厄贝沙坦、甲硝唑注射液、氯化钠注射液中叠氮化物、亚硝酸根离子、钠离子检测方案(离子色谱仪)

离子色谱在制药行业中的应用(系列一) 离子色谱在原料药及其相关制剂中的应用(1) 近年来，随着前处理方法的不断优化，新型多功能色谱柱的开发，淋洗液发生器技术的日益成熟，多种检测器联用技术的探索，离子色谱(IC)在制药行业中的应用越来越广泛。IC 适合检测一些能够溶于水，并有一定解离度的化合物，特别不易挥发、又无紫外吸收的药物，以补充液相和气相对离子型药物分析的不足。 离子色谱可用于分析药物或药物中阴离子、阳离子、有机酸、有机胺、糖类以及抗生素等多种组分，可为药物质量和安全提供科学保障。 为此，盛瀚科研人员围绕“离子色谱在制药行业中的应用”进行了一系列实验测定，希望制药行业或行业外的工作人员对离子色谱的应用有更多参考和了解。 ●离子色谱在原料药及其相关制剂中的应用 原料药，指用于生产各类制剂的原料，是制剂中的有效成份，由化学合成、植物提取或者生物技术所制备的各种用来作为药用的粉末、结晶、浸膏等。原料只有加工成药物制剂，才能成为供临床使用的药物，因此原料药质量好坏决定制剂质量的好坏。 世界各国对于其广泛应用的原料药及其相关制剂都制定了严格的国家药典标准和质量控制方法，以加强药物中有毒成分的控制，加强对药物杂质的定性定量研究，进一步完善药物与有效性相关的质量控制要求。 1.厄贝沙坦中叠氮化物的测定 厄贝沙坦是一种血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂，临床用于治疗原发性高血压，合并高血压的2型糖尿病肾病的治疗。叠氮化物是厄贝沙坦合成工艺最后一步中使用的物料，使用量较大，在精制过程中可能无法完全除去而残留。研究表明，叠氮化物会损害生物的细胞，阻碍生物的新陈代谢。因此，在药物生产过程中，必须严格控制产品和中间体中叠氮化物的含量。 分析柱： Ion Pac AG18+AS18 ● 预处理柱：NG1 ● 富集柱： TAC-ULP1 流动相：KOH溶液梯度淋洗(EG) 0-15 min，9mMKOH；15-22 min，9-40 mM KOH；22-30min， 9 mM KOH。 流速：1.0mL/min ● 柱温：30℃ ● 抑制器： SHY-A-6 ● 进样体积：200uL 前处理：阀切换在线基体消除法 图1厄贝沙坦中叠氮化物的谱图 2.甲硝唑注射液中亚硝酸根离子的测定 甲硝唑氯化钠注射液是一种用来治疗厌氧菌感染的制剂，几乎无色透明。其中有效成分 是甲硝唑，辅料为氯化钠和注射用水。甲硝唑为硝基咪唑衍生物，其在灭菌后容易出现降解产物一亚硝酸盐，亚硝酸盐能使血液中正常携氧低铁血红蛋白氧化成高铁血红蛋白，使其失去携氧能力而引起组织缺氧。如果人体在短时间内摄入过多的亚硝酸盐，就可能引起中毒，严重的情况下，还可能导致细胞癌变，因此需要对甲硝唑氯化钠注射液中亚硝酸盐的含量进行测定。 ● 分析柱： IonPac AS18 流动相： KOH梯度洗脱 0-20 min， 5mMKOH； 20.1-35 min， 25mM KOH： 35.1-40 min， 5mMKOH。 流速：1.0mL/min ● 柱温：30℃ ● 抑制器： SHY-A-6 ● 进样体积：25 uL ● 前处理： 系统适用性溶液：准确称取0.9148g氯化钠于100 mL 容量瓶中，高纯水溶解，加入1mL对照品储备溶液，高纯水定容至刻度，摇匀得系统适用性溶液，进样分析。 对照品溶液：准确称取 0.6030 g 亚硝酸钠于100 mL容量瓶中，高纯水溶解，定容至刻度摇匀，为对照品储备溶液。取1mL上述储备溶液到100 mL容量瓶中，高纯水稀释至刻度，摇匀得对照品溶液，进样分析。 供试品溶液：取甲硝唑氯化钠注射液直接进样分析。 图1系统适用性谱图 图1系统适用性谱图OZr 2 图2对照品谱图 uS/cm 908070605040302010 ON s 0 E10 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40in 图3供试品谱图 3.氯化钠注射液中钠离子的测定 氯化钠注射液是一种电解质补充药物，同时也是静脉给药的载体，用于溶解稀释药物。钠和氯是机体重要的电解质，主要存在于细胞外液，对维持正常的血液和细胞外液的容量和渗透压起着非常重要的作用。正常血清钠浓度为135~145 mmol/L， 占血浆阳离子的92%，总渗透压的90%，故血浆钠量对渗透压起着决定性作用。因此需严格管控氯化钠注射液中钠离子的含量，以维持人体正常的渗透压。 ● 分析柱： Ion Pac CG12A+CS12A ● 流动相：25mM甲烷磺酸 ● 流速：1.0mL/min ● 柱温：35℃ ● 抑制器： SHY-C-5 ● 进样体积：25pL ● 前处理： 对照组溶液：准确称取氯化钠固体 18.0 mg， 用水溶解定容至250 mL， 摇匀后进样分析； 检查对照组溶液：准确称取氯化钠固体 18.0 mg， 用水溶解定容至250mL，摇匀后进样分析； 供试品溶液：精精移取注射液0.8mL，用水稀释至100mL，摇匀后进样分析。 图1对照品中钠离子谱图 图2检查对照品中钠离子谱图 uS/cm 81 72 63 5445 36 27 18 9 2 m 0 0.9 1.8 27 3.6 4.5 5，4 6，3 7.2 8.1 9 9.9min 图3供试品氯化钠注射液中钠离子谱图 图4供试品乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液中钠离子谱图 近年来，随着前处理方法的不断优化，新型多功能色谱柱的开发，淋洗液发生器技术的日益成熟，多种检测器联用技术的探索，离子色谱（IC）在制药行业中的应用越来越广泛。IC适合检测一些能够溶于水，并有一定解离度的化合物，特别不易挥发、又无紫外吸收的药物，以补充液相和气相对离子型药物分析的不足。离子色谱可用于分析药物或药物中阴离子、阳离子、有机酸、有机胺、糖类以及抗生素等多种组分，可为药物质量和安全提供科学保障。为此，盛瀚科研人员围绕“离子色谱在制药行业中的应用”进行了一系列实验测定，希望制药行业或行业外的工作人员对离子色谱的应用有更多参考和了解。·离子色谱在原料药及其相关制剂中的应用原料药，指用于生产各类制剂的原料，是制剂中的有效成份，由化学合成、植物提取或者生物技术所制备的各种用来作为药用的粉末、结晶、浸膏等。原料只有加工成药物制剂，才能成为供临床使用的药物，因此原料药质量好坏决定制剂质量的好坏。世界各国对于其广泛应用的原料药及其相关制剂都制定了严格的国家药典标准和质量控制方法，以加强药物中有毒成分的控制，加强对药物杂质的定性定量研究，进一步完善药物与有效性相关的质量控制要求。1. 厄贝沙坦中叠氮化物的测定厄贝沙坦是一种血管紧张素II受体拮抗剂，临床用于治疗原发性高血压，合并高血压的2型糖尿病肾病的治疗。叠氮化物是厄贝沙坦合成工艺最后一步中使用的物料，使用量较大，在精制过程中可能无法完全除去而残留。研究表明，叠氮化物会损害生物的细胞，阻碍生物的新陈代谢。因此，在药物生产过程中，必须严格控制产品和中间体中叠氮化物的含量。l 分析柱：Ion Pac AG18+AS18l 预处理柱：NG1l 富集柱：TAC-ULP1   l 流动相：KOH溶液梯度淋洗（EG）0-15 min，9 mM KOH；15-22 min，9-40 mM KOH； 22-30 min，9 mM KOH。l 流速：1.0 mL/minl 柱温：30℃  l 抑制器：SHY-A-6l 进样体积：200 μLl 前处理：阀切换在线基体消除法图1 厄贝沙坦中叠氮化物的谱图2. 甲硝唑注射液中亚硝酸根离子的测定甲硝唑氯化钠注射液是一种用来治疗厌氧菌感染的制剂，几乎无色透明。其中有效成分是甲硝唑，辅料为氯化钠和注射用水。甲硝唑为硝基咪唑衍生物，其在灭菌后容易出现降解产物—亚硝酸盐，亚硝酸盐能使血液中正常携氧低铁血红蛋白氧化成高铁血红蛋白，使其失去携氧能力而引起组织缺氧。如果人体在短时间内摄入过多的亚硝酸盐，就可能引起中毒，严重的情况下，还可能导致细胞癌变，因此需要对甲硝唑氯化钠注射液中亚硝酸盐的含量进行测定。l 分析柱：IonPac AS18            l 流动相：KOH梯度洗脱0-20 min，5 mM KOH；20.1-35 min，25 mM KOH； 35.1-40 min，5 mM KOH。l 流速：1.0 mL/min l 柱温：30℃                     l 抑制器：SHY-A-6l 进样体积：25 μLl 前处理：系统适用性溶液：准确称取0.9148 g氯化钠于100 mL容量瓶中，高纯水溶解，加入1 mL对照品储备溶液，高纯水定容至刻度，摇匀得系统适用性溶液，进样分析。对照品溶液：准确称取0.6030 g亚硝酸钠于100 mL容量瓶中，高纯水溶解，定容至刻度摇匀，为对照品储备溶液。取1 mL上述储备溶液到100 mL容量瓶中，高纯水稀释至刻度，摇匀得对照品溶液，进样分析。供试品溶液：取甲硝唑氯化钠注射液直接进样分析。图1 系统适用性谱图图2 对照品谱图图3 供试品谱图3. 氯化钠注射液中钠离子的测定氯化钠注射液是一种电解质补充药物，同时也是静脉给药的载体，用于溶解稀释药物。钠和氯是机体重要的电解质，主要存在于细胞外液，对维持正常的血液和细胞外液的容量和渗透压起着非常重要的作用。正常血清钠浓度为135～145 mmol/L，占血浆阳离子的92%，总渗透压的90%，故血浆钠量对渗透压起着决定性作用。因此需严格管控氯化钠注射液中钠离子的含量，以维持人体正常的渗透压。l 分析柱：Ion Pac CG12A+CS12Al 流动相：25 mM 甲烷磺酸l 流速：1.0 mL/minl 柱温：35℃  l 抑制器：SHY-C-5l 进样体积：25 μLl 前处理：对照组溶液：准确称取氯化钠固体18.0 mg，用水溶解定容至250 mL，摇匀后进样分析；检查对照组溶液：准确称取氯化钠固体18.0 mg，用水溶解定容至250 mL，摇匀后进样分析；供试品溶液：精确移取注射液0.8 mL，用水稀释至100 mL，摇匀后进样分析。图1 对照品中钠离子谱图图2 检查对照品中钠离子谱图图3 供试品氯化钠注射液中钠离子谱图图4 供试品乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液中钠离子谱图