三文鱼中品质检测方案(质构分析仪)

FOOD&MACHINERY第35卷第7期总第213期|2019年7月|食品与机械DOI：10.13652/j.issn.1003一5788.2019.07.030 总第213期|2019年7月|食品与机械贮运与保鲜 STORAGE TRANSPORTATION &. PRESERVATION 胶原/壳聚糖抗菌海绵衬垫对三文鱼品质变化的影响 Effect of collagen/chitosan antibacterial sponge pad on salmon quality 王珠珠 王利强1.” 方丹丹 李保强 WANG Zhu-zhu WANG Li-qiang FANG Dan-dan LI Bao-qiang (1.江南大学机械工程学院，江苏无锡 214122： 2.江苏省食品先进制造装备技术重点实验室，江苏无锡 214122) (1. Department ofPackaging Engineering， Jiangnan University， Wuxi， Jiangsu 214122， China； 2. Jiangsu Key Laboratory of Aduanced Food Manufacturing Equipment and Technology，Jiangnan University， Wuxi， Jiangsu 214122， China ) 摘要：将生鲜三文鱼肉进行抗菌海绵衬垫衬 PE 膜包装、PP衬垫覆 PE膜包装以及空白组覆 PE 膜包装，在4℃条件下贮藏，以感官评定、失重率、pH值、色差值、质构值、挥发性盐基氮(TVB-N)以及菌落总数为评价指标，研究抗菌海绵衬垫对冷藏三文鱼的保鲜效果。结果显示：在贮藏期间，各组三文鱼肉的感官评分值呈下降趋势；失重率、色差值、挥发性盐基氮及菌落总数呈上升趋势；pH值呈先降低后上升的趋势。除失重率外抗菌海绵衬垫组包装的三文鱼片各项评价指标均优于 PP衬垫组与空白组，抗菌海绵衬垫可延长三文鱼肉的冷藏货架期2~4d. 关键词：三文鱼；胶原；壳聚糖；丁香油；浅盘包装；衬垫；品质 Abstract： To study the effect of collagen/chitosan antibacterialsponge pad with clove oil on the quality change of tray-packedsalmon meat during storage， fresh salmon meat was packaged inantibacterial sponge pad covered PE film， PP pad covered PE filmand only covered with PE film. After stored at 4℃， with sensoryevaluation， weight loss rate， pH value， color difference value，texture value， volatile base nitrogen (TVB-N)， the total numberof colonies as evaluation indicators， the preservation effect of an-tibacterial sponge pad on fresh salmon was investigated. The re-sults showed that， during the cold storage period， the sensoryscores of salmon meat in each group showed a downward trend. ( 基金项目：中央高校基本科研业务费专项资金(编扁： JUSRP21115)；江苏省食品先进制造装备技术重点实验室自主资助基金资助项目(编号：FMZ201902) ) ( 作者简介：王珠珠，女，江南大学在读硕士研究生。 ) ( 通信作者：王利强(1977 一 )，男，江南大学教授，博士。 E-mail：wlq@163.com ) ( 收稿日期：2019-02-25 ) Moreover， the weight loss rate， color difference， TVB-N and thetotal number of colonies showed an upward trend； the pH valuefirst decreased and then increased. Except for the weight lossrate， the indexes of the antibacterial sponge pad group were supe-rior to those of the PP pad group and the blank group. The anti-bacterial sponge pad could extend the shelf life of fresh salmonmeat for 2 to 4 days. Keywords： salmon； collagen； chitosan； clove oil； tray packaging；pad； quality 三文鱼属于冷水域回游鱼类，主要分布在太平洋及大西洋北部，肉色橙红，含有丰富的氨基酸与不饱和脂肪酸等，享有“冰海之皇”美誉。由于三文鱼肉中水分、可溶性蛋白质含量高，不饱和脂肪酸易氧化，很容易发生腐败，限制其货架寿命2。目前国内外用在生鲜鱼肉销售包装上的多是有较好陈列效果的浅盘裹包，为避免血水堆积滋生细菌加速腐败，采用的浅盘吸水衬垫多是聚丙烯(PP)无纺布等材料，同时肉品未经过任何的保鲜处理，因此保鲜期往往仅有2~4d31。目前国内外多研究贮藏温度对三文鱼保鲜的影响14-6，鲜有关于保鲜剂对生鲜三文鱼品质影响的研究，尤其缺乏冷藏条件下，浅盘销售包装形式三文鱼肉质变化的相关报道。 鱼鳞胶原蛋白来源于鱼加工下脚料，能够增加鱼加工的经济附加价值，具有强吸水力和持水力，可防止汁液流失，抑制微生物生长7-81。壳聚糖可生物降解，易在细菌表面堆积从而抑制病原菌的生长，达到抗菌的目的，在食品保鲜方面应用较为广泛191，丁香油主要成分丁香酚，具有较强的抑制细菌和真菌作用10]，常用于食品的防腐保鲜。为解决生鲜鱼肉托盘包装中血水堆积加速腐败的 问题，本研究拟采用鱼鳞胶原蛋白、壳聚糖和丁香油为原料制备高吸湿性的海绵衬垫，研究在4℃冷藏条件下，比较含抗菌衬垫覆 PE 膜包装、PP衬垫覆PE膜包装以及无衬垫覆PE 膜包装对三文鱼品质变化的影响，以货架期间鱼肉的感官品质、失重率、pH值、色差值、质构值、挥发性盐基氮以及菌落总数指标等来进行生鲜三文鱼品质评价，为三文鱼等鱼类浅盘保鲜包装保鲜技术的改进提供理论依据。 材料与方法 1.1 材料与仪器 1.1.1 材料与试剂 生鲜三文鱼：智利深海三文鱼； PP无纺布：上海市希丝无纺布制品有限公司； 淀粉基塑料浅盘：常州龙骏天纯环保科技有限公司； 罗非鱼鳞：雷州市乌石镇龙之润水产品加工厂； 胃蛋白酶：生物试剂，酶活力≥1200.0 U/g，国药集团化学试剂有限公司； 壳聚糖生物试剂：国药集团化学试剂有限公司； 丁香油、吐温80：化学纯，上海阿拉丁生化科技股份有限公司。 1.1.2 主要仪器设备 数字显示转速电动搅拌机：JB200-S型，上海标本模型厂； 真空冷冻干燥机：Scientz-20F型，宁波新芝生物科技股份有限公司； 质构仪：TMS-Pro型，美国 FTC公司 1.2 方法 1.2.1 抗菌衬垫制备 取20 g罗非鱼鱼鳞碎片置于烧杯中，加入300mL去离子水、0.6 mol/L的乙酸和300 U/g的胃蛋白酶，室温提取 24 h，再将提取得到的胶原蛋白纯化，在培养皿浇注5mm，放入真空冷冻干燥机中进行冷冻干燥，即得纯胶原蛋白白绵，-20℃下保存备用。 将壳聚糖加入0.5 mol/L的乙酸溶液中，配制成质量浓度2%的壳聚糖溶液。将冻干胶原蛋白加入0.5 mol/L的乙酸溶液中溶溶 24 h，配制成质量浓度2%胶原蛋白溶液。将丁香油与乳化剂吐温80以2：1体积比混合并搅拌均匀得丁香油乳液。将壳聚糖溶液与胶原蛋白溶液以6：4体积比混合并加入体积分数1%的丁香油乳液和质量分数10%的甘油，配制成复合海绵溶液。在培养皿浇注5mm，放于真空冷冻干燥机中进行冷冻干燥，得到抗菌海绵衬垫，一20℃下保存备用。 1.2.2 样品处理 将新鲜的三文鱼切成8.0 cm×5.0 cm× 0.5 cm的鱼片，随机进行抗菌海绵衬垫覆 PE 膜包装、PP衬垫覆 PE 膜包装以及空白组覆PE膜包装，分成3组，置于4℃恒温冰箱中贮藏 14 d。 1.2.3 新鲜度指标测定 本试验分别采用感官评定、化学指标(pH值、TVB-N值)、物理指标(失重率、色差值、质构值)和微生物指标(菌落总数)等来检测三文鱼肉的品质。 (1)感官评定：参照 GB/T 18108—2008 建立感官评定标准。 (2)失重率：用分析天平称量三文鱼块重量，每次做3个平行试验，按式(1)计算失重率。 式中： M——失重率，%； moo——初始质量，g； 772， -第 n天质量，g。 (3)色差值：用色差计每隔48 h测量三文鱼肉色差值(L、a*、b*)。每次做3个平行试验，按式(2)计算色差11]。 式中： E——f色差； △L——所测亮度值与初始亮度值之差； a*——所测红度值和初始红度值之差； A6* 所测黄度值与初始黄度值之差。 (4)质构值：使用球形探头，对样品进行两次压缩质构仪质地多面剖析(TPA)测试，每次做3个平行试验。其中质构特性指标包括硬度、黏附性、弹性、咀嚼性，各参数设计：测试速度1mm/s，变形程度50%，最小压力0.1N，两次压缩时间间隔5s12]。 (5)pH值：参考文献[13]的方法，取5.0g三文鱼肉搅碎并置于锥形瓶中，加入去离子50 mL 震荡30 min，静置并过滤，测量滤液pH值，每次做3个平行试验。 (6)挥发性盐基氮值(TVB-N)：按 GB 5009.228-2016的微量扩散法执行。 (7)菌落总数：按GB 4789.2—2010执行。 2 结果与分析 2.1 感官评定 如图1所示，空白组、PP衬垫组和抗菌海绵衬垫组三文鱼的感官评分均随着时间的延长而降低。贮藏前期(0~2d)抗菌海绵衬垫组和PP衬垫组的感官评分略高于空白组，是由于衬垫对鱼肉流失汁液的吸收提升了本组的感官品质。从第4天开始抗菌衬垫组评分开始超过其他两组，说明抗菌海绵衬垫在贮藏过程中起到了抑菌效果，减缓了三文鱼肉腐败变质的速度。第8天空白组和PP衬垫组三文鱼肉感官评分已达5分以下，产生有刺激性的腐臭味。这与张新林等5研究4℃下三文鱼品质变化的结果是一致的。从感官评价看，抗菌海绵衬垫有 Time/d 图1三文鱼肉感官评定变化 Figure 1 Trends of organoleptic evaluation of salmon 效地延长了三文鱼肉的货架期。 2.2 失重率 重量的损失会影响鱼肉的构型外观，影响其营养及口感14]，生鲜三文鱼肉在贮藏过程中失重率的变化情况如图2所示，可以看出3组三文鱼肉的失重率均随贮藏时间的推移不断增大。其中抗菌海绵衬垫组吸水保水性能好，失重率增大速度最快，4℃下冷藏2d失重率8.55%，约为 PP衬垫组的2.9倍，空白组的11.25倍。14d失重率达16.69%，PP衬垫组次之，空白组失重率增大速度最小，14d失重率仅为5.93%。2~8d3组水分流失速度均趋缓，是由于生鲜三文鱼肉自由水含量较高，随着时间的延长，自由水含量变小，衬垫吸收水分的速度也随之减缓。随着贮藏时间继续增加，三文鱼肉的组织结构逐渐松散，PP衬垫组和空白组的汁液流失速度8d后又有增大趋势。 Time/d 图2三文鱼肉失重率变化 Figure 2 Trends of weight loss rate of salmon 2.3 色差值 色泽是鉴别三文鱼肉新鲜度的重要指标之一。色差值E≤12.0表示颜色变化不明显，AE>12.0表示颜色变化明显15J。图3表明，随着贮藏时间的延长，各组三文鱼肉的色差值△E 均不断增大，8d时 PP衬垫组与空白组的色差差^E分别为14.4，15.9，均已超过12.0，此时抗菌海绵衬垫组的色差值△E仅为7.5。14d抗菌海绵衬垫组、PP衬垫组和空白组的色差值△E分别为14.3，19.6，20.9。在贮藏末期三文鱼橙红肉色转变为暗色，可 Time/d 图3 三文鱼肉色泽变化 Figure 3 Trends of color difference of salmon 能是橙色的显色物质虾青素等类胡萝卜素物质因氧化而被破坏16]。抗菌衬垫组的色差变化速度明显小于其他两组，PP衬垫组的色差变化速度略小于空白组，说明抗菌海绵衬垫对三文鱼的颜色有良好的保护作用。 2.4 质构值 三文鱼死后肉质会出现僵直、软化等变化，在冷藏期间肉质的变化可以通过质构参数反映出来。由表1~3可知，3组三文鱼肉的硬度与弹性在贮藏初期逐渐增加而后逐渐降低，在贮藏初期，肌肉组织呼吸停止，在 ATP降解、内糖原分解作用下产生酸性物质，使肌肉组织僵直收缩171.随着贮藏时间的延长，结缔组织的力学强度下降， 表1 空白组三文鱼肉的质构变化 Table 1(Changes in texture of blank control groupof salmon 时间/d 硬度/N 黏附性/mJ 弹性/mm 咀嚼性/mJ 0 10.42±0.87 0.47±0.04 2.00±0.05 7.17±0.39 2 12.64±0.43 0.51±0.19 2.48±0.24 6.56±0.64 4 15.55±0.62 0.74±0.15 1.83±0.23 6.64±0.37 6 12.27±0.07 1.16±0.12 2.17±0.16 5.92±0.10 8 12.69±0.25 1.30±0.17 1.98±0.20 5.33±0.37 10 10.81±0.27 1.45±0.05 1.67±0.11 4.75±0.05 12 8.74±0.32 1.56±0.27 1.49±0.02 3.69±0.34 14 7.58±0.91 1.59±0.06 1.32±0.06 2.98±0.21 表2FPP 衬垫组三文鱼肉的质构变化 Table 2Changes in texture of PP pad group of salmon 时间/d 硬度/N 黏附性/mJ 弹性/mm 咀嚼性/mJ 0 10.42±0.18 0.47±0.11 2.00±0.33 7.17±0.38 2 12.09±0.85 0.42±0.08 2.01±0.05 7.77±0.55 4 14.70±0.29 0.66±0.19 2.25±0.14 6.58±0.25 6 13.33±0.43 1.13±0.01 1.98±0.09 5.73±0.07 8 12.67±0.17 1.29±0.12 2.05±0.08 5.42±0.13 10 10.79±0.3l 1.38±0.06 1.85±0.23 4.59±0.26 12 9.33±0.62 1.41±0.03 1.47±0.17 4.33±0.20 14 8.48±0.04 1.45±0.24 1.24±0.33 3.61±0.18 表3 抗菌海绵衬垫组三文鱼肉的质构变化 Table 3 Changes in texture of antibacterial sponge padgroup of salmon 时间/d 硬度/N 黏附性/mJ 弹性/mm 咀嚼性/mJ 0 10.42±0.08 0.47±0.02 2.00±0.14 7.17±0.31 2 14.91±0.45 0.67±0.13 2.10±0.07 6.67±0.25 4 16.20±0.37 0.67±0.17 1.84±0.11 6.27±0.13 6 17.12±0.62 0.94±0.04 1.92±0.16 6.01±0.35 8 16.73±0.18 1.15±0.10 1.85±0.08 5.56±0.67 10 17.64±0.04 1.23±0.25 1.72±0.18 5.37±0.46 12 14.31±1.03 1.30±0.06 1.76±0.22 5.09±0.23 14 11.73±0.08 1.27±0.12 1.51±0.04 4.88±0.13 三文鱼肉逐渐松散，其硬度值与弹性值又降低。咀嚼性则是三文鱼肌肉硬度降低、弹性减小的综合体现。随着贮藏时间的延长，鱼体不饱和脂肪酸氧化和微生物的生长繁殖，使三文鱼加速变质，从而导致鱼体肌肉组织趋软，咀嚼性下降18]。黏附性的逐渐增加与三文鱼肉富含的不饱和脂肪酸氧化有关，脂肪氧化以及微生物分解的作用导致肉质发黏。 2.5 pH值 pH值可以作为判断产品新鲜度的重要指标。3组三文鱼肉在冷藏过程中pH值的变化情况如图4所示。贮藏初期由于鱼体内糖原在糖原酶作用下产生乳酸，同时 ATP 与磷酸肌酸等物质分解产生磷酸等酸性物质导致酸积累19J，3组三文鱼肉pH值均有小幅降低，抗菌海绵衬垫组在第6天达到最低，PP衬垫组和空白组均在第4天达到最低。随贮藏时间不断增加，3组三文鱼肉的pH值有不同程度地增大。这是由于鱼体内的蛋白质在微生物及自溶酶的作用下不断分解，积累氨、二甲胺等胺类以及其他含氮化合物等碱性物质1201。第14天，抗菌衬垫组、PP衬垫组和空白组的pH值分别为6.92，7.11，7.16。抗菌衬垫组的pH值的增加速度低于其他两组，表明抗菌海绵衬垫在三文鱼储藏后期起到了很好地抑制微生物的作用。 Time/d 图4 三文鱼肉 pH值变化 Figure 4 Trends of pH value of salmon 2.6 挥发性盐基氮值 挥发性盐基氮(TVB-N)是判断鱼类品质的一项重要指标，在贮藏过程中，鱼类蛋白质和非蛋白质在内源酶和微生物的作用下分解，产生胺类及其他含氮化合物等碱性挥发物质L21]，TVB-N含量越高，生鲜鱼肉品质越差。图5显示，在0~2d两组衬垫处理组与空白组无显著差异，而在4~14d时3组TVB-N值呈现显著差异，储藏前期，由于微生物增殖速率与蛋白质分解速率较低，三文鱼新鲜度良好，TVB-N值增加缓慢，4d之后，三文鱼TVB-N值增加速度开始增大。根据 GB 2733—2015，当TVB-N值≤10 mg/100 g时，三文鱼肉新鲜度最好，属于一级鲜度；当TVB-N值≤20 mg/100 g时新鲜度较差，仍可食用；三文鱼的 TVB-N值≤30 mg/100 g 才符合食用标准。由图5可知，抗菌海绵衬垫组的TVB-N值在14d超过食用标准，PP衬垫组和空白组则分别在12，10d超过食用标准。表明抗菌海绵衬垫可有效延缓三文鱼肉在贮藏过程中微生物及内源酶对蛋白质的分解，在浅盘保鲜包装中起到一定的保鲜效果。 图5 三文鱼肉 TVB-N 含量的变化 Figure5 Trends of TVB-N value of salmon 2.7 菌落总数 菌落总数是评价水产品污染程度的常用指标，生鲜三文鱼的水分含量高，且含有大量的蛋白质、不饱和脂肪酸等，微生物不断分解鱼肉中丰富的营养物质，并利用这些分解产物作为其繁殖的营养来源，不断增殖，引起鱼体的腐败变质。这与图6显示冷藏三文鱼菌落总数值总体随着储藏时间的延长呈现增加的趋势一致，10d后曲线增长趋势放缓，可能是微生物数量在储藏中期增速速快，后期相互竞争鱼体营养物质。在1~2d空白组与衬垫组的菌落总数无显著差异，而在4d后抗菌海绵衬垫组与其他两组的差异显著，说明抗菌海绵衬垫在三文鱼肉的浅盘包装中起到了抑菌作用。根据国际食品微生物委员会(ICMSF)相关标准221，生鲜鱼类的菌落总数不得超过10° CFU/g。图6表明，空白组三文鱼肉在第6天已超过10° CFU/g，抗菌衬垫组在第10天超过10° CFU/g。由此可知，抗菌海绵衬垫在三文鱼肉冷藏过程中具有良好的保鲜效果，可将其货架期延长约4d。 Time/d 图6 三文鱼肉菌落总数的变化 Figure6 Trends of total number of colonies of salmon 3 结论 本研究以鱼鳞胶原蛋白和壳聚糖为基材，将添加丁香油为抗菌剂制备的抗菌海绵衬垫应用于三文鱼肉的保鲜，结果表明抗菌海绵衬垫有效延缓了三文鱼肉的腐败速率，抑制细菌的生长，并改善了其感官品质，4℃条件下保存的生鲜三文鱼肉货架期延长2~4d，且该抗菌海绵衬垫绿色可降解，在生鲜鱼肉的浅盘包装领域具有良好的应用前景。 本研究选用的抗菌剂属于挥发油，后期研究可以将抗菌剂包裹在微胶囊中，使抗菌剂有效缓释，达到更好的抑菌效果。 ( 参考文献 ) ( [1]江建军，邓林，李华.人工养殖三文鱼营养成分的分析[J]. 食品与机械，2011，27 ( 6)：40-42. ) ( _ 2] W ANG Zhe， HU Shu a i-fei ， GA O Yu-peng ， 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All rights reserved. http：//www.cnki.net 胶原/壳聚糖抗菌海绵衬垫对三文鱼品质变化的影响作者：王珠珠，王利强，方丹丹，李保强江南大学机械工程学院江苏省食品先进制造装备技术重点实验室 摘   要：将生鲜三文鱼肉进行抗菌海绵衬垫覆PE膜包装、PP衬垫覆PE膜包装以及空白组覆PE膜包装，在4℃条件下贮藏，以感官评定、失重率、pH值、色差值、质构值、挥发性盐基氮(TVB-N)以及菌落总数为评价指标，研究抗菌海绵衬垫对冷藏三文鱼的保鲜效果。结果显示：在贮藏期间，各组三文鱼肉的感官评分值呈下降趋势；失重率、色差值、挥发性盐基氮及菌落总数呈上升趋势；pH值呈先降低后上升的趋势。除失重率外抗菌海绵衬垫组包装的三文鱼片各项评价指标均优于PP衬垫组与空白组，抗菌海绵衬垫可延长三文鱼肉的冷藏货架期2~4d。关键词：三文鱼 胶原 壳聚糖 丁香油 浅盘包装 衬垫 品质