饮料中安赛蜜检测方案

LC-5500高效液相色谱法测定饮料中安赛蜜(乙酰磺胺酸钾) 北京东西分析仪器有限公司 摘要：本文根据 GB-T 5009.140-2003《饮料中乙酰磺胺酸钾的测定》建立了利用我公司高效液相色谱LC-5500测定饮料中安赛蜜的方法：色谱柱： XBP-CI8柱；流动相：硫酸铵(0.02mol/L)+甲醇+乙腈+10%硫酸(1mL)=740+170+190+1；流速：0.7mL/min ；进样量 ：20pL；紫外检测器，波长214nm。柱温：室温。方法在4.0 pg/mL到20.0ug/mL之间线性良好，线性相关系数 r≥0.999。实验证明该方法精密度和准确度好，样品处理简单，适用于常规质量检测。 关键词：LC-5500高效液相色谱；安赛蜜(乙酰磺胺酸钾)；饮料 食品添加剂是指为改善食品品质和色、香、味以及防腐和加工工艺的需要而加入食品中的化学合成或者天然物质。食品添加剂是食品工业的基础原料，对食品的生产工艺、产品质量、安全卫生都起到至关重要的作用。但是违禁、滥用以及超范围、超标准使用添加剂，都会给食品质量、安全卫生以及消费者的健康带来巨大的损害。食品管理部门对这些添加剂的使用限量有严格的规定。 安塞蜜又称为乙酰磺胺酸钾、A一K糖、阿尔适尔芳钾。它是一种食品添加剂，能增加食品的甜味，并且没有营养，口感好，无热量，在人体内不代谢、不吸收，是目前世界上第四代合成甜味剂。但是国标 GB2760-2007《食品添加剂使用卫生标准》中规定饮料中安赛蜜含量不得超过0.3g/kg。 1L 实验部分 1.1 仪器及试剂 1.1.1试剂及试剂的配制 1.1.1.1甲醇(色谱纯)。 ( East & W est Analytical Instruments， Inc.Building A2， 6th F loor， No. 5 Plaza，#9 Che Gong Z huang S t，Western District， Beijing， China， 100044 ) ( T el ： 010-88393500 ) 1.1.1.2乙腈。 1.1.1.310%硫酸。 1.1.1.4中性氧化铝；层析用。100目~200目. 1.1.1.5硫酸铵(0.02mol/L)：称酸硫酸铵2.642g，加水溶解至1000mL，用溶剂过滤器过滤后备用。 1.1.2安赛蜜标准溶液的配制 1.1.2.1安赛蜜(乙酰磺胺酸钾)标准储备液(1mg/mL)：准确称取乙酰磺胺酸钾 0.1000g，用流动相溶解后移入100mL容量瓶中，并用流动线稀释至刻度。 1.1.2.2安赛蜜(乙酰磺胺酸钾)标准工作液的配制：吸取乙酰磺胺酸钾储备液2mL于50mL容量瓶，加流动相至刻度，然后分别吸取此液1mL、2mL、3mL、4mL、5mL于10mL容量瓶中，加流动相至刻度，得到含安赛蜜(乙酰磺胺酸钾)4pg/mL、8ug/mL、12pg/mL、16pg/mL、20pg/mL的标准工作液。 1.1.3仪器 LC5500 高效液相色谱仪(具紫外可见检测器、单泵、柱恒温箱、脱气机等)； 超声波水浴(流动相脱气用) 离心机 溶剂过滤器 层析柱，可用10 mL注射器筒代替，内装 3cm 高的中性氧化铝。 1.2 仪器条件 色谱柱：C18反相色谱柱(粒径 5 pm， 250 mmx4.6 mm).流动相：硫酸铵(0.02mol/L)+甲醇+乙腈+10%硫酸(1mL)=740+170+190+1，经0.45 五栋大楼A2座6层， 100044 um 膜过滤后备用。 流速：0.7 mL/min. 检测波长：214nm。 柱温：：室温。 进样量：20pL。 1.3 样品处理过程 吸取2.5mL试式，称重，加水约 20mL稀释后混匀，以4500r/min 离心15min， 上层清液转入中性氧化铝柱，待试样液流至柱表面时，用流动相洗脱，收集洗脱液 25mL，摇匀后超声脱气，经0.45pm滤膜过滤， 取20pL进高效液相色谱仪。 2结果与讨论 2.1 标准曲线的绘制 将安赛蜜(乙酰磺胺酸钾)的标准工作液，进行HPLC分析，以峰面积为纵坐标，以浓度为横坐标绘制标准曲线，如图1、图2所示。 图1安塞蜜(乙酰磺胺酸钾)标样色谱图 ( T el ： 010-88393500 ) ( Fax： 010-88393506 Web： www.ewai-group.com M icroblog： e.weibo . com/dongxifenxi ) 0.020 [浓度(] 图2安塞蜜(乙酰磺胺酸钾)校准曲线 2.2 样品分析及结果 2.2.1试样定 将处理后的样品溶液夜入 HPLC中分析，得到样品谱图，如图3所示，根据峰面积和标准曲线得到样品中安赛蜜(乙酰磺胺酸钾)的含量。 图3某种饮料样品安赛蜜(乙酰磺胺酸钾)谱图 2.2.2分析结果的表述 样品中安赛蜜(乙酰磺胺酸钾)的含量按下式计算： ( East & W est Analytical Instruments， Inc.Building A2， 6th F loor， No. 5 Plaza，#9 Che Gong Z huang S t，Western District， Beijing， China， 100044 ) ( T el ： 010-88393500 ) ( Fax： 010-88393506 Web： www.ewai-group.com M icroblog： e.weibo . com/dongxifenxi ) 式中： X----试样中乙酰磺胺酸钾的含量，单位为 mg/kg 或 mg/L c----由标准曲线得到的乙酰磺胺酸钾的浓度，单位为ug/mL V----试样稀释总体积。单位为mL m----羊样质量，单位为g或mL。 2.2.3分析结果 根据标准曲线及上述公式计算检出结果为 0.099g/kg，符合GB2760-2007《食品添加剂使用卫生标准》中规定的要求，所以该饮料是合格产品。 3结论 用LC-5500 高效液相色谱分析饮料中安赛蜜(乙酰磺胺酸钾)的含量，线性范围良好，峰形较好，重复性较好。该方法操作方便、快速准确，适用于常规质量检测。 实验检测的饮料样品安赛蜜(乙酰磺胺酸钾)的含量符合GB2760-2007《食品添加剂使用卫生标准》中规定的要求，所以该饮料是合格产品。 ( East & W est Analytical Instruments， Inc.Building A2， 6th F loor， No. 5 Plaza，#9 Che Gong Z huang S t，Western District， Beijing， China， 100044 ) 北京东西分析仪器有限公司Fax：eb： www.ewai-group.comMicroblog： e.weibo.com/dongxifenxi北京市西城区车公庄大街号 East & West Analytical Instruments， Inc.Building A， th Floor， No. Plaza，# Che Gong Zhuang St，Western District， Beijing， China， 京东西分析仪器有限公司Tel： ax： eb： www.ewai-group.comMicroblog： e.weibo.com/dongxifenxi北京市西城区车公庄大街号