植物样品中还原糖检测方案(紫外分光光度计)

TEL-400-616-4686 砷钼酸比色法测植物样品还原糖含量 原理还原糖是具有羰基(>C=O) 的糖，，1能将其它物质还原而其本身被氧化。 (1)还原糖在碱性条件及有酒石酸钾钠存在下加热，可以定量地还原二价铜离子为一价铜离子，产生砖红色的氧化亚铜沉淀，其本身被氧化。具体反应如下： (2)氧化亚铜在酸性条件下，可将钼酸铵还原，还原型的钼酸铵再与砷酸氢二钠起作用，生成一种蓝色复合砷钼蓝，其颜色深浅在一定范围内与还原糖的含量(即被还原的Cu2O量)成正比，用标准葡萄糖与砷钼酸作用，比色后做标准，就可测得样品还原糖含量。 材料与仪器 美析 UV1500C分光光度计 植物材料 铜试剂砷钼酸试剂标准葡萄糖原液具塞刻度试管水浴锅刻度吸管容量瓶漏斗研钵 实验步骤 1.标准曲线的制作： 在一系列刻度试管中，分别加入200ug/mL 标准葡萄糖0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5及0.6 mL，再顺序加入蒸馏水2、1.9、1.8、1.7、1.6、1.5及1.4mL，配成浓度分别为0、10、20、30、40、50及60pg/mL 的系列葡萄糖溶液。每试管加入铜试剂2mL，混匀后沸水浴中加热10min，立即冷却，再加入2mL砷钼酸试剂，振荡两分钟后稀释到20mL，用分光光度计在620nm 波长下比色，测其光密度 OD620nm(做一式两份)。以糖浓度微克数为横坐标，光密度 OD620nm为纵坐标，绘制标准曲线。 2.植物样品中还原糖的提取： 将样品洗净，，吸干其表面水分，切碎混匀，称取1g放入研钵中，加入约0.5g石英砂，磨成匀浆，加水将样品由玻璃漏斗冲入100mL 容量瓶中，加水达70-80mL， 摇匀后置于80℃恒温水浴上浸提 0.5h。 待上述样品冷却后，沉淀蛋白质，加入5%硫酸锌5mL， 再慢慢滴入0.3mol/L Ba(OH)2 5mL，以沉淀蛋白质。振荡后静置，至上层出现清液后再加一滴 Ba(OH)2，直至无白色沉淀时，向容量瓶加水至刻度。 3.还原糖含量的测定： 过滤上述已定容的样品液，取5mL滤液， 再定容到100mL (此步视样品的含糖量而定)。取已稀释的溶液2mL， 与标准葡萄糖显色法相同：加铜试剂2mL， 煮沸10min， 加砷钼酸试剂2mL， 振荡2mL， 定容到15ml， 620nm 波长下比色，记下光密度 OD620nm (至少重复两次)。 仪器参数 PROFESSIONAL SPECTRUM INSTRUMENT MANUFACTURER UV-1500UV-1500PC 紫外可见分光光度计 采用单片微机控制，128*64位液晶显示 宽大的液晶显示器可显示多组数据 自动调0、调100%功能 波长自动调节 光源自动切换，滤色片自动切换 宽大样品池(5mm~100mm) 具有最多十点标样建标准曲线测量功能 可通过直接输入K、B因子建立标准曲线进行定量测量 可直接输入标样和对应浓度值建立标准曲线进行定量测量 可断电保存测量设置的标准曲线参数 配备通用并行打印接口，可打印标题栏、测量数据、曲线参数、曲线标准样品点和曲线 配USB接口 可通过PC软件控制实现光谱扫描等更精确和灵活的测量要求(UV-1500选配， UV-1500PC标配) 波长范围 190~1100nm 波长调节 自动调节 光谱带宽 2nm 光度范围 -0.3~3A 波长重现性 s0.2nm 检测器 进口硅光二极管 透射比准确度±0.3%T 光源 进口氛灯，进口钨灯 透射比重现性0.15%T 电源 AC 220V/50Hz或110V/60Hz 杂散光 s0.05%t(220nm NaI， 340nm NaNo2) 功率 120W 稳定性 0.001A/h ( 500nm预热后) 仪器尺寸 480×350×220mm 测光方式 透过率、吸光度、浓度、能量 主机净重 15Kg 1cm石英比色皿2只 主机1台0电源线1根 使用说明书1本 1cm玻璃比色皿4只 防尘罩1只软件套装(UV-1500选配，UV-1500PC标配) 上海美仪器有限公司 上海美析仪器有限公司 关于我们 上海美析仪器公司简介 上海美析仪器有限公司(以下简称美析)，是一家具有自主知识产权的高新技术企业，美析的创业理念“科技——因你改变”，并以此为企业宗旨，不断探究、果敢创新。特别是在分析测试仪器领域，，不断开发出先进的产品，使美析成为优质仪器资源的供应者。 美析主营光谱类仪器可见分光光度计、紫外可见分光光度计、原子吸收光谱仪、超微量分光光度计、原子荧光光度计、ICP电感耦合等离子体发射光谱仪、ICP电感耦合等离子体质谱仪，目前，我们的产品已广泛应用于有机化学、无机化学、生物化学、医药、环保、冶金、石油、农业等领域。同时美析利用在产品机械结构、光学设计、电气应用和软件开发方面积累的丰富经验，结合市场的最新实际需求，近期将陆续推出出批全新的分析类仪器。 美析的总部及生产基地设在上海，营销中心设在北京，并在江苏、上海、山东三地建有研发基地。为充分利用各地的智力资源，美析与国内外的部分科研单位也进行了深层次的科研合作，不断将科研成果转化为生产力。为更好的服务于广大客户，美析仪器国内设有12家办事机构，度身定制符合您需求的应用解决方案，提高产品的附加值。在不断服务国内用户的同时，美析也与20多个国家的分销机构建立了深度的战略合作关系。 上海美析仪器有限公司 (美析仪器不仅仅只是一家高新技术认证企业，更通过了 CE 认证、FCC认证、RoHS认证以及国内多项资质审查认证，并有着多项自行研发的光光类专利版权等等) 了解更多内容请关注我公司微信公众号：美析仪器 上海美析仪器有限公司 EL：http：//www.macylab.com 还原糖是具有羰基（>C=O）的糖，能将其它物质还原而其本身被氧化。（1） 还原糖在碱性条件及有酒石酸钾钠存在下加热，可以定量地还原二价铜离子为一价铜离子，产生砖红色的氧化亚铜沉淀，其本身被氧化。具体反应如下：（2）氧化亚铜在酸性条件下，可将钼酸铵还原，还原型的钼酸铵再与砷酸氢二钠起作用，生成一种蓝色复合砷钼蓝，其颜色深浅在一定范围内与还原糖的含量（即被还原的Cu2O 量）成正比，用标准葡萄糖与砷钼酸作用，比色后做标准，就可测得样品还原糖含量。