海参中农药残留检测方案

衣残篇www.biocomma.cn 27固相萃取产品应用手册(6版) indd 272021/1/2715：04：35 海参中敌敌畏等21种有机磷农药多残留的UPLC-MS/MS测定(Lipoclean 磷脂去除柱) 一、样品提取 称取5.0 g经泡发的海参于50mL离心管中，加3mL水，加-颗陶瓷均质子，2500 rpm涡旋1 min， 加入10 mL乙腈，2500 rpm涡旋 5 min， 加入 QuEChERS 盐包(4g无水硫酸镁，1g氯化钠，1g柠檬酸钠和0.5 g柠檬酸氢二钠)立即手动打散， 然后2500 rpm涡旋5 min， 5000 r/min 离心5 min，上层乙腈层待净化。 二、样品净化 准确移取2.4 mL 乙腈层加0.6mL水涡旋混匀，重力作用下全部过 Lipoclean 小柱，抽干，收集全部流出液，混匀，过0.22Hm尼龙滤膜供上机测试。 三、标曲配制 称取海参阴性样品5.0 g按照上述一、二步骤操作得空白基质提取液，然后分别精密量取含0，10，20， 40， 80， 100 ng的混合标准液用空白基质提取液定容至1mL，配制成浓度为0，10， 20， 40， 80， 100 ng/mL 的基质混合标准工作溶液。 四、仪器条件 色谱条件 仪器： UPLC-MS/MS (Thermo Fisher TQS Endura) 色谱柱： CommaSil@ ODS (2.1 mm×100 mm， 3.0 Hm) 流动相：A：水(0.1%甲酸) B：甲醇(0.1%甲酸) 洗脱方式：梯度洗脱，见表1 表1梯度洗脱程序 时间/min A/% B/% 0 98 2 1.0 95 5 4.0 70 30 8.0 30 70 9.0 30 70 10.0 2 98 13.5 2 98 14.0 98 2 15.0 98 2 流速：0.4 mL/min 柱温：35℃ 进样量：5儿 质谱条件 离子源： HESI； 电喷雾电压：3500V 鞘气压力：30 arb 辅气压力：2 arb 离子传输管：380n℃ 辅气温度：350℃ 表2组分名称、保留时间及特征离子一览表(*为定量离子) 序号 名称 保留时间/min 母离子 子离子 1 甲胺磷 0.98 142.1 94.083*，125.0 2 乙酰甲胺磷 2.95 184.0 143.0*，125.0 3 久效磷 5.30 224.1 192.929*，109.071 4 甲基硫环磷 5.35 228.0 167.917*，109.083 5 内吸磷 7.10 259.1 230.917*，141.929 6 硫环磷 7.11 256.0 139.917*，227.917 7 磷胺 7.46 300.0 174.0*，127.0 8 敌敌畏 7.82 221.3 9 水胺硫磷 8.8 312.0 10 马拉硫磷 9.79 331.0 99.083*，127.071 11 氯唑磷 10.7 314.0 162.0*，271.917 12 灭线磷 10.16 243.1 214.988*，172.917 13 苯线磷 10.29 304.1 14 甲基异硫磷 10.53 332.2 230.917*，121.071 15 治螟磷 10.63 323.0 16 蝇毒磷 10.68 363.0 17 伏杀硫磷 10.72 368.1 181.917*，321.946 18 倍硫磷 10.73 279.0 246.917*，168.958 19 地虫硫磷 10.75 247.0 109.083*，137.0 20 甲拌磷 10.83 261.0 75.238*，170.845 21 特丁硫磷 11.09 289.1 103.125*，57.363 五、实验结果 表3海参中21种有机磷农药加标回收结果(0.1 mg/kg) 目标物 回收率% 平均回 RSD% 1 2 3 4 5 收率% 甲胺磷 71.79 75.03 69.48 69.78 71.46 71.5 3.1 乙酰甲胺磷 65.09 63.07 69.90 71.52 64.68 66.9 5.5 久效磷 101.12 96.11 97.84 94.85 92.04 96.4 3.5 甲基硫环磷 96.03 95.16 94.41 96.66 96.05 95.7 0.9 硫环磷 65.68 68.44 67.09 68.12 66.70 95.0 1.1 内吸磷 99.90 94.33 95.40 90.25 99.38 95.9 4.1 磷胺 95.68 95.97 94.09 95.53 93.53 95.0 1. 1 敌敌畏 103.84 115.22 108.96 106.11 109.01 108.6 3.9 水胺硫磷 98.65 102.71 95.39 112.54 107.01 103.3 6.6 马拉硫磷 90.75 93.50 89.86 92.20 94.63 92.2 2.1 氯唑磷 96.42 99.49 97.98 99.02 99.57 98.5 1.3 灭线磷 97.41 100.52 96.45 100.68 100.49 99.1 2.0 苯线磷 91.32 90.62 90.59 90.16 91.45 90.8 0.6 甲基异硫磷 84.34 83.98 82.09 87.71 88.65 85.4 3.2 治螟磷 92.68 92.31 94.49 97.00 98.42 95.0 2.8 蝇毒磷 95.71 96.99 95.12 99.41 102.12 97.9 3.0 伏杀硫磷 98.59 97.39 97.80 99.14 104.75 99.5 3.0 倍硫磷 104.03 103.91 113.18 109.22 112.56 108.6 4.1 地虫硫磷 98.50 95.05 95.15 100.80 98.06 97.5 2.5 甲拌磷 101.32 95.90 97.33 103.89 103.60 100.4 3.6 特丁硫磷 87.49 72.91 76.99 89.69 85.96 82.6 8.8 图1添加浓度为20 ng/L的21种有机磷农药检测总离子流图 订购信息 货号 描述 包装 COQ050010H 4g无水硫酸镁，1g氯化钠，1g柠檬酸钠和0.5 g 柠檬酸氢二钠，50mL离心管 50支/盒 COLIP3300 Copure@ Lipoclean，磷脂去除柱300 mg/3 mL 50支/盒 CS2110030DS CommaSile ODS 色谱柱，2.1 mm×100 mm， 3 Hm 1根/盒 BC-1000 biocomma@ 多管涡旋混匀仪 1台/箱 SF130-22-NL 尼龙/中13 mm/0.22 um/有机系 100个/盒 MF047-22-MCE MCE/中47 mm/0.45 pm/水系 200片/盒 MF047-22-NL 尼龙滤膜，直径47mm， 孔径0.22 Hm，水系 200片/盒 SC2-1 2 mL 蓝色聚丙烯盖，9-425 100个/盒 V2-AL 2mL螺纹棕色样品瓶，带书写处 11.6*32 mm， 9-425 100个/盒 一、样品提取 称取 5.0 g 经泡发的海参于 50 mL 离心管中，加 3 mL 水，加一颗陶瓷均质子，2500 rpm 涡旋 1 min，加入 10 mL 乙腈， 2500 rpm 涡旋 5 min，加入 QuEChERS 盐包（4 g 无水硫酸镁，1 g 氯化钠，1 g 柠檬酸钠和 0.5g 柠檬酸氢二钠）立即手动 打散，然后 2500 rpm 涡旋 5 min，5000 r/min 离心 5 min，上 层乙腈层待净化。二、样品净化 准确移取 2.4 mL 乙腈层加 0.6 mL 水涡旋混匀，重力作用下全 部过 Lipoclean 小柱，抽干，收集全部流出液，混匀，过 0.22  µm 尼龙滤膜供上机测试。 三、标曲配制 称取海参阴性样品 5.0 g 按照上述一、二步骤操作得空白基质 提取液，然后分别精密量取含 0，10，20，40，80，100 ng 的 混合标准液用空白基质提取液定容至 1 mL，配制成浓度为 0， 10，20，40，80，100 ng/mL 的基质混合标准工作溶液。四、仪器条件 色谱条件 仪器：UPLC-MS/MS（Thermo Fisher TQS Endura） 色谱柱：CommaSil® ODS (2.1 mm×100 mm，3.0 µm) 流动相：A：水（0.1% 甲酸） B：甲醇（0.1% 甲酸） 洗脱方式：梯度洗脱，见表 1 表 1 梯度洗脱程序流速：0.4 mL/min  柱温：35℃  进样量：5 µL质谱条件 离子源：HESI； 电喷雾电压：3500 V 鞘气压力：30 arb  辅气压力：2 arb 离子传输管：380n℃  辅气温度：350℃表 2 组分名称、保留时间及特征离子一览表（* 为定量离子）五、实验结果 表 3 海参中 21 种有机磷农药加标回收结果（0.1 mg/kg）