 --