牛奶中氟苯尼考检测方案(离心机)

兽残篇www.biocomma.cn固相萃取产品应用手册(6版) indd 522021/1/2715：04：46 牛奶中氟苯尼考检测的固相萃取方法 (Copure@ HLB) 本方法适用于牛奶中氟苯尼考的测定 一、样品提取 洗脱方式：等度洗脱， A： B=83： 17 准确称取牛奶2.00g(精确到0.01g)，加入乙酸乙酯15mL，高速均质1 min， 加入5g无水硫酸钠，涡旋振荡1min， 摇床振荡10 min。 4000 r/min 转速离心5 min。将上清液转移至梨形瓶中，于45℃旋蒸至近干，用6mL水溶解残渣，2×5 mL次正己烷除脂，弃去正己烷层，取3mL水层待净化。 流速：1.0 mL/min 进样体积：20儿 四、实验结果 表2添加水平为5.0 mg/kg 牛奶中氟苯尼考的添加回收结果 二、SPE柱净化 (Copure°HLB， 60 mg/3 mL) 名称 回收率(%) 平均回收率(%) RSD(%) 1 2 3 氟苯尼考 112.3 109.2 111.8 111.1 1.5 活化： HLB固相萃取柱使用前依次使用5mL甲醇和5mL水活化。 上样和洗脱：将待净化液加入已活化好的固相萃取柱中，以2mL/min 的流速过柱，弃去滤液，用5mL水淋洗固相萃取柱，弃去淋洗液，抽干5 min。用5 mL 5%氨化甲醇洗脱固相萃取柱，收集洗脱液。 重新溶解：洗脱液于45℃氮吹吹干，用1mL甲醇定容，0.22Hm微孔滤膜过滤，供HPLC上机测试。 三、仪器条件 设备： Waters Alliance 2695 色谱柱： XB-C18(4.6mm×250 mm， 5 Hm) 检测器： Waters 2487 紫外检测器 流动相：A：水 B：乙清 订购信息 一、样品提取 准确称取牛奶 2.00 g（精确到 0.01 g），加入乙酸乙酯 15 mL，高速均质 1 min，加入 5 g 无水硫酸钠，涡旋振荡 1  min，摇床振荡 10 min。4000 r/min 转速离心 5 min。将上清 液转移至梨形瓶中，于 45℃旋蒸至近干，用 6 mL 水溶解残渣， 2×5 mL 次正己烷除脂，弃去正己烷层，取 3 mL 水层待净化。 二、SPE 柱净化（Copure® HLB，60 mg/3 mL） 活化：HLB 固相萃取柱使用前依次使用 5 mL 甲醇和 5 mL 水活化。 上样和洗脱：将待净化液加入已活化好的固相萃取柱中，以 2 mL/min 的流速过柱，弃去滤液，用 5 mL 水淋洗固相萃取柱， 弃去淋洗液，抽干 5 min。用 5 mL 5%氨化甲醇洗脱固相萃取柱， 收集洗脱液。重新溶解：洗脱液于 45℃氮吹吹干，用 1 mL 甲醇定容，0.22  µm 微孔滤膜过滤，供 HPLC 上机测试。 三、仪器条件 设备：Waters Alliance 2695 色谱柱：XB-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 µm) 检测器：Waters 2487 紫外检测器 检测波长：224 nm  流动相：A：水   B：乙腈 洗脱方式：等度洗脱，A: B=83: 17 流速：1.0 mL/min  进样体积：20 µL四、实验结果 表 2 添加水平为 5.0 mg/kg 牛奶中氟苯尼考的添加回收结果