中药中有效成分含量分析检测方案

北京鸿作盛威科技有限公司 希望能够给您提供更精确、更完美的解决方案 气相色谱法检测黄连配伍肉桂前后的桂皮醛 要：肉桂CinnamomumcassiaPresl为樟科（Lauraceae）植物，是一种常用中药，性大热，味甘辛，具补阳，温肾，祛冷，通脉，止痛功效。临床上常用于补火助阳，散冷止痛，活血通经等。其主要成分为桂皮醛和肉桂酸。 考察黄连配伍肉桂前后化学成分的变化；定量测定黄连配伍肉桂前后桂皮醛含量的变化。方法：气相色谱法。OV-101毛细管柱。柱长25m，内径0.2mm，氢焰检测器，柱温100℃，气化室220℃。检测室220℃，程序升温6℃/min。101℃～180℃。氮气流速50mL/min。，内标物正十一烷。结果：黄连与肉桂配伍后桂皮醛含量下降，且下降程度与黄连比例有关。所测桂皮醛与其它组分具有良好的分离度。本法最低检丈量为0.01μg，线性范围为0.0261～1.5657μg。加样回收率为98.83％，RSD=1.7％。结论：本方法操纵简单，结果正确。 关键词：黄连；肉桂；桂皮醛；气相色谱法黄连CoptichinensisFranch为毛茛科（Ranunculsceae）植物，性冷，味苦，善清热燥湿，泻火解毒，主要成分为生物碱。黄连配伍肉桂，即《韩氏医通》中的交泰丸，二药冷热共伍，相辅相成，治疗心肾不交之失眠症。关于二药配伍后黄连中的化学成分变化已经有文献报道，本文采用气相色谱法。以正十一烷为内标，对配伍后的桂皮醛进行了含量测定。该方法简便，快速，正确，有效，可定量用于研究肉桂配伍后化学成分的变化。 1材料与仪器黄连为毛茛科植物味连CoptichinensisFranch；肉桂为樟科植物肉桂CinnamomumcassiaPresl，经北京中医药大学鉴定教研室鉴定。 GC-15A型气相色谱仪，C-R4A数据处理机（日本岛津）。 内标物正十一烷购于北京化学试剂公司，桂皮醛对照品购于中国药品生物制品检定所，批号为710—9005，经面积回一化法检查计算，含量为96.73％（n=3）。 2方法与结果2。1色谱分析条件OV-101毛细管柱，柱长25m，内径0.2mm，氢焰检测器，柱温100℃，气化室220℃，检测室220℃，程序升温6℃/min，分流比50：1，100℃～180℃，氮气流速50mL/min。 2。2标准曲线的制备精密量取桂皮醛对照品5OμL（体积X密度=O.050×1.05=0.0525mg）置lOmL棕色容量瓶中，加甲醇定容至刻度。另取正十一烷（作内标）29.45mg于10mL容量瓶中，以甲醇定容至刻度备用。 用移液管分别精密量取上述桂皮醛对照品0.01，0.05，0.1，0.3，0.4，0.6mL，置2mL容量瓶中，再分别加人上述正十一烷内标液O.4mL，以甲醇定容，进样1μL，按上述色谱条件进行测定，并以桂皮醛对照品与内标物正十一烷的蜂面积之比为纵坐标，以桂皮醛的量（μg）为横坐标，求得回回方程为：Y=2.1648 0.004347r=0.9992线性范围为：0.0261～1.5657μg。 2。3校正因子的测定取浓度为5.219mg/mL的桂皮醛对照品溶液0.01mL，置2mL容量瓶中，加进浓度为2.945mg/mL。的正十一烷内标液0.4mL，以甲醇定容，按上述色谱条件用内标法进行测定，连续测定lO次，结果测得校正因子f为1.9369，RSD为2％。 2。4供试品溶液的制备与测定黄连、肉桂药材分别粉碎，过40目筛，置密闭容器中备用。精密称取肉桂粉末O.5g加进沸水微沸5min，过滤。滤渣加水30mL，微沸20min，过滤，合并滤液，滤液再分别用乙酸乙酯萃取（20mLx4），用乙酸乙酯定容至100mL容量瓶中作为样品液（1）备用再精密称取黄连粉末0.25，0.5，2.5g，分别加水30mL，微沸30min，各精密加进肉桂粉末0.5g，微沸5min，过滤，按样品液（1）的方法制得样品液（2），（3），（4）备用。临用前取上述样品液1mL分别加进上述内标液0.02mL，用乙酸乙酯定容至2mL容量瓶中，制得供试品溶液（1），（2），（3），（4）。 2。5空缺对照溶液的制备与测定精密称取黄连0.5g，按上述方法制成往肉桂的黄连单煎阴性对照液，与供试品溶液同时测定，说明黄连中的成分不干扰肉桂中桂皮醛的测定。 2。6供试品溶液稳定性的考察取样品，按拟订的含量测定方法制备供试品溶液，在室温下自然放置，间隔一定时间（0，l，4，8，12h）测定，RSD=l.4％，可见样品溶液（3）至少在12h内稳定性良好。 2。7回收率实验精密称取已知含量的肉桂粉末0.25g3份，分别加进4.262mg/mL的桂皮醛对照品溶液1mL，按上述供试品溶液（1）制备法制得所需溶液，按本文方法进行测定，测得结果为：均匀回收率为98.8％，RSD为1.7％，n=3。按同法还测定了加进量分别为2mL和0.5mL的高、低2个浓度的回收率，分别为96.72％和97.93％，RSD分别为1.9％和1.6％。 2。8样品测定各供试液分别按上述条件进行测定，测得桂皮醛与内标峰面积，代人公式：Ws=fxAs／Al×W1，求得不同比例配伍中的桂皮醛含量。 3讨论3。1黄连与肉桂配伍后，肉桂中桂皮醛的含量明显下降，这与文献中报道的黄连中生物碱的含量下降趋势是一致的，按肉桂单煎桂皮醛煎出量为100％计算，黄连一肉桂（O.25g：0.5g）的煎出量为72.1％，黄连-肉桂（0.5g：O.5g）的煎出量为61.5％。黄连-肉桂（2.5g：0.5g）的煎出量为35.4％，表明在不同的配伍比例中，黄连含量越高。肉桂中桂皮醛的含量降低越大，这可能是由于黄连中的生物碱与肉桂中的酚酸类成分配伍后产生沉淀的结果，且该沉淀可能会吸附部分桂皮醛，致使配伍后桂皮醛的含量降低。定性实验也表明，黄连单煎液的丁醇萃取液与肉桂单煎液的丁醇萃取液混合后有大量的沉淀天生，关于其沉淀的组成将见另文报道.3。2测定肉桂及复方制剂中桂皮醛的方法已有很多报道，如薄层扫描法，高效液相法，气相色谱法，导数光谱法等，但样品液制备均采用有机溶剂进行提取，本方法利用气相色谱法测定了水提液中桂皮醛的含量，方法简单，重现性好，为进一步研究复方制剂中的化学成分变化打下了良好的基础。