鸡蛋类专用柱农残兽残检测液质质分析法

FaVEx-NM-egg鸡蛋多农兽残全项筛查专用柱产品概述：FaVEx-NM-egg多种农兽残全项筛查专用柱，基于相似相容及离子交换等固相萃取净化原理，它不需要活化平衡，当样品萃取溶液一步通过此SPE柱时，杂质被保留在填料上，然后过0.22μm滤膜，取得目标物溶液，上机到液质质LC-MSMS分析。FaVEx-NM-egg多种农兽残全项筛查专用柱目前已经验证适用于鸡蛋基质，检测中低极性类兽药残留如磺胺类、抗原虫类、抗球虫类等，中高极性兽药残留如沙星类、大环抗生素类、氟虫腈等多种农药残留等。鸡蛋富含蛋白质和脂质，使用普通SPE柱做前处理净化时，有时会堵塞柱子，很难实现净化目标。由于母鸡食用的饲料中可能有农药残留超标，导致母鸡孕育的鸡蛋中也有农残超标，所以鸡蛋不仅需要测试多种兽药残留，同时也有农药残留超标的风险。一枚安全的鸡蛋，需要同时把控多种农兽药残留超标的风险。巨研科技开发FaVEx-NM-egg鸡蛋专用柱正要解决这两个难点问题，一是简化前处理净化步骤，有效除蛋白质除脂质等干扰；二是同时检测多种农药残留和兽药残留，依托先进的高灵敏度、高准确分析仪器，液相色谱串级质谱仪（LC-MS/MS）可以实现同时分析多种农兽药残留的目标。产品特点： 操作简单，无须活化平衡，节省溶剂、实验设备和人力； 样品溶液以每秒一滴的速度通过SPE柱，5分钟完成过柱净化； 搭配正压固相萃取装置，批量6只/12只过柱，效率更高； 搭配HPPE-48高通量真空振荡浓缩仪，批量48个做浓缩回溶，效率更高；样品提取与净化：鸡蛋基质 称取4.0g样品，加均质石、4.0g无水硫酸钠、剧烈震荡5min； 加10mL 乙腈溶液（1%乙酸)，剧烈振荡15min，离心（≥4000rpm）5min； 取4mL上清液加入FaVEx-NM-egg SPE柱中，以每秒1滴的速度流出，收集全部滤液；加入1mL的1%醋酸乙腈溶液冲提，合并滤液。 取1.25mL滤液，浓缩至近干，以甲醇/水（V/V=6:4）溶液定容至1.0mL； 过0.22μm滤膜后，上机LC-MS/MS分析。产品信息：品牌存货编码描述规格巨研FAVEX-NM-EGGFast Veterinary Drug Extraction Kit- Normal-EGG 50/PK50只/盒验证过的多种兽药残留清单：欢迎联络索取药剂清单和仪器分析方法！以GETech FaVEx-Hp快速萃取净化套组分析牛奶产品中高极性多重兽药残留量 应用批注 食品 绪论 作者 古宜加、华宏达巨研科技股份有限公司 高雄市左营区裕诚路392号 14楼 巨研科技公司致力推广多重动物用药一次检验分析·先前已研发成功FaVEx-Nm kit对于102项动物用药一次提取及净化·一个步骤过净化管进行高效能除干扰物·惟每类药项适用之提取溶剂有所差异·本方法针对较高极性33药项·同样进行一次提取及净化·均可成功达到一次分析之目标·相较普遍的固相萃取法·处理一批16个样品可在1小时内完成前处理·溶剂使用也仅10 mL/样品；结合FaVEx-Nm 102项及FaVEx-Ag 29项共可检测150项动物用药·对于动物用药一次检验分析其涵盖范围更完整。 以FaVEx-Hp分析牛鲜奶中高极性多重兽药，四环素类、β-内疏类及巨环类(表一)，这些药项在一般萃取及固相萃流程均有很大限制及步骤繁杂之缺点·本应用方法同时把三类药项一次同时提取净化·因操作简单只要一步净化·使得人员操作易上手·有机溶剂的使用减少。以Agilent 6470液相色谱-三重四极杆质谱联用仪分析·可以同时检测牛奶中四环素等33项兽药药剂项目·分别添加20ng/g及5ng/g·添加20ng/g的回收率除了Minocycline及 Cloxacillin低于50%外其余均高于50%，，添加5ng/g的回收率除了Minocycline，Josamycin 及Virginiamycin M1较低外其余回收率均50%以上(图二)·于LOQ部分·Cloxacillin定量极限0.005 ug/g·其他均可到0.001ug/g(表二)。 4°C， 4000 rpm离心5分钟 以高速震荡机震荡1分钟 取5mL上清液加入FaVEx-Hp萃取套组以每秒1滴流速加压净化收集 取2.5mL澄清液以40度，氮气吸干以20%乙腈水(1%甲酸)1mL回溶 以LC-MS/MS分析 以LC-MS/MS分析 移动相流速：0.4 mL/min。 层析管柱： ZORBAX RRHD Eclipse Plus C18 内径3.0×100mm 1.8-Micron 流动相溶液-A液：水+0.1%甲酸 流动相溶液-B液：甲醇+0.1%甲酸 流动相溶液：A液与B液以下列条件进行梯度分析。 分析仪器： 1290/6470液相色谱-三重四极杆质谱联用仪(Agilent) 时间(min) A(%) B(%) 0.0 98 2 4.0 70 30 6.0 65 35 6.0 50 50 8.0 40 60 12.0 1 99 15.0 10 90 15.1 99 1 post time： 2.0min 表一、兽药33项药剂之多重反应侦测模式参数 Compound Name PrecursorIon Production Ret Time(min) Fragmentor CollisionEnergy Cell Accelerator Voltage Polarity 4-Epichlortetracycline 479.1 443.9 6.75 114 17 7 Positive 479.1 462.1 6.75 114 9 7 Positive 4-Epioxytetracycline 461.1 201.1 5.70 119 41 7 Positive 461.1 426.1 5.70 119 13 7 Positive 4-Epitetracycline 445.1 410.1 5.26 104 13 7 Positive 445.1 427.1 5.26 104 5 7 Positive Amoxicillin 366.1 349.0 3.90 87 2 4 Positive 366.1 208.1 3.90 87 5 4 Positive 366.1 114.1 3.90 87 17 4 Positive Ampicillin 350.1 106.0 6.39 102 13 4 Positive 350.1 160.0 6.39 102 6 4 Positive 350.1 114.0 6.39 102 29 4 Positive Cefapirin 424.2 292.1 4.52 112 9 7 Positive 424.2 152.1 4.52 112 21 7 Positive Ceftiofur 524.0 241.0 7.96 110 13 7 Positive 524.0 95.0 7.96 110 45 7 Positive Cefuroxime 423.0 318.0 6.39 92 2 4 Negative 423.0 207.0 6.39 92 5 4 Negative Cephalexin 348.1 158.1 5.96 92 6 / Positive 348.1 106.1 5.96 92 29 7 Positive Chlortetracycline 479.1 443.9 7.27 114 17 7 Positive 479.1 462.1 7.27 114 9 7 Positive Clarithromycin 748.5 158.1 10.32 164 29 7 Positive 748.5 116.1 10.32 164 49 7 Positive Clindamycin 425.2 377.1 8.19 149 17 7 Positive 425.2 126.1 8.19 149 29 7 Positive Cloxacillin 436.1 277.1 10.41 186 13 7 Positive 436.1 160.1 10.41 186 13 7 Positive *为定量离子对·定性离子对可视基质情况选择适合之离子对 表一、兽药33项药剂之多重反应侦测模式参数(续) Compound Name Precursorion Production Ret Time(min) Fragmentor Collision energy Cell AcceleratorVoltage Polarity Demeclocycline 465.0 448.0 6.66 106 21 7 Positive 465.0 430.0 6.66 106 17 7 Positive Dicloxacillin 470.0 211.9 10.77 179 29 7 Positive 470.0 452.0 10.77 179 17 7 Positive Doxycycline 445.1 428.1 8.00 155 13 7 Positive 445.1 153.9 8.00 155 29 7 Positive Erythromycin 734.5 158.1 9.52 164 33 7 Positive 734.5 576.1 9.52 164 17 7 Positive Josamycin 828.5 109.1 10.25 206 49 7 Positive 828.5 174.1 10.25 206 37 / Positive Kitasamycin 772.6 109.1 9.54 206 45 7 Positive 772.6 174.1 9.54 206 33 7 Positive Lincomycin 407.2 126.1 5.22 149 29 7 Positive 407.2 359.1 5.22 149 17 7 Positive Mecillinam 326.2 167.1 6.64 144 21 / Positive 326.2 139.1 6.64 144 33 7 Positive Methacycline 443.0 426.0 7.71 121 13 7 Positive 443.0 381.0 7.71 121 25 7 Positive 443.0 201.0 7.71 121 33 7 Positive Minocycline 458.0 441.0 5.43 155 27 7 Positive 458.0 352.0 5.43 155 45 7 Positive Neospiramycin1 699.5 174.1 6.94 176 29 7 Positive 699.5 142.1 6.94 176 29 7 Positive *为定量离子对·定性离子对可视基质情况选择适合之离子对 表一、兽药33项药剂之多重反应侦测模式参数(续) Compound Name Precursorion Production Ret Time(min) Fragmentor CollisionEnergy Cell AcceleratorVoltage Polarity Oleandomycin 772.0 158.0 9.62 158 28 7 Positive 772.0 586.2 9.62 158 16 Positive Orbifloxacin 396.2 295.1 6.46 144 25 / Positive 396.2 267.0 6.46 144 41 7 Positive Oxacillin 402.1 160.1 10.08 100 11 7 Positive 402.1 243.1 10.08 100 8 7 Positive Oxytetracycline 461.1 426.1 6.06 119 13 7 Positive 461.1 443.1 6.06 119 5 7 Positive SpiramycinI 843.5 174.1 7.22 233 41 Positive 843.5 101.1 7.22 233 45 Positive Tetracycline 445.1 410.1 5.98 114 13 7 Positive 445.1 427.1 5.98 114 5 7 Positive Tilmicosin 869.6 174.1 7.84 285 49 / Positive 869.6 132.1 7.84 285 53 Positive Tylosin 916.5 174.1 9.48 223 45 / Positive 916.5 101.1 9.48 223 53 / Positive Virginiamycin M1 526.3 355.2 10.53 129 13 Positive 526.3 337.1 10.53 129 21 7 Positive *为定量离子对·定性离子对可视基质情况选择适合之离子对 品 浩诫ww丹ww回汗一 乙乙诫乙网乙一N0 表二、鲜牛奶中兽药33项药剂之线性平方及 LOQ Compound Name 中文名称 CF R2 LOQ，ng/g 4-Epichlortetracycline 差向金霉素 0.9971 0.001 4-Epioxytetracycline 差向土霉素 0.9986 0.001 4-Epitetracycline 差向四环素 0.9973 0.001 Amoxicillin 阿莫西林 0.9974 0.001 Ampicillin 氨苄青霉素 0.9986 0.001 Cefapirin 头孢匹林 0.9975 0.001 Ceftiofur 头孢噻呋 0.9924 0.001 Cefuroxime 呋肟头孢菌素 0.9928 0.001 Cephalexin 头孢氨苄 0.9967 0.001 Chlortetracycline 金霉素 0.9996 0.001 Clarithromycin 克拉霉素 0.998 0.001 Clindamycin 克林霉素 0.9986 0.001 Cloxacillin 氯唑西林 0.9922 0.005 Demeclocycline 脱甲金霉素 0.9938 0.001 Dicloxacillin 双氯青霉素 0.9966 0.001 Doxycycline 强力霉素 0.9981 0.001 Erythromycin 红霉素 0.9881 0.001 Josamycin 交沙霉素 0.9972 0.001 Kitasamycin 吉它霉素 0.9965 0.001 Lincomycin 林可霉素 0.9985 0.001 Mecillinam 甲亚胺青霉素 0.9968 0.001 Methacycline 甲烯土霉素 0.9964 0.001 Minocycline 二甲胺四环素 0.9989 0.001 NeospiramycinI 新螺旋霉素Ⅰ 0.9967 0.001 Oleandomycin 夹竹桃霉素 0.9973 0.001 Orbifloxacin 奥比沙星 0.9971 0.001 Oxacillin 苯唑青霉素 0.9966 0.001 Oxytetracycline 氧四环素 0.9982 0.001 SpiramycinI 螺旋霉素I 0.9964 0.001 Tetracycline 四环素 0.9953 0.001 Tilmicosin 替米考星 0.9977 0.001 Tylosin 泰乐菌素 0.9941 0.001 Virginiamycin M1 维吉尼霉素M1 0.9978 0.001 结论 1，以FaVEx-Hp分析牛鲜奶中高极性多重兽药，四环素类、β-内疏类及巨环类共33项。 2，添加20ng/g之回收率除了Minocycline及 Cloxacillin低于50%外其余均高于50%%。 3，定量极限部分· Cloxacillin定量极限0.005 ug/g·其他均可到0.001 ug/g。 4，此方法与FaVEx-Nm互补·巨环类在两种方法均可分析惟在Nm kit 回收不佳时在Hp kit则有很好回收率·例如Lincomycin在Hp kit即好回收率。 详细信息 有矣本公司产品与服务的其他信息· 请造访本公司网站：www.getech.com.tw 上海分公司：绿巨研科贸易(上海)有限公司 联系电话：021-34612930/13248260650 邮箱： 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