标准品中萘和苯并芘的含量检测方案(液相色谱仪)

赛默飞是科学服务领域的世界领导者 实验背景 测试人：崔宇 赛默飞世尔科技(中国)应用中心 我们的使命：携手客户，让世界更健康，更清洁，更安全 赛默飞为您提供最完整的超快速液相技术支持 实验目的 考察仪器对于多环芳烃测定的适用性 目前客户所生产的萘和苯并芘的标准溶液暂无测定方法，主要考察Utimate 3000 系统的DAD和FLD可否准确测定其标液中萘和苯并芘的含量，并考察线性和重复性指标。 样品信息 样品名称：标准品：甲醇中苯并芘(批号：A2003305，浓度：100ug/ml，相对扩展不确定度：3%)、甲醇中萘(批号：A2008039，浓度： 100ug/ml)；样品：。甲醇中苯并芘、萘(1-10ppm) 样品性状：透明液体 样品来源：标准品：购于坛墨质检-标准物质中心；样品：：客户提供 送样时间：2020.12.03 分析时间：2020.12.03-2020.12.04(2天) 样品前处理方法：法和苯并和标准品溶液分别用乙腈：水(6：4)稀释至1.0、0.5、0.1、0.05、0.01ug/ml浓度，得到系列标准工作溶液；样品用乙腈：水(6：4)稀释10倍，直接进井。 仪器和试剂 仪器配置 Dionex Ultimate 3000系列 泵： HPG-3400RS Pump (S/N：8082129) 自动进样器：WPS-3000RS (S/N：：08075877) 柱温箱：TCC-3000RS (S/N：08063108) 检测器：VWD3100 (SN：8082451) 检测器： FLD 3400RS (SN：8082235) 变色龙色谱管理软件 Chromeleon CDS 7.3 试剂来源 乙腈： Fisher Chemical， HPLC级，196951；水：Fisher 超纯水仪 方法信息 分析柱：： Hypersil Green PAH 150*4.6mm， 3um， P/N：31103-154630：)；SS/N：10394561 柱温：30°C： 紫外检测器：波长：：2219nm， 6min时，切换波长为295nm；采样频率：10Hz 荧光检测器：激发波长：：275nm，发射波长：：350nm， 灵敏度：4，10min时，切换激发波长：290nm，发射波长：i：4430nm，，灵敏度：2；采样频率：5Hz 流动相：A：1：乙腈；：B：：水，梯度洗脱见右表 进样量：5uL 流 速：1.5mL/min Time，min A，% B，% 0 60 40 1 60 40 6 70 30 8 100 0 12 100 0 12.5 60 40 17 60 40 n.a. 2 萘 3.550 0.893 15.256 74.24 1.13 0.3418 3 苯并芘 10.545 0.483 7.668 n.a. 1.11 0.7160 样品色谱图及结果 如左图所示，空白溶剂中不存在对目标峰定量产生干扰的物质，样品中的萘和苯并芘峰形和分离度均良好。通过外标法定量，换算后，客户提供样品中萘的浓度为3.418ug/ml，，样品中苯并芘的浓度为7.16ug/ml。 注：实验DEMO用途，未做方法学考察，本次结果仅供参考 No. Selected Peak： min mAU*min No. Selected Peak： min mAU*min UV_VIS_ UV_VIS_1 UV_VIS_1 UV_VIS_1 萘 萘 ： 苯并 苯并芘 20 钢饼样品-1/10 Unknown 3.548 0.8929 20 钢研样品-1/10 Unknown 10.533 0.4831 21 钢研样品-1/10 Unknown 3.548 0.8948 21 钢研样品-1/10 Unknown 10.538 0.4838 22 钢研样品-1/10 Unknown 3.550 0.8933 22 钢研样品-1/10 Unknown 10.545 0.4830 23钢研样品-1/10 Unknown 3.552 0.8903 23 钢研样品-1/10 Unknown 10.545 0.4804 24钢研样品-1/10 Unknown 3.552 0.8960 24 钢研样品-1/10 Unknown 10.543 0.4846 25钢研样品-1/10 Unknown 3.552 0.8972 25 钢研样品-1/10 Unknown 10.545 0.4847 Maximum 3.552 0.8972 Maximum 10.545 0.4847 Average 3.550 0.8941 Average 10.542 0.4832 Minimum 3.548 0.8903 Minimum 10.533 0.4804 StandardDeviation 0002 00024 Standard Deviation 0005 00016 Relative Standard Deviation 0.05% 0.27% Relative Standard Deviation 0.05% 0.33% 样品重复性结果(连续进样6针) 样品连续进样6针，萘的保留时间RSD值为0.05%，峰面积RSD值为0.27%；苯并芘的保留时间RSD值为0.05%，峰面积RSD值为0.33%，表明在此方法条件下仪器的稳定性良好，重现性可满足要求。 萘标准溶液，得到其标准曲线，相关系数大于0.99。 苯并芘 苯并芘标准曲线图 化合物 相关系数 标准曲线 苯并芘 0.99787 Y=0.6798X-0.0037 分别测定1.0、0.5、0.1、0.05、0.01ug/ml浓度下的苯并芘标准溶液，得到其标准曲线，，相关系数大于0.99。 苯并芘 10.603 1870098.377 25353915.439 n.a. 1.09 0.7191 样品色谱图及结果 如左图所示，空白溶剂中不存在对目标峰定量产生干扰的物质，样品中的萘和苯并芘峰形和分离度均良好。 通过外标法定量，换算后，客户提供样品中萘的浓度为3.438ug/ml，样品中苯并芘的浓度为7.191ug/ml。 ( 注：实验DEMO用途，未做方法学考察，本次结果仅供参考 ) r撇 Inj.Injection Name Type Ret.TimeNo.Selected Peak： min Emission_1 萘 Area counts*min Emission_1 萘 Inj. Injection Name Type Ret.Time No. Selected Peak： minEmission_1 苯并芘 Area counts*min Emission_1 苯并芘 20 钢研样品-1/10 Unknown 3.607 528289.257 20 钢研样品-1/10 Unknown 10.590 1864851.690 21 钢研样品-1/10 Unknown 3.60722钢研样品-1/10 Unknown 3.61023钢研样品-1/10 Unknown 3.610 24 钢研样品-1/10 Unknown 3.610 25钢研样品-1/10 Unknown 3.610 528463.757 527876.070527348.353529190.190 530064.070 21 Unknown 10.593 钢研样品-1/1022 钢研样品-1/10 Unknown 10.603 23 钢研样品-1/10 Unknown 10.603 24 钢研样品-1/10 Unknown 10.600 25 钢研开品-1/10 Unknown 10.603 1870614.320 1870098.377 1862144.538 1869749.3301875856.050 Maximum 3.610 Average 3.609 Minimum 3.607 530064.0700 528538.6161 527348.3533 Maximum 10.603 1875856.05001868885.7175 1862144.5383 Average Minimum 10.59910.590 Standard Deviation 0.002 Relative Standard Deviation 0.05% 966.9576 Standard Deviation 0.006 Relative Standard Deviation 0.06% 4806.3884 0.18% 0.26% 样品重复性结果(连续进样6针) 样品连续进样6针，萘的保留时间RSD值为0.05%，峰面积RSD值为0.18%；苯并芘的保留时间RSD值为0.06%，峰面积RSD值为0.26%，表明在此方法条件下仪器的稳定性良好，重现性可满足要求。 co2 1.200 苯并芘 3000000 苯并芘标准曲线图 化合物 相关系数 标准曲线 苯并芘 0.99797 Y=2625280.4018X-21171.3516 分别测定1.0、0.5、0.1、0.05、0.01ug/ml浓度下的苯并芘标准溶液，得到其标准曲线，相关系数大于0.99。 可行性分析 1.基于上述实验结果，紫外和荧光检测器均可准确测定客户样品中萘和苯并芘的含量，两者结果具有一致性可满足客户测定的需求。 2.紫外和荧光检测器的线性和重复性结果良好，说明赛默飞Ultimate 3000系列液相色谱性能良好，可为客户样品检测结果的准确性提供有力的保障。 3.本次实验的配置与实验条件可根据客户实际需求灵活调整，实验结果供客户参考使用。 The world leader in serving scienceProprietary & Confidential ThermoFisherSCIENTIFICProprietary & Confidential 1. 基于上述实验结果，紫外和荧光检测器均可准确测定客户样品中萘和苯并芘的含量，两者结果具有一致性可满足客户测定的需求。2. 紫外和荧光检测器的线性和重复性结果良好，说明赛默飞Ultimate 3000 系列液相色谱性能良好，可为客户样品检测结果的准确性提供有力的保障。3. 本次实验的配置与实验条件可根据客户实际需求灵活调整，实验结果供客户参考使用。