茶叶中农药残留检测方案

-o农残篇 衣残篇 茶叶中多种农药残留的UPLC-MS/MS测定 (Copure@专用柱) 《GB 23200.13-2016 茶叶中448种农药及相关化学品残留量的测定》 一、样品提取 鞘气压力：30 arb 准确称取10.0g经粉碎的茶叶于50 mL离心管中，加入30mL 乙，2500 rpm 涡旋10 min， 5000 r/min离心5 min，上清液转移至100 mL鸡心瓶中，残渣加30mL乙腈，2500 rpm涡旋 10 min， 5000 r/min 离心5 min， 上清液转移并入鸡心瓶中，残渣再加20 mL乙腈重复提取一次，合并上清液于鸡心瓶中，45℃水浴旋蒸浓缩至近干，转移至15 mL离心管中，用乙腈定容至5mL待净化。 辅气压力：2arb 离子传输管：380℃ 辅气温度：350℃ 表2组分名称、保留时间及特征离子一览表(*为定量离子) 二、样品净化 (Copure@茶叶专用柱，12mL) 活化：茶叶柱加入约2 cm 高无水硫酸钠，用5mL乙腈-甲苯溶液(3：1)预洗柱；弃去流出液 上样和洗脱：茶叶柱下接鸡心瓶，取待净化液1mL过柱，收集流出液；然后加入25 mL 乙腈-甲苯溶液(3：1)进行洗脱，收集流出液。 重新溶解：洗脱液于45℃氮吹至干，用1mL 60%乙腈水溶液复溶，过0.22 Hm尼龙滤膜供上机测试。 三、标曲配制 称取空白茶叶样品10.0g按照上述一、二步骤进行至氮吹近干，作为空白基质提取液。分别精密量取一定量的混合标准液加入到空白基质提取液中，用60%乙腈水溶液定容至1mL，配制成适当浓度的基质混合标准工作溶液。 四、仪器条件 色谱条件 仪器： UPLC-MS/MS (Thermo Fisher TQS Endura) 色谱柱： CommaSil@ ODS (2.1 mm×100 mm， 3.0 Hm) 流动相：A：水(0.1%甲酸) B：甲醇(0.1%甲酸) 洗脱方式：梯度洗脱，见表1 表1梯度洗脱程序 时间/min A/% B/% 0 98 2 1.0 95 5 4.0 70 30 8.0 30 70 9.0 30 70 10.0 2 98 13.5 2 98 14.0 98 2 15.0 98 2 流速：0.4mL/min 柱温：35℃ 进样量：5L 质谱条件 五、实验结果 NL：4.21E4 表3茶叶中多种农药残留加标回收结果(0.5 mg/kg) 注：ND：未检出 茶叶中多种农药检测色谱图如下： 31522301402 Time (min uo'eoooq'MMM 鞋斗 货号 描述 包装 CS2110030DS CommaSil@ ODS 色谱柱，2.1 mm×100 mm， 3 Am 1根/盒 BC-1000 biocomma@ 多管涡旋混匀仪 1台/箱 SF130-22-NL 尼龙/中13mm/0.22 pm/有机系 100个/盒 MF047-22-MCE MCE/47 mm/0.45 pm/水系 200片/盒 MF047-22-NL 尼龙滤膜，直径47 mm， 孔径0.22Hm， 水系 200片/盒 SC2-5 2mL蓝色聚丙烯盖，预开口，9-425 100个/盒 V2-AL 2mL螺纹棕色样品瓶，带书写处11.6*32 mm， 9-425 100个/盒 www.biocomma.cn-O固相萃取产品应用手册(版) indd 一、样品提取 准确称取 10.0g经粉碎的茶叶于 50 mL 离心管中，加入 30mL 乙腈，2500 rpm 涡旋 10 min，5000 r/min 离心 5 min，上 清液转移至 100 mL 鸡心瓶中，残渣加 30 mL 乙腈，2500 rpm 涡旋 10 min，5000 r/min 离心 5 min，上清液转移并入鸡心瓶 中，残渣再加 20 mL 乙腈重复提取一次，合并上清液于鸡心瓶 中，45℃水浴旋蒸浓缩至近干，转移至 15 mL 离心管中，用乙 腈定容至 5 mL 待净化。 二、样品净化（Copure® 茶叶专用柱 , 12 mL） 活化：茶叶柱加入约 2 cm 高无水硫酸钠，用 5 mL 乙腈 - 甲苯 溶液（3:1）预洗柱；弃去流出液上样和洗脱：茶叶柱下接鸡心瓶，取待净化液 1 mL 过柱，收 集流出液；然后加入 25 mL 乙腈 - 甲苯溶液（3:1）进行洗脱， 收集流出液。 重新溶解：洗脱液于 45℃氮吹至干，用 1 mL 60% 乙腈水溶液复溶，过 0.22 µm 尼龙滤膜供上机测试。 三、标曲配制 称取空白茶叶样品 10.0g 按照上述一、二步骤进行至氮吹近 干，作为空白基质提取液。分别精密量取一定量的混合标准液加入到空白基质提取液中， 用 60% 乙腈水溶液定容至 1 mL，配制成适当浓度的基质混合 标准工作溶液。四、仪器条件 色谱条件 仪器：UPLC-MS/MS（Thermo Fisher TQS Endura） 色谱柱：CommaSil® ODS (2.1 mm×100 mm，3.0 µm) 流动相：A：水（0.1% 甲酸）   B：甲醇（0.1% 甲酸） 洗脱方式：梯度洗脱，见表 1 梯度洗脱程序流速：0.4 mL/min 柱温：35℃ 进样量：5 µL质谱条件 离子源：HESI  电喷雾电压：3500 V鞘气压力：30 arb  辅气压力：2 arb 离子传输管：380℃  辅气温度：350℃ 表 2 组分名称、保留时间及特征离子一览表（* 为定量离子）五、实验结果 表 3 茶叶中多种农药残留加标回收结果（0.5 mg/kg）六、结果与讨论 （1）该实验采用 UPLC-MS/MS 进行茶叶中多种农药残留的测定， 外标法定量，建议配制基质标曲进行定量，否则会存在基质效应， 影响仪器准确定量；茶叶柱能将茶叶中大部分色素除去，除杂效 果佳，极大程度上降低了杂质对目标分析物的干扰。 （2）从表 3 茶叶中多农残添加回收结果可知：大部分农药回收率 都在 70%-120% 以内，RSD 小于 10%，可以满足绝大多数客户测试 需求。但茶叶柱对乙酰甲胺磷、甲磺隆、氯磺隆、胺苯磺隆、多 菌灵这几种农药存在吸附，造成回收率低或者无回收的现象，如 需对这几种农药进行测定，建议采用 QuEChERS 方法，回收率会得以改善。