土壤中对羟基苯甲酸检测方案(快速溶剂萃取)

ThermoFisherSGIENTIFISThe world leader in serving science 样品分析报告：2012-APP-GC-013ASE-HPLC测定土壤中的酚酸类物质 检测项目 酚酸类化合物 样品基体 土壤 仪器型号及配置 ASE350 Ultimate 3000 HPLC DGP-3600 WPS-3000TSL TCC-3000 DAD-3000 色谱柱类型尺 寸、S/N号及柱温 Acclaim 120 C18 (3 um， 150 mm×3mm， PN： 063691，SN： 001023)， 30℃ 检测器类型、 工作参数及S/N号 UV检测： DAD-3000 (PN：50820010， SN：8025505) 流通池体积：2.5uL 检测波长：280nm 淋洗液组成及流速 流速：0.5mL/min 流动相：：AA： 乙青 B：水(乙酸调pH至2.8) Time(min) A% B% -5.0 5 95 0 5 9520 35 6525 35 65 30 90 10 35 90 10 进样方式及进样体积 自动进样，5uL 一·、样品前处理 准确称取30g样品(精确到0.01g)，加入适量的硅藻土，于烧杯中混合均与。在66mL萃取池底部垫上1片纤维素膜，将混合均匀的样品样入萃取池中，按 ASE 条件萃取(表1)萃取完成后，在萃取瓶中加入适量的无水硫酸钠，有机相采用旋转蒸发仪浓缩至干，加入1mL甲醇复溶，过0.45 um 有机相滤膜，待 HPLC 分析。 溶剂 二氯甲烷 温度 80℃ 加热时间 5 min 静态萃取时间 5 min 循环次数 2 吹扫体积 60% 吹扫时间 200 s 总萃取时间 20 min 总容积消耗 110 mL 二、测定谱图 图2样品和标准溶液叠加色谱图 三、实验结果： (1)方法的线性、检出限 配置混合标准溶液：取适量各标准品储备液，用甲醇稀释至40 ug/mL， 后采用流动相 配置成0.5、1、2、4、8和16 ug/mL的工作溶液，采用HPLC分析，结果见表1. 表1保留时间、RSD、线性和检出限 No. Peak Name RT min Cal.Type Points Coeff.Det. % Offset Slope LOD ug/mL 1 没食子酸 3.217 LOff 6 99.85 -0.0574 0.5488 0.027 2 对羟基苯 甲酸 8.407 LOff 6 99.99 0.0642 0.5721 0.037 3 儿茶素 8.534 LOff 6 99.50 -0.0089 0.0498 0.213 4 咖啡酸 9.874 LOff 6 99.99 0.0132 0.7774 0.016 5 丁香酸 10.247 LOff 6 99.99 0.1472 1.6031 0.010 6 香草醛 12.314 LOff 6 99.99 0.134 1.4141 0.014 7 阿魏酸 13.870 LOff 6 99.99 0.0476 0.5949 0.033 8 苯甲酸 16.077 LOff 6 99.98 0.0113 0.1546 0.154 9 水杨酸 16.347 LOff 6 99.98 0.0082 0.1473 0.191 10 根皮苷 17.237 LOff 6 99.99 0.0597 0.7723 0.022 11 槲皮素 20.497 LOff 6 99.70 -0.014 0.0671 0.345 12 肉桂酸 21.480 LOff 6 99.99 0.3605 4.5178 0.006 13 根皮素 23.204 LOff 6 99.99 0.0562 1.1698 0.019 (2)重复性试验 1 std-1ppm . 60.0 40.0- 20.0- 0.0- -30.0- 0.0 30.0 1 15.0 0.0 2 1 -10.0- -20.0- min 0.0 5.0 10.0 15.0 20.0 25.0 30.0 图3样品平行行验(n=3) (3)样品测定 对样品进行 ASE 萃取，浓缩后直接进样，实验数据见表2。 表2实际样品测定结果(单位： ug/g) 没食 对羟 儿茶 咖啡 丁香 香草 阿魏 苯甲 水杨 根皮 槲皮 肉桂 根皮 子酸 基苯 素 酸 酸 醛 酸 酸 酸 苷 素 酸 素 甲酸 1A-1 LOD LOD 0.045 LOD LOD 0.005 LOD 0.008 LOD LOD LOD LOD LOD 4A LOD LOD 0.054 LOD LOD LOD LOD 0.006 LOD LOD LOD LOD LOD 7A LOD LOD 0.150 LOD LOD LOD LOD 0.016 0.012 0.002 LOD LOD LOD 10A LOD LOD LOD LOD LOD 0.009 LOD LOD LOD 0.001 LOD LOD 0.001 13A LOD LOD LOD LOD LOD 0.001 LOD LOD LOD LOD LOD LOD LOD 16A LOD LOD 0.111 LOD LOD 0.009 LOD 0.015 LOD LOD LOD LOD LOD 19A LOD LOD LOD LOD LOD LOD LOD LOD LOD LOD LOD LOD LOD 22A LOD LOD 0.231 LOD LOD 0.007 LOD LOD LOD LOD LOD LOD LOD 25A LOD LOD 0.171 0.011 LOD LOD LOD LOD LOD LOD LOD LOD LOD 28A LOD LOD 0.181 0.012 LOD 0.002 LOD LOD LOD LOD LOD LOD LOD 31A LOD LOD 6.362 LOD LOD 0.005 LOD 0.006 LOD LOD LOD LOD LOD 34A LOD LOD 4.784 LOD LOD 0.004 LOD 0.021 LOD 0.004 LOD LOD LOD 1B LOD LOD 0.121 LOD LOD LOD LOD LOD LOD LOD LOD LOD LOD 4B LOD LOD 0.091 LOD LOD LOD LOD LOD LOD LOD LOD LOD LOD 7B LOD LOD 0.050 LOD LOD LOD LOD LOD LOD LOD LOD LOD LOD 10B LOD LOD 0.143 LOD LOD 0.002 LOD 0.006 LOD LOD LOD LOD 0.001 13B LOD LOD 0.024 LOD LOD LOD LOD LOD LOD LOD LOD LOD LOD 16B LOD LOD 0.092 0.019 LOD 0.006 LOD 0.008 LOD 0.006 LOD LOD LOD 19B LOD LOD LOD：低于检出限 四、可行性建议 采用 ASE-HPLC 法分析检测土壤样品中的酚酸类化合物，简化了繁琐的样品前处理过程，提高了自动化程度，具有操作简单、快速，检测灵敏度高等优点。