土壤中四溴双酚 A检测方案(液相色谱仪)

编号： RLC-SH-20100915 采用快速溶剂萃取-超快速液质联用法分析土壤中的四溴双酚A 检测项目 四溴双酚A 仪器设备 UltiMate3000 RSLC： HPG-3000RS WPS-3000RS TCC-3000RS DAD-3000RS MS： Bruker HCT Esquire ESI源 ASE： 350： Cell size：34mL 化合物结构式 BrHO .OHBr -Br 分子量 543.91 方法开发 刘绿叶 最终审核 叶明立 四溴双酚A(Tetrabromobispheno1 A，，TBBPA)是现阶段最主要的反应型阻燃剂，其总用量约占全球阻燃剂用量的1/3，年消耗量达120000多吨。它广泛应用于环氧树脂、聚酯树脂、酚醛树脂及ABS等树脂中，可使制品具有良好的阻燃性和自熄性。尽管它是反应型阻燃剂，但是在产品中仍然有大量的非聚合的TBBPA存在，并且有可能释放到外界，污染环境，19被动物或人体吸收。由于TBBPA与甲状腺荷尔蒙(thyroxin， T4)的结构相似，所以现阶段被认为是一种潜在的内分泌干扰物，对人体有害。 目前，四溴双酚A分析方法主要采用气相色谱-电子捕获检测器(GC-ECD)法、气相色谱-质谱(GC-MS)法， GC-ECD法的选择性差， GC-MS 具有较好的选择性，但检出限低，而且二者均需要繁琐的预处理以及样品的衍生化。本文采用超快速液相色谱-质谱串联(LC-MS-MS)进行了分析，样品不需要衍生化，同时有很好的选择性与较低的检出限。 1、 材料与方法 1.1标准品及试剂 四溴双酚A标准品(纯度>97%，美国 Sigama 公司)，甲醇(美国Merck 公司)，正已烷、二氯甲烷(美国Merck 公司)， Millipore 去离子水。 1.2主要仪器设备 超快速液相色谱仪(美国Dionex公司，型号 Ultimate3000 RSLC)， 质谱仪 (Bruker HCTEsquire， 电喷雾源离子阱质谱)，快速溶剂萃取仪(美国 Dionex 公司，型号ASE350)旋转蒸发仪(上海亚荣仪器有限公司，型号R210)。 1.3标准溶液配制及样品前处理 标准溶液配制：称取四溴双酚A适量，用甲醇稀释配制成不同浓度的标准工作溶液，4℃避光保存。最终工作溶液浓度为0.05、0.1、0.5、1.05.0ug/mL。 样品前处理：称取5.0g土壤样品，用ASE350萃取，提取后经0.45山m滤膜过滤，用旋转蒸发仪浓缩至3-5mL。过预先处理过的C18固相萃取柱(萃取柱的活化：依次用2mL二氯甲烷和2mL甲醇进行冲洗)，用6 mL甲醇进行洗脱，洗脱液用高纯氮气在28℃下浓缩，用甲醇定容至1 mL，过滤待进样。 1.4仪器条件 ASE 350：加热池温度：80℃；压力： 1500psi； 静态萃取时间：5min；冲洗体积：100%；吹扫时间：100s；静态循环次数：2；萃取池体积：34mL 液相色谱：色谱柱： Acclaim120A C18 2.2 um， 2.1×50mm(美国Dionex公司)；流动相：甲醇：去离子水(70：30，v/v)；流速0.40mL/min； 柱温40℃；进样体积1.0uL。质谱扫描模式：电喷雾负离子ESI(-)模式；i离子化温度320℃；雾化气压力25psi；；干燥气流速8L/min；i质谱扫描范围(m/z)250~650。 2、标准溶液分析 2.1 标准溶液定性分析 选择四溴双酚A准分子离子峰(M-H) 542.8做选择离子扫描，选择离子流图如图1所示，一级质谱图见图2，并同步提取542.8作为母离子进行二级质谱分析，谱图见图3. 图1四溴双酚A选择离子流图(m/z 542.8) 图2四溴双酚A(m/z 542.8)一级质谱图 图3四溴双酚A(m/z 542.8)二级质谱图 从图2可以看出， m/z=542.8为四溴双酚A准分子离子峰[M-H]，从图3二级质谱图中可以观察到m/z 540.41、448.16、290.85等碎片离子峰。其中m/z 540.41为失去2H产生的碎片离子， m/z 448.16是[M-Br-0H]碎片离子， m/z 290.85 为[M-C6HsBr20]碎片离子。选择m/z 540.41作为定量特征离子， m/z 540.41、448.16、290.85作为定性特征离子。 2.1 标准曲线与检出限 取所配制的系列标准溶液，按色谱质谱条件测定，以所得峰面积y与浓度x进行回归分析，结果表明：线性方程为Y=76468X-9958，相关系数r=0.9993，线性范围为0.05~50ug/mL，检出限为0.01 ug/mL。 2.3回收率与精密度实验 取3份空白土壤样品(每份5.0g)分别添加0.4ng/mL标准溶液各1mL，进行平行测定3次，测得相对标准偏差(RSD值)为6.8%，回收率为88.1%~107.2%。 3、样品的测定 3.1 样品定性分析 利用上述方法对取自上海某地区的土壤样品进行了分析，总离子流图如图4所示，定性分析见图5。 图4土壤样品总离子流图 图5土壤样品 MS/MS 特征离子图 3.2 样品定量分析结果 根据对该土壤样品的分析，样品中四溴双酚A含量约为 0.021ug/g(干重)。 4、结果讨论 通过采用超快速液相色谱与质谱联用分析土壤样品中四溴双酚A， 减少了样品衍生等繁琐的前处理过程，同时，提高了色谱分析速度，在6min 内能分析完一个样品。在前处理过程中，采用 ASE 代替索式抽提，大大节省了提取时间，减少了有机试剂的使用，节省了成本与开支。 通过采用超快速液相色谱与质谱联用分析土壤样品中四溴双酚 A，减少了样品衍生等繁琐的前处理过程，同时，提高了色谱分析速度，在 6min 内能分析完一个样品。在前处理过程中，采用 ASE 代替索式抽提，大大节省了提取时间，减少了有机试剂的使用，节省了成本与开支。