辣椒粉中苏丹红检测方案(旋涡混合器)

食品添加剂/污染物l3_1WL476www.biocomma.cn 辣椒粉中苏丹红的测定(CLB苏丹红专用净化柱) 一、样品提取 准确称取辣椒粉样品1.0g(精确至0.01g)， 加入10mL乙腈，涡旋混匀，超声提取10 min， 8000 r/min 离心3 min， 取上清液于另一干净离心管中，重复上述操作一次，合并两次提取液，取其中10 mL 50℃下氮吹至5mL以下，加入等体积0.5 mol/L 氢氧化钠溶液，再加入适量纯净水(约1~2毫升)，涡旋混匀，待净化。 二、样品净化 配制平衡液：取—-定量乙腈，加入等体积2%氢氧化钠水溶液，再加入适量超纯水，直至混匀成均相体系，不分层，此为平衡液。 净化小柱： CNB 苏丹红专用净化柱 活化和平衡：乙腈6mL， 平衡液5mL 依次过柱 上样：将样品提取后的待净化液过柱，并用平衡液5mL分两次冲洗离心管，一并过柱 淋洗：先加超纯水6mL过柱淋洗，再加入乙腈淋洗，直至淋洗流出液呈无色，最后加入乙酸乙酯5mL淋洗 洗脱：5mL 5%甲酸乙酸乙酯溶液洗脱 收集全部洗脱液，50℃下氮吹至干，用1mL乙腈复溶，过PTFE 膜， 待上机。 三、仪器条件 仪器： UltiMate 3000 (Thermofisher Scientific)，配DAD 检测器 色谱柱： Agilent ZORBAX SB-C18(4.6 mm×250mm， 5 Hm) 流动相：乙腈/0.2%磷酸水=95/5(V/V) 流速：1mL/min 柱温：30℃ 进样量：20L 检测波长：478nm、520nm 四、实验结果 表1辣椒粉中苏丹红加标回收实验结果 目标物 加标浓度(mg/kg) 平均回收率(%) RSD (%， n=3) 苏丹红I 0.2 83.36 1.80 0.5 91.86 1.16 1.0 94.04 3.39 苏丹红Ⅱ 0.2 100.3 2.33 0.5 100.8 2.39 1.0 98.91 2.86 苏丹红Ⅲ 0.2 91.10 4.78 0.5 99.73 1.64 1.0 96.23 2.69 苏丹红Ⅳ 0.2 92.06 1.97 0.5 97.13 1.07 1.0 92.76 2.11 图1浓度为500 Hg/L的苏丹红标准品液相色谱图(478 nm) 图2辣椒粉中苏丹红液相色谱图 加标浓度为1 mg/kg 的辣椒粉使用分子印迹柱(上图)及CLB 苏丹红专用净化柱(下图)前处理后上机对比图，基质效应减弱，目标峰可准确积分。 表2苏丹红校准曲线参数 目标物 曲线方程 R2 苏丹红I y=0.0013X-0.0033 0.99987 苏丹红Ⅱ v=0.0013X-0.0011 0.99991 苏丹红Ⅲ v=0.0021X-0.0130 0.99987 苏丹红Ⅳ y=0.0019X-0.0150 0.99984 备注：其它基质的样品可以参照此方案的前处理方法做细微调整。 订购信息 货号 描述 包装 COCLB66 CLB 苏丹红专用净化柱，6mL×5支 30支/盒 SDC-3000 多管涡旋混匀仪 1台/箱 SF130-22-PTFE PTFE 针式过滤器，直径13 mm， 100个/盒 孔径0.22 Hm， 有机系 SC2-1 2mL蓝色聚丙烯盖， 100个/盒 白色 PTFE/红色硅胶垫， 9-425 V2-AL 2mL螺纹棕色样品瓶， 100个/盒 带书写处11.6*32 mm， 9-425 一、样品提取 准确称取辣椒粉样品 1.0 g（精确至 0.01 g），加入 10 mL 乙腈，涡旋混匀，超声提取 10 min，8000 r/min 离心 3 min，取上清液于另一干净离心管中，重复上述操作一次， 合并两次提取液，取其中 10 mL 50℃下氮吹至 5 mL 以下， 加入等体积 0.5 mol/L 氢氧化钠溶液，再加入适量纯净水 （约 1 ~ 2 毫升），涡旋混匀，待净化。 二、样品净化 配制平衡液：取一定量乙腈，加入等体积 2% 氢氧化钠水 溶液，再加入适量超纯水，直至混匀成均相体系，不分层， 此为平衡液。 净化小柱：CNB 苏丹红专用净化柱 活化和平衡：乙腈 6 mL，平衡液 5 mL 依次过柱 上样：将样品提取后的待净化液过柱，并用平衡液 5 mL 分 两次冲洗离心管，一并过柱 淋洗：先加超纯水 6 mL 过柱淋洗，再加入乙腈淋洗，直至 淋洗流出液呈无色，最后加入乙酸乙酯 5 mL 淋洗 洗脱：5 mL 5% 甲酸乙酸乙酯溶液洗脱 收集全部洗脱液，50℃下氮吹至干，用 1 mL 乙腈复溶，过 PTFE 膜，待上机。 三、仪器条件 仪器：UltiMate 3000（Thermofisher Scientific），配 DAD 检测器 色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C18（4.6 mm×250mm，5 µm） 流动相：乙腈 /0.2% 磷酸水 =95/5（V/V） 流速：1 mL/min 柱温：30℃ 进样量：20 µL 检测波长：478 nm、520nm 四、实验结果 表 1 辣椒粉中苏丹红加标回收实验结果加标浓度为 1 mg/kg 的辣椒粉使用分子印迹柱（上图）及 CLB 苏丹红专用净化柱（下图）前处理后上机对比图，基 质效应减弱，目标峰可准确积分。