猪肉中玉米赤霉烯酮检测方案(旋涡混合器)

真菌毒素 猪肉中玉米赤霉烯酮检测的固相萃取方法 (Copure@ HLB) 《GB 5009.209-2016食品中玉米赤霉烯酮的测定》 一、样品提取 准确称取均质后的猪肉者样5.00g试样(精确至0.01 g)于50 mL离心管中加入10 mL 0.05 M乙酸钠缓冲液和25β-葡萄糖/硫酸脂复合酶，混匀，于37℃水浴中放置12 h。水解后加入10 mL乙腈，并加入200匹1M的NaOH溶液，振荡30min， 4000 r/min 离心3 min， 移取上清液10 mL， 用30mL pH=7.4 的 PBS 溶液稀释，混匀，用滤纸过滤，收集于50mL的离心管中备用。 二、SPE 柱净化 (Copure@ HLB， 150 mg/6mL) 活化：净化前用5mL甲醇活化，5mL的水平衡。 上样和洗脱：取10mL进行上样，将提取液以2 mL/min 的速度过柱，弃去滤液，依次用5mL水，5 mL甲醇淋洗，弃去淋洗液，将小柱抽干，再用10 mL甲醇洗脱并收集洗脱液。重新溶解：40℃缓慢氮吹至近干，加1mL乙腈溶解。涡旋混合1 min， 过0.22 Hm有机滤膜，待上机测试。 三、仪器条件 仪器： Waters Alliance 2695 色谱柱： InerSustain@-C18 (4.6 mm×250 mm， 5 Hm) 检测器： Waters 2475 荧光检测器 检测波长：激发波长：274nm 发射波长：440 nm 流动相：A：乙腈B：水C：甲醇 洗脱方式：等度洗脱，A： B： C=46：46： 8 流速：1mL/min 进样体积：20L 四、实验结果 表1 0.24 mg/kg猪肉基质中玉米赤霉烯酮的添加回收结果 目标物 回收率% 平均回收率% RSD% 1 2 3 玉米赤霉烯酮 74.3 77.3 76.4 76.0 2.0 图1添加水平为 0.24 mg/kg 猪肉基质中玉米赤霉烯酮的添加回收结果 订购信息 货号 描述 包装 COHLB6150 Copure@ HLB固相萃取柱， 150 mg/6 mL 30支/盒 SF130-22-NL 尼龙/中13 mm/0.22 Hm/有机系 100个/盒 MF047-45-MCE MCE/D47 mm/0.45 Pm/水系 200片/盒 MF047-45-PTFE PTFE/D47 mm/0.45 Hm/有机系 200片/盒 V2-AL 2mL 棕色短螺纹广口样品瓶，带书写处 100个/盒 SC2-5 2mL 蓝色聚丙烯盖，预开口，9-425 100个/盒 SPEMF12G 12位固相萃取负压装置，玻璃缸体 1个/盒 粮油中呕吐毒素检测的固相萃取方法 (Copure HLB) 本方法适用于粮油中呕吐毒素残留的测定 一、样品提取 1.珍珠米：准确称取粉碎好珍珠米2.0 g置于50mL离心管中，加入20mL水，，于振荡器振器提取20 min， 4000 r/min 离心5 min，取上层液10 mL 备用。 2.食用油：准确称取金龙鱼调和油2.0 g置于50mL离心管中。加入20 mL水， 再加入5mL正己烷，于振荡器提取 20 min，4000 r/min 离心5 min， 弃去上层正己烷，取10mL水备用。 二、SPE柱净化(Copure HLB， 60 mg/3 mL) 活化： HLB使用前用3mL甲醇，3mL水活化。 上样和洗脱：取10mL备用液过柱，弃去流出液；加5mL水淋洗小柱，弃去流出液，抽干小柱用4mL甲醇洗脱，收集洗脱液(整个上样、洗脱过程控制流速在1 mL/min 内) 。上机测试：洗脱液于50℃下氮气吹干，用1mL 10%甲醇水溶液定容，经0.22 Hm滤膜过滤，供上机测试。 三、仪器条件 设备： Waters Alliance 2695 色谱柱： InertSustain-C18 (4.6 mm×250 mm， 5 Hm)检测器： Waters 2996 DAD 检测器 检测波长：218 nm等度洗脱：A：甲醇 B：水洗脱方式：等度洗脱， A： B=10： 90 流速：1.0 mL/min 进样体积：20匹 四、实验结果 表11(0.4 mg/kg 粮油基质中呕吐毒素的添加回收结果 图1添加水平为0.4 mg/kg 粮油基质中呕吐毒素检测的液相色谱图 订购信息 货号 描述 包装 COHLB360 Copure@ HLB 固相萃取柱， 60 mg/3 mL 50支/盒 SF130-22-PTFE PTFE/中13 mm/0.22 Pm/有机系 100个/盒 MF047-45-MCE MCE/D47 mm/0.45 Hm/水系 200片/盒 MF047-45-PTFE PTFE/中47 mm/0.45 Hm/有机系 200片/盒 V2-AL 2mL棕色短螺纹广口样品瓶，带书写处 100个/盒 SC2-5 2 mL 蓝色聚丙烯盖，预开口， 9-425 100个/盒 SPEMF12G 12位固相萃取负压装置，玻璃缸体 1个/盒 一、样品提取 准确称取均质后的猪肉试样 5.00 g 试样（精确至 0.01 g）于 50 mL 离心管中加入 10 mL 0.05 M 乙酸钠缓冲液和 25 µL β- 葡萄糖 / 硫酸脂复合酶，混匀，于 37℃水浴中放置 12 h。水 解后加入 10 mL 乙腈，并加入 200 µL 1 M 的 NaOH 溶液，振 荡 30 min，4000 r/min 离心 3 min，移取上清液 10 mL，用 30  mL pH=7.4 的 PBS 溶液稀释，混匀，用滤纸过滤，收集于 50  mL 的离心管中备用。 二、SPE 柱净化（Copure® HLB，150 mg/6 mL） 活化：净化前用 5 mL 甲醇活化，5 mL 的水平衡。 上样和洗脱：取 10 mL 进行上样，将提取液以 2 mL/min 的 速度过柱，弃去滤液，依次用 5 mL 水，5 mL 甲醇淋洗，弃 去淋洗液，将小柱抽干，再用 10 mL 甲醇洗脱并收集洗脱液。 重新溶解：40℃缓慢氮吹至近干，加 1 mL 乙腈溶解。涡旋混 合 1 min，过 0.22 µm 有机滤膜，待上机测试。 三、仪器条件 仪器：Waters Alliance 2695 色谱柱：InerSustain®-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 µm) 检测器：Waters 2475 荧光检测器 检测波长：激发波长：274 nm 发射波长：440 nm 流动相：A：乙腈 B：水 C：甲醇 洗脱方式：等度洗脱，A：B：C=46：46：8 流速：1 mL/min 进样体积：20 µL 四、实验结果 表 1 0.24 mg/kg 猪肉基质中玉米赤霉烯酮的添加回收结果