植物油中黄曲霉毒素 B1检测方案(旋涡混合器)

真菌毒素 植物油中黄曲霉毒素B1检测的免疫亲和柱法 (Copure@黄曲霉毒素B1免疫亲和柱) 《GB 5009.22-2016食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定》 一、样品提取 流动相：A：乙腈 准确称取植物油试样5.0g试样(精羊至0.01 g) 于50mL离心管中，加入20 mL 84%乙腈水溶液，涡旋混合1min，超声提取 20 min， 在5000 r/min 离心10 min， 提取上清液4mL于另一个离心管中，加入21 mL水，混匀待净化。 B：水 洗脱方式：梯度洗脱 表1 流动相梯度洗脱程序 二、免疫亲和柱净化(Copure°黄曲霉毒素B1免疫亲和柱，3mL) 时间/min A(%) B(%) 24.0 76.0 6.0 35.0 65.0 8.0 46.0 54.0 15.0 24.0 76.0 上样：将20 mL羊样器连接于免疫亲和柱上端，取待净化液样品液以1-2滴/秒的速度通过免疫亲和柱，弃掉流出的液体。淋洗和洗脱：用20mL水淋洗柱子，分两次淋洗，弃掉流出的液体；抽干小柱；加入2mL甲醇缓慢洗脱亲和柱，流速约为2-3滴/秒；50℃下氮吹至近干，待衍生。 流速：1mL/min 进样体积：10儿 五、实验结果 表21.0 ug/kg 植物油中黄曲霉毒素B1的添加回收结果 三、衍生化反应 (1)加入100三三氟乙酸和200匹正己烷于待衍生样品中，于40℃水浴浴光衍生15 min。 目标物 回收率(%) 平均回收率(%) RSD (%) 1 2 3 黄曲霉毒素B1 91.0 90.4 97.2 92.9 4.1 (2)重新溶解：50℃下氮吹至近干，加入1mL 15%乙腈水溶液溶解，0.22 Hm滤膜过滤，供HPLC分析。 四、仪器条件 仪器： Waters Alliance 2695 色谱柱： InerSustain@-C18 (4.6 mm×250 mm， 5 Hm) 检测器： Waters 2475 荧光检测器 检测波长：激发波长：360 nm 分钟 发射波长：440 nm 图1添加水平为1.0 ug/kg 植物油中黄曲霉毒素B1测色谱图 订购信息 货号 描述 包装 COAFMB103 Copure@ 黄曲霉毒素B1免疫亲和柱，3mL 20支/盒 SF130-22-PTFE PTFE/中13 mm/0.22 Hm/有机系 100个/盒 MF047-45-MCE MCE/D47 mm/0.45 Hm/水系 200片/盒 MF047-45-PTFE PTFE/D47 mm/0.45 Hm/有机系 200片/盒 V2-AL 2mL棕色短螺纹广口样品瓶，带书写处 100个/盒 SC2-5 2 mL 蓝色聚丙烯盖，预开口， 9-425 100个/盒 SPEMF12G 12位固相萃取负压装置，玻璃缸体 1个/盒 CT020-SL-2 20 mL上样器 50支/包