水产品中氟苯尼考检测方案(样品前处理)

兽残篇49www.biocomma.cn4固相萃取产品应用手册(6版) indd 492021/1/2715：04：45 牛奶中氯霉素检测的固相萃取方法 (CopureC18) 《GB/T22338-2008动物源食品中氯霉素类药物残留量测定》 一、样品提取 准确角取牛奶5.00g(精确到0.01 g)，加入乙酸乙酯15mL，涡旋振荡1 min，摇床振荡10 min； 3000 r/min 转速离心10 min。将上清液转移至试管中，于45℃氮吹吹干，用5mL乙腈/水溶液(5：95， v/v)溶解，待净化。 二、SPE柱净化 (Copure C18， 500mg/6mL) 活化：C18固相萃取柱使用前依次使用5mL甲醇和5mL水活化。 上样和洗脱：将待净化液加入已活化好的固相萃取柱中，以1mL/min的流速过柱，弃去滤液。用4mL乙腈/水溶液(5：95，v/v) 分两次淋洗固相萃取柱，弃去淋洗液，抽干小柱。用8mL乙酸乙酯洗脱固相萃取柱，收集洗脱液。 重新溶解：洗脱液于45℃氮吹吹干，用1mL乙腈/水溶液(2：8， v/v)定溶， 0.22 Hm微孔滤膜过滤，供高效液相色谱测定。 三、仪器条件 设备： Waters Alliance 2695 色谱柱：XB-C18(4.6 mm×250 mm，5Hm) 检测器： Waters 2487 紫外检测器 检测波长：268 nm 流动相：A：水 B：甲醇洗脱方式：等度洗脱， A： B=40： 60 流速：1.0 mL/min 进样体积：20L 四、实验结果 表1 牛奶基质中氯霉素的0.5 mg/kg 添加回收结果 回收率(%) 名称 平均回收率(%) RSD(%) 图1添加水平为 0.5 mg/kg 牛奶基质中氯霉素检测色谱图 货号 描述 包装 COC186500 CopureR C18 固相萃取柱， 500 mg/6 mL 30支/盒 SF130-22-NL 尼龙/中13 mm/0.22 Hm/有机系 100个/盒 MF047-45-MCE MCE/47 mm/0.45 Hm/水系 200片/盒 MF047-45-PTFE PTFE/中47 mm/0.45 Hm/有机系 200片/盒 V2-AL 2mL棕色短螺纹广口样品瓶，带书写处 100个/盒 SC2-5 2mL蓝色聚丙烯盖，预开口，9-425 100个/盒 SPEMF12G 12位固相萃取负压装置，玻璃缸体 1个/盒 水产品中氟苯尼考检测的固相萃取方法(Copure° C18) 本方法适用于水产品中氟苯尼考的测定 一、样品提取 准确称取均质后的鱼肉5.00g(精确到0.01g)，加入乙酸乙酯15 mL， 高速均质1 min， 加入3g无水硫酸钠，涡旋混匀1 min， 摇床振荡10 min。 4000 r/min 转速离心5 min。将上清液转移至梨形瓶中，于45℃旋蒸至近干，用6mL水溶解残渣，2×5mL次正己烷除脂，弃去正己烷层，待净化。 二、SPE柱净化 (Copure C18， 500 mg/6mL) 活化：C18固相萃取柱使用前依次使用5mL甲醇和5mL水活化，保持柱体湿润。 上样和洗脱：将待净化液加入已活化好的固相萃取柱中，以2 mL/min 的流速过柱，弃去滤液，用5mL水淋洗固相萃取柱，弃去淋洗液，抽干小柱。用6mL甲醇洗脱固相萃取柱，收集洗脱液。 重新溶解：洗脱液于45℃氮吹吹干，用1mL甲醇溶解， 0.22Hm微孔滤膜过滤，供 HPLC上机测试。 三、仪器条件 设备： Waters Alliance 2695 色谱柱： XB-C18(4.6 mm×250 mm， 5 Hm) 检测器： Waters 2487 紫外检测器 检测波长：224nm 流动相： A：水BB：乙腈洗脱方式：等度洗脱， A： B=83：17 流速：1.0 mL/min 进样体积：20 四、实验结果 表2添加水平为1.0 mg/kg 鱼肉中氟苯尼考的添加回收结果 回收率(%) 名称 平均回收率(%) RSD(%) 图1添加水平为1.0 mg/kg 鱼肉中氟苯尼考的检测色谱图 订购信息 货号 描述 包装 COC186500 CopureB C18 固相萃取柱， 500 mg/6 mL 30支/盒 SF130-22-NL 尼龙/中13 mm/0.22 Hm/有机系 100个/盒 MF047-45-MCE MCE/D47 mm/0.45Hm/水系 200片/盒 MF047-45-PTFE PTFE/Q47 mm/0.45 Pm/有机系 200片/盒 V2-AL 2 mL棕色短螺纹广口样品瓶，带书写处 100个/盒 SC2-5 2 mL 蓝色聚丙烯盖，预开口，9-425 100个/盒 SPEMF12G 12位固相萃取负压装置，玻璃缸体 1个/盒 一、样品提取 准确称取均质后的鱼肉 5.00 g（精确到 0.01 g），加入乙酸 乙酯 15 mL，高速均质 1 min，加入 3 g 无水硫酸钠，涡旋混 匀 1 min，摇床振荡 10 min。4000 r/min 转速离心 5 min。 将上清液转移至梨形瓶中，于 45℃旋蒸至近干，用 6 mL 水 溶解残渣，2×5 mL 次正己烷除脂，弃去正己烷层，待净化。 二、SPE 柱净化（Copure® C18，500 mg/6 mL） 活化：C18 固相萃取柱使用前依次使用 5 mL 甲醇和 5 mL 水 活化，保持柱体湿润。 上样和洗脱：将待净化液加入已活化好的固相萃取柱中，以 2 mL/min 的流速过柱，弃去滤液，用 5 mL 水淋洗固相萃取 柱，弃去淋洗液，抽干小柱。用 6 mL 甲醇洗脱固相萃取柱， 收集洗脱液。重新溶解：洗脱液于 45℃氮吹吹干，用 1 mL 甲醇溶解，0.22µm 微孔滤膜过滤，供 HPLC 上机测试。 三、仪器条件 设备：Waters Alliance 2695 色谱柱：XB-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 µm) 检测器：Waters 2487 紫外检测器 检测波长：224 nm 流动相：A: 水 B: 乙腈 洗脱方式：等度洗脱，A：B=83：17 流速：1.0 mL/min 进样体积：20 µL 四、实验结果 表 2 添加水平为 1.0 mg/kg 鱼肉中氟苯尼考的添加回收结果