本文展示了应用MALDImini-1 紧凑型基质辅助激光解吸电离数字离子阱质谱(MALDI-DIT)对低浓度牛血清白蛋白(BSA)(上样量100 fmol)进行分子量检测的案例,表明MALDImini-1检测蛋白质分子量的灵敏度较高,结果准确,可以满足m/z 650-70000以内蛋白质分子量检测的要求。
SSL-CA20-394Excellence in Science Excellence in ScienceMALDI-021岛津企业管理(中国)有限公司-分析中心Shimadzu (China) Co., LTD. -Analytical Applications CenterTel:86(21)34193996Email: sshzyan@shimadzu.com.cnhttp://www.shimadzu.com.cn 使用 MALDImini-1紧凑型 MALDI 数字离子阱质谱仪高灵敏检测牛血清白蛋白的分子量 MALDI-021 摘要:本文展示了应用 MALDImini-1紧凑型基质辅助激光解吸电离数字离子阱质谱((MALDI-DIT)对低浓度牛血清白蛋白 (BSA) I(上样量100 fmol) 进行分子量检测的案例,表明 MALDImini-1检测蛋白质分子量的灵敏度较高,结果准确,可以满足 m/z 650-70000以内蛋白质分子量检测的要求。 关键词:数字离子阱质谱 MALDImini-1分子量检测 牛血清白蛋白 基质辅助激光解吸电离(MALDI)是一种适用于生物大分子质谱分析的软电离方法,岛津的田中耕一先生由于对该技术的发明贡献于2002年被授予诺贝尔化学奖。MALDI 离子源与飞行时间质谱(TOF)技术联用,即 MALDI-TOF 质谱,被广泛应用于生物大分子的分子量检测。相对于传统体型较大的 MALDI-TOF质谱,岛津又开发了整合 MALDI 离子源和数字离子阱(DIT)(岛津原创技术)的紧凑型 MALDI-DIT质谱仪——MALDImini-1,该质谱仪小巧轻便,操作简单,仅需微量样品和极短的抽真空时间,即可快速实现 m/z 650-70000 Da 内的多肽/蛋白质样品的高灵敏分子量检测 分析。为了对 MALDImini-1检测蛋白质的性能进行验证,考虑到市场上主流的 MALDI-TOF 质谱产品蛋白质检测灵敏度参数为100-500 fmol BSA(牛血清白蛋白),本文以 100 fmol BSA 为例,应用 MALDImini-1紧凑型MALDI-DIT 质谱仪对样品进行了分子量检测考察,结果显示质谱信号清晰可见、信噪比良好,检测到的分子量与理论值相符,表明 MALDImini-1检测蛋白质分子量的灵敏度较高,分子量准确,与传统 MALDI-TOF相比毫不逊色,可以满足 m/z 650-70000 以内蛋白质分子量检测的要求。 实验部分 1.1仪器 MALDImini-1紧凑型 MALDI数字离子阱质谱仪 图1岛津 MALDImini-1质谱仪 1.2仪器参数 调谐模式:线性正离子模式 激光器:349nm 固态激光器 扫描范围:m/z 10000-70000 激光能量:60 1.3样品前处理 取5 pmol/uL 的 BSA 样品原液加入含有0.1%三氟乙酸的乙腈水溶液(乙乙:水=30:70)稀释50倍,配置为 100 fmol/uL的样品工作液。取1uL样品工作液和1uL芥子酸基质(SA, 浓度为20 mg/mL) 点靶,自然干燥后将靶板放入质谱进行分析。 结果与讨论 100 fmol(上样量)牛血清白蛋白的一级质谱检测结果如图2所示。从结果来看,样品质谱信号清晰可见,检测到单电荷(约 m/z 66400))、二电荷(约m/z33200)和三电荷(约m/z 22100)的信号峰,与理论值m/z66430(单电荷)、m/z33215)((二电荷)、m/z22144(三电荷)i)一致。 图2100 fmol BSA 的一级质谱图 结论 本文应用紧凑型 MALDI 数字离子阱质谱仪 MALDImini-1检测 100 fmol 牛血清白蛋白的分子量,质谱图信噪比良好,检测结果与理论值相符。MALDImini-1作为紧凑型基质辅助激光解吸电离数字离子阱质谱仪,体积小巧、功能强大、性能卓越,是进行蛋白质分子量检测的有力工具。 岛津应用云 基质辅助激光解吸电离(MALDI)是一种适用于生物大分子质谱分析的软电离方法,岛津的田中耕一先生由于对该技术的发明贡献于2002年被授予诺贝尔化学奖。MALDI离子源与飞行时间质谱(TOF)技术联用,即MALDI-TOF质谱,被广泛应用于生物大分子的分子量检测。相对于传统体型较大的MALDI-TOF质谱,岛津又开发了整合MALDI离子源和数字离子阱(DIT)(岛津原创技术)的紧凑型MALDI-DIT质谱仪——MALDImini-1,该质谱仪小巧轻便,操作简单,仅需微量样品和极短的抽真空时间,即可快速实现m/z 650-70000 Da内的多肽/蛋白质样品的高灵敏分子量检测分析。为了对MALDImini-1检测蛋白质的性能进行验证,考虑到市场上主流的MALDI-TOF质谱产品蛋白质检测灵敏度参数为100-500 fmol BSA(牛血清白蛋白),本文以100 fmol BSA为例,应用MALDImini-1 紧凑型MALDI-DIT质谱仪对样品进行了分子量检测考察,结果显示质谱信号清晰可见、信噪比良好,检测到的分子量与理论值相符,表明MALDImini-1检测蛋白质分子量的灵敏度较高,分子量准确,与传统MALDI-TOF相比毫不逊色,可以满足m/z 650-70000以内蛋白质分子量检测的要求。
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岛津企业管理(中国)有限公司为您提供《牛血清白蛋白中分子量检测方案(生物质谱)》,该方案主要用于其他中分子量检测,参考标准--,《牛血清白蛋白中分子量检测方案(生物质谱)》用到的仪器有基质辅助激光解吸/电离数字离子阱质谱仪