房水中外泌体检测方案(单细胞分析仪)
小儿眼病的病情准确诊断与监测一直是临床上的一大难题,往往需要通过临床症状来评判。因此,小儿眼病的诊断评估急需新的分子诊断技术的帮助。房水是眼球眼房中,介于角膜和晶状体之间的无色透明水样液体,主要作用为屈光、为眼内组织提供营养和氧气、排出其代谢产物和维持眼内压。使用前房穿刺术可以安全地取出房水,作为液体活检样本用于诊断和监测眼病。
研究表明,外泌体在视觉系统中可能有重要作用,如外泌体与青光眼和黄斑变性的病理生理相关。由于血-视网膜屏障存在,房水中的外泌体主要由眼内组织分泌,使得外泌体在眼病研究中更具有针对性。先前的研究中并未涉及房水外泌体的来源与分布,且由于技术手段的限制,至今尚未将房水外泌体与小儿眼病联系起来。
基于以上研究成果与客观需要,研究组获取了患有不同眼病,包含先天性白内障(CAT),先天性青光眼(GLC),小儿视网膜疾病(PRD)和视网膜母细胞瘤(Rb)的19个不同患者的房水样本,再将Rb患者根据治疗情况分为经过初步治疗(诊断+初步切除)(Rb_Tn)和经过主动治疗(二次切除+化疗)(Rb_Tx)两组,使用全自动外泌体荧光检测分析系统 ExoView的配套芯片,通过抗原抗体结合捕获了房水中的特异性外泌体,无需纯化,直接检测了房水中存在的不同亚群的外泌体的含量。