膳食纤维又称为植物细胞壁,它包括纤维素、半纤维素、木质素、果胶、角质和二氧化硅等。本实验用中性洗涤纤维测定法测定,该法所测的膳食纤维为不被人消化系统中的酶所消化,也不被中性洗涤剂溶解的组分。其原理是样品经热的中性洗涤剂浸煮后,残渣用热的蒸馏水充分洗涤,除去样品中游离淀粉、蛋白质、矿物质,然后加入α淀粉酶溶液以水解结合态的淀粉,再用蒸馏水,丙酮依次洗涤,以除去残存的脂肪、色素等,残渣经烘干,即为不溶性膳食纤维。
来亨科学仪器Laiheng Lab-Equipment 膳食纤维的测定标准方法 一、实验原理 膳食纤维又称为植物细胞壁,它包括纤维素、半纤维素、木质素、果胶、角质和二氧化硅等。本实验用中性洗涤纤维测定法测定,该法所测的膳食纤维为不被人消化系统中的酶所消化,也不被中性洗涤剂溶解的组分。其原理是样品经热的中性洗涤剂浸煮后,残渣用热的蒸馏水充分洗涤,除去样品中游离淀粉、蛋白质、矿物质,然后加入a淀粉酶溶液以水解结合态的淀粉,再用蒸馏水,丙酮依次洗涤,以除去残存的脂肪、色素等,残渣经烘干,即为不溶性膳食纤维。 二、实验用品 (一)器材 (1)电热恒温干燥箱。 (2)恒温箱。 (3)可调温的电炉或可控温的电热板。 (4)抽滤装置(包括抽滤瓶及水泵或真空泵)。 (5)干燥器(用无水氯化钙或变色硅胶为干燥剂)。 (6)高型烧杯(容量600ml)。 (7)埚式耐热玻璃滤器(容量为60ml,孔径 40~60um;相当于250目~400目)。 (8)耐热玻璃棉。 北京来亨科贸有限责任公司 销售中心:北京丰台区丰北路甲45号鼎恒中心6A 技术中心:北京市通州区马驹桥景盛二街33号4号4层 (二)试剂 (1)石油醚(沸点范围35~60℃)。 (2)中性洗涤剂溶液 ①18.61g乙二胺四乙酸二钠和6.81g四硼酸钠(Na2B4O710H2O)用250ml蒸馏水加热溶解; ②30g十二烷基硫酸钠和10ml 乙二醇独乙醚(2-ethoxy-ethanol)溶于 200ml热蒸馏水中; ③4.56g Na2HPO4溶于 150ml蒸馏水,将①②和③3种溶液合并。然后用磷酸调节混合液 pH至6.9~7.1,最后加蒸馏水至1000ml,即为中性洗涤溶液。此溶液使用期间如有沉淀生成,需在使用前加热到60℃,使沉淀溶解。 (3)十氢萘。 (4)a淀粉酶溶液:取0.1mol/LNa2HPO4溶液610ml 和 0.1mol/L Na2HPO4溶液 390ml混匀,配成 pH7.0的磷酸盐缓冲液。用此缓冲溶液配2.5%酶溶液,离心或过滤,取清液备用。 (5)丙酮。 (6)无水亚硫酸钠。 (三)材料 小麦麸皮。 三、实验程序 1、样品处理 将烘干样品磨细过20~30筛。准确称取0.500~1.000g 置于高型烧杯中。 2.加试剂 依次加入以下试剂于高型烧杯中: ①中性洗涤剂溶液100ml(室温) ②十氢萘2ml(样品煮沸时如产生的泡沫不多,则可不加此试剂)。 ③无水亚硫酸钠0.5g。 3.热处理 将上述烧杯置于电炉上加热,使杯内溶液在5~10min内煮沸,自沸腾计时,维持微沸 60min。北京来亨科贸有限责任公司 销售中心:北京丰台区丰北路甲45号鼎恒中心6A 技术中心:北京市通州区马驹桥景盛二街33号4号4层 4.洗涤 将烧杯内的内容物移入已称重之耐热玻璃滤器(内铺有耐热玻璃棉,并已于110℃烤箱烘至恒重)内,抽滤至干,再加入热蒸馏水(100℃)约100ml洗残渣,重复洗3次(用热蒸馏水量约为300~500ml)。 5.酶处理 加酶溶液约 50ml于滤器中(器器底部须加塞子,使之不漏溶液),使酶液浸没残渣,并加数滴甲苯以防腐,然后于恒温箱37℃放置18h或过夜。 6.洗涤 取出滤器,除去底部的塞子,抽滤,并用热水约500ml分次洗去酶液。用碘液检查是否有淀粉残留,如淀粉已除尽,则可抽干滤液,然后加丙酮洗残渣,抽干,再以丙酮洗一次。若有淀粉残留,需重复“酶处理”步骤。 7.将残渣及滤器于烘箱中110℃烘至恒重,每次称重时应先移入干燥器中,冷至室温后称量。 8.结果处理 按下式计算样品中膳食纤维含量: 北京来亨科贸有限责任公司 销售中心:北京丰台区丰北路甲45号鼎恒中心6A 技术中心:北京市通州区马驹桥景盛二街33号4号4层 膳食纤维的测定-标准方法一、实验原理 膳食纤维又称为植物细胞壁,它包括纤维素、半纤维素、木质素、果胶、角质和二氧化硅等。本实验用中性洗涤纤维测定法测定,该法所测的膳食纤维为不被人消化系统中的酶所消化,也不被中性洗涤剂溶解的组分。其原理是样品经热的中性洗涤剂浸煮后,残渣用热的蒸馏水充分洗涤,除去样品中游离淀粉、蛋白质、矿物质,然后加入α淀粉酶溶液以水解结合态的淀粉,再用蒸馏水,丙酮依次洗涤,以除去残存的脂肪、色素等,残渣经烘干,即为不溶性膳食纤维。二、实验用品(一)器材 (1)电热恒温干燥箱。 (2)恒温箱。 (3)可调温的电炉或可控温的电热板。 (4)抽滤装置(包括抽滤瓶及水泵或真空泵)。 (5)干燥器(用无水氯化钙或变色硅胶为干燥剂)。 (6)高型烧杯(容量600ml)。 (7)坩埚式耐热玻璃滤器(容量为60ml,孔径40~60μm;相当于250目~400目)。 (8)耐热玻璃棉。(二)试剂 (1)石油醚(沸点范围35~60℃)。 (2)中性洗涤剂溶液 ?18.61g乙二胺四乙酸二钠和6.81g四硼酸钠(Na2B4O7.10H2O)用250ml蒸馏水加热溶解; ?30g十二烷基硫酸钠和10ml乙二醇独乙醚(2-ethoxy-ethanol)溶于200ml热蒸馏水中; ?4.56g Na2HPO4溶于150ml蒸馏水,将??和?3种溶液合并。然后用磷酸调节混合液pH至 6.9~7.1,最后加蒸馏水至1000ml,即为中性洗涤溶液。此溶液使用期间如有沉淀生成,需在 使用前加热到60℃,使沉淀溶解。 (3)十氢萘。 (4)α淀粉酶溶液:取0.1mol/LNa2HPO4溶液610ml和0.1mol/L Na2HPO4溶液390ml混匀,配 成pH7.0的磷酸盐缓冲液。用此缓冲溶液配2.5%酶溶液,离心或过滤,取清液备用。(5)丙酮。 (6)无水亚硫酸钠。
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