陈皮中33种禁用农残检测方案(旋涡混合器)

陈皮中33种禁用农残的检测方案(CopureHLB) 陈皮是芸香科植物橘的干燥成熟果皮，含丰富的挥发油、橙皮甙、柑橘素等功能性物质，具有良好的理气健脾，燥湿化痰，降逆止呕，增进食欲等功效，常见的健胃消食片等药物里就含有陈皮这一味中药，除去制药外，陈皮还可以泡水喝，可以煮粥、煲汤，适用面非常广。 本应用参考《2020中国药典》固相萃取二法，采用HLB对陈皮皮33中禁用农药进行了方法开发。通过该 HLB 的净化处理，可大量去除陈皮中的色素、挥发油等杂质成分，获得满意的实验结果。 一、样品提取 准确称取粉碎均匀的陈皮样品 5.00 g， 加氯化钠1.0 g， 立即摇散，加入乙腈 50 mL， 2500r/min 涡旋 10 min， 6000 r/min 离心 5 min，分取上清液，残渣重复提取一次，合并两次上清液，40℃减压浓缩至约5mL，取出冷却后用乙腈稀释至10mL，待净化。 二、样品净化 (Copure°HLB，200mg/6mL) 量取上述待净化液3mL，过柱，弃去前面两滴，收集剩余过柱液，从中分取1mL加入0.3 mL 0.1 ug/mL磷酸三苯酯(内标)，混匀后，过 PTFE 膜上 GC/MS-MS；；另分取1mL加入 0.3 mL水，混匀后，过 PTFE 膜上 LC/MS-MS。 三、基质标准曲线溶液的制备 取空白基质样品，同供试品溶液的制备方法处理制成空白基质溶液，分别精密量取空白基质溶液1.0mL(6份)，置氮吹仪上，40℃水浴浓缩至 0.5 mL以下，加入适量标准溶液，并加乙腈稀释至1mL，涡旋混匀，制成浓度分别为 10 ug/L、20 ug/L、50 ug/L、100 pg/L、150ug/L、200 ug/L标准曲线。其中，用于 GC-MS/MS分析的标曲，在定容到1mL后，分别向每个浓度点加入0.3 mL 0.1 ug/mL 磷酸三苯酯内标溶液；用于LC-MS/MS分析的标曲，在定容到1mL后，分别向每个浓度点加入0.3 mL 水，漩涡混匀后，过 PTFE 膜上机。 四、仪器条件 (1)气质部分 仪器：Agilent 8890-7000D 气质联用仪 色谱柱： HP-5MS UI (30 m×250 umx0.25 pm) 进样模式：恒流模式， 1mL/min，不分流进样 进样口温度：250℃ 载气：高纯He 升温程序：见表 进样量：1pL 溶剂延迟：6min 电离方式：电子轰击源(EI) 电离能量：70eV 离子源温度：250℃ 接口温度：250℃ 监测方式：多反应监测(MRM) 监测离子对信息：参考《2020中国药典》 表1气质升温程序 速率(℃/min) 值(℃) 保持时间(min) 初始值 / 60 0 梯度1 30 120 0.5 梯度2 15 200 2 梯度3 5 270 8 (2)液质部分 仪器： UPLC-MS/MS(Thermo Fisher TSQ Endura) 色谱柱： Commasil中药农残专用柱(2.1mm×100 mm， 3 um) 流动相：A：0.1%甲酸水 B：甲醇 流速：0.3mL/min 柱温：30℃ 进样量：5pL 洗脱程序：见表2 离子源： HESI 电喷雾电压：3500V 革气压力：30 arb 辅气压力：2 arb 离子传输管：380℃ 辅气温度：350℃ 监测离子对信息：参考《2020中国药典》 表2液质洗脱程序 时间/min A/% B/% 0.00 98 2 0.25 98 2 2.00 95 5 8.00 70 30 16.50 30 70 17.50 30 70 19.00 2 98 21.00 2 98 21.50 98 2 22.00 98 2 五、实验结果 表3 33种禁用农残加标回收实验结果 3-羟基克百威 - 一 75.2 4.82 90.5 6.08 涕灭威 - - - - 90.3 5.47 涕灭威砜 96.7 6.01 90.6 8.41 89.8 1.24 涕灭威亚砜 - - 86.4 2.66 78.6 3.32 灭线磷 91.6 3.37 96.8 2.03 101 1.69 氯唑磷 99.1 6.46 89.6 1.46 90.7 1.43 水胺硫磷 73.8 6.82 91.4 2.56 100 3.65 α-硫丹 97.8 3.34 87.2 2.38 81.8 2.57 β-硫丹 92.6 3.26 95.4 1.39 96.5 2.13 硫丹硫酸酯 93.6 2.06 102 1.66 107 3.31 氟虫腈 102 2.55 106 1.71 108 1.98 氟甲腈 90.4 2.92 101 2.06 104 3.10 氟虫腈砜 83.7 3.86 102 3.03 101 3.28 氟虫腈亚砜 90.0 4.66 94.5 3.84 99.8 2.02 O，P'-三氯杀螨醇 91.2 7.20 79.8 4.25 78.6 3.38 P，P'-三氯杀螨醇 79.6 6.36 75.6 3.39 71.5 3.75 硫环磷 81.4 2.46 91.9 3.86 93.1 4.00 甲基硫环磷 82.7 6.34 91.7 4.38 103 3.52 图1添加水平为40.0 pg/kg 气质总离子流图 图2添加水平为40.0 pg/kg 液质总离子流图 六、订购信息 货号 描述 包装 COHLB6200-M CopureR HLB 净化柱， 200mg/6mL 30支/盒 SDC-3000-D biocommaQ 多管涡旋混匀仪 1台/箱 BN24 智能水浴氮吹仪 1台/箱 SF130-22-PTFE PTFE 针式过滤器，直径13 mm， 孔径0.22 um，有机系 100个/盒 SC2-1 2 mL 蓝色聚丙烯盖，白色PTFE/红色硅胶垫，9-425 100个/盒 V2-AL 2mL螺纹棕色样品瓶，带书写处11.6*32 mm， 9-425 100个/盒 1样品提取准确称取粉碎均匀的陈皮样品5.00 g，加氯化钠1.0 g，立即摇散，加入乙腈50 mL，2500 r/min涡旋10 min，6000 r/min离心 5 min，分取上清液，残渣重复提取一次，合并两次上清液，40℃减压浓缩至约5 mL，取出冷却后用乙腈稀释至10 mL，待净化。2样品净化量取上述待净化液3 mL，过柱，弃去前面两滴，收集剩余过柱液，从中分取1 mL加入0.3 mL 0.1 μg/mL磷酸三苯酯（内标），混匀后，过PTFE膜上GC/MS-MS；另分取1 mL加入0.3 mL水，混匀后，过PTFE膜上LC/MS-MS。（Copure® HLB，200 mg/6mL）3基质标准曲线溶液的制备取空白基质样品，同供试品溶液的制备方法处理制成空白基质溶液，分别精密量取空白基质溶液1.0 mL（6份），置氮吹仪上，40 ℃水浴浓缩至0.5 mL以下，加入适量标准溶液，并加乙腈稀释至l mL, 涡旋混匀，制成浓度分别为10 μg/L、20 μg/L、50 μg/L、100 μg/L、150μg/L 、200 μg/L标准曲线。其中，用于GC-MS/MS分析的标曲，在定容到1mL后，分别向每个浓度点加入0.3 mL 0.1 μg/mL磷酸三苯酯内标溶液；用于LC-MS/MS分析的标曲, 在定容到1mL后，分别向每个浓度点加入0.3 mL水，漩涡混匀后，过PTFE膜上机。4仪器条件【气质部分】仪器：Agilent 8890-7000D气质联用仪色谱柱：HP-5MS UI30 m×250 μm×0.25 μm进样模式：恒流模式，1 mL/min，不分流进样进样口温度：250℃载气：高纯He升温程序：见表1进样量：1 μL溶剂延迟：6 min电离方式：电子轰击源（EI）电离能量：70 eV离子源温度：250℃接口温度：250℃监测方式：多反应监测（MRM）监测离子对信息：参考《2020中国药典》表1 气质升温程序【液质部分】仪器：UPLC-MS/MSThermo Fisher TSQ Endura色谱柱：Commasil® 中药农残专用柱2.1 mm×100 mm，3 μm流动相：A：0.1%甲酸水   B：甲醇流速：0.3 mL/min柱温：30 ℃进样量：5 μL洗脱程序：见表2离子源：HESI电喷雾电压：3500 V鞘气压力：30 arb辅气压力：2 arb      离子传输管：380 ℃   辅气温度：350 ℃监测离子对信息：参考《2020中国药典》表2 液质洗脱程度5实验结果表3  33种禁用农残加标回收实验结果图1 添加水平为40.0 μg/kg气质总离子流图图2 添加水平为40.0 μg/kg液质总离子流图6订购信息