果冻中邻苯二甲酸酯检测方案(液质联用仪)

LCMS 测定果冻中邻苯二甲酸酯含量 1实验部分 1.1.适用范围 本方法适用于果冻中的五种邻苯二甲酸酯类增塑剂含量测定。 1.2.方法原理 样品用适量乙腈， NaCl 和 MgSO4处理后离心取上清，再用 PSA 萃取后离心取上清，采用 LC-MS/MS 进行分析测定。 1.3仪器和设备 1.3.1仪器：：：岛津LCMS-2020 液质联用仪 1.3.2甲醇 (HPLC级) 1.3.3乙腈(HPLC级) 1.3.4一一水 (ISO3696) 1.3.5氯化钠(分析纯) 1.3.6硫酸镁(分析纯) 1.3.7.标准物质：邻苯二甲酸二甲酯(DMP)、邻苯二甲酸二乙酯(DEP)、邻苯二甲酸二戊酯(DPP)、邻苯二甲酸丁基基苄酯(BBP)、邻苯二甲酸二环己酯(DCHP)。 1.4样品制备 准确称取果冻10g，加入10mL乙腈， 涡旋 1min， 再加入 NaCl 1g 和 MgSO44g， 涡旋1min， 离心 5min，取 2mL上清，加入 PAS 25mg 和MgSO4200mg，涡旋 1min， 离心5min， 取上清进 LC-MS/MS 分析。 1.5分析条件 柱子 Shim-pack XR-ODS ⅡI 75 mmL.*2.0 mmI.D.， 2.2 um 流动相 甲醇/水 程序 0-4 min (50%-80%B)， 4.01-10 min (80%-90%B)， 10.01min(50%B)， 15 min Stop 流速 0.4 mL/min 进样量 4uL 柱温 40℃ 离子源 ESI 采集模式 正离子模式 CDL 温度 250°C Heat Block 温 度 400°C 雾化器流速 1.5 L/min 干燥气流速 10 L/min 离子源电压 +4.5 kV 检测器电压 1.2kV 2实验结果 2.1标准溶液色谱图 100 ng/mL 混标进样后图谱，如图1所示。 图1混标溶液色谱图 (100 ng/mL 混标)1： DMP；2： DEP；3： DPP； 4： BBP； 5： DCHP 2.2标准曲线 以10、50、100、150、200和250 ng/mL 混标制作校准曲线，五种目标组分的标准曲线信息见表1，相关系数达 0.9976 以上。 表1.五种PAEs 的线性方程 组分 方程 R DMP Y=10598X-17248 0.9991 DEP Y=19821X+60632 0.9991 DPP Y=25501X+154519 0.9989 BBP Y=45199X+573212 0.9989 DcHP Y=43526X+467085 0.9976 以 DMP 为例，其工作曲线见图2。 Area conc. 图2DMP的校准曲线 2.3检出限 五种 PAEs 的 LOD 和LOQ范围分别在 0.09-3.68 ng/mL 和 0.28-11.25ng/mL， 见表2。 表2.五种PAEs 的检出限 组分 LOD (ng/mL) LOQ (ng/mL) DMP 3.68 11.15 DEP 0.43 1.30 DPP 0.39 1.17 BBP 0.24 0.72 DcHP 0.09 0.28 2.4精密度试验 取实际样品，以 0.05 mg/kg 加标浓度连续测定5次，以 DMP 为例考察方法的精密度。其保留时间和峰面积重现性见表3。保留时间重现性为0.1%，峰面积重现性小于1%。 表3.DMP的重现性数据(n=5) No. RT (min) Area 1 3.086 82743 2 3.084 83447 3 3.090 82879 4 3.081 82148 5 3.081 82148 Average 3.085 82673 RSD% 0.10 0.66 2.5回收率实验 按照上述方法处理市售的某品牌的果冻，空白及加标色谱图见图4. 图4.市售某果冻的空白(A)及0.05 mg/kg 加标色谱图(B) 选取0.01，0.03和0.05 mg/kg三个加标浓度考察实际样品回收率，见表4。回收率在83.5%-95.8%之间，相对标准偏差在1.2%-7.6%之间。 表4.五种PAEs 的加标回收率及精密度 分析物 0.01mg/kg 0.03 mg/kg 0.05 mg/kg 回收率(%) RSDs(%) 回收率(%) RSDs(%) 回收率(%) RSDs(%) DMP 83.5 2.0 86.7 1.4 87.1 1.2 DEP 87.8 5.0 91.0 3.0 94.6 2.6 DPP 86.1 5.9 91.6 5.2 95.0 3.8 BBP 96.8 7.6 84.3 6.4 91.7 2.9 DCHP 103.9 3.2 95.8 3.4 95.2 1.5 2.6实际样品分析 超市随机购买五份果冻样品，五份样品均检出BBP，三份检出 DEP， 检测结果见表5。欧盟指令2007/19/EC 中规定牛奶中 BBP最大残留限量值(MRL)为 30 mg/kg， 对 DEP 没有规定。果冻样品中测出的 DEP和BBP没有超过欧盟限量。 表5.五份市售果冻的检测结果(mg/kg) No. DMP DEP DPP BBP DCHP 1 - 1.2 - 14.2 - 2 - - - 11.5 - 3 - 0.58 - 14.7 - 4 - - - 2.9 - 5 - 0.49 - 10.9 - 3结论 1.本文建立了分散固相萃取液相色谱质谱(LC-MS/MS) 联用测定果冻中五种邻苯二甲酸酯类增塑剂的方法。 2.五种目标组分线性范围 10-250 ng/mL， 线性相关系数达 0.9976 以上， LOD 和 LOQ范围分别在0.09-3.68ng/mL 和 0.28-11.25 ng/mL。选取 0.01，0.03和 0.05 mg/kg 三个浓度考察实际样品回收率，回收率在83.5%-95.8%之间，相对标准偏差在1.2%-7.6%之间。 本方法适用于果冻中的五种邻苯二甲酸酯类增塑剂含量测定。样品用适量乙腈，NaCl 和 MgSO4 处理后离心取上清，再用 PSA 萃取后离心取上清，采用 LC-MS 进行分析测定。仪器采用岛津 LCMS-2020 液质联用仪或其他同等性能的仪器。五种目标组分线性范围 10-250 ng/mL，线性相关系数达 0.9976 以上，LOD 和 LOQ 范围分别在 0.09-3.68 ng/mL 和 0.28-11.25 ng/mL。选取 0.01，0.03 和 0.05 mg/kg 三个浓度考察实际样品回收率，回收率在83.5%-95.8%之间，相对标准偏差在 1.2%-7.6%之间。