哺乳动物细胞中培养过程 &培养条件检测方案(培养箱)

；Shinetek 哺乳动物细胞培养过程&培养条件 哺乳动物细胞在培养过程中会经过组织提取，原代培养，传代培养等过程。传代培养会根据具体情况分为细胞株培养和细胞系培养。如下对各个过程进行简述： 原代培养：从动物机体取出组织后切碎，经过各种酶(常用胰蛋白酶)，螯合剂(常用EDTA)结合机械方法(吸液管反复吸吹)处理，分散成单细胞，置于合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖。一般把从动物有机体内取出细胞开始培养，到繁殖十代以内的细胞培养称为原代细胞培养。 将原代细胞分装到多个培养瓶中进行继代培养 经过原代细胞培养，细胞分裂繁殖，培养物逐渐增多长满培养空间，继而相互之间接触，发生接触抑制现象，生长速度逐渐减慢甚至停止。需要重新接种到新的培养瓶内进行传(继)代培养。 传(继)代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传(继)代培养。 细胞系：初代培养物开始第一次传代培养后的细胞，即称之为细胞系。如果细胞系的生存期有限，则称为有限细胞系。已获得无限繁殖能力，能持续生存的细胞系称为连续细胞系或无限细胞系。 细胞株：从一个经过生物学鉴定的细胞系，用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增值形成的细胞群，称为细胞株。再由原细胞株进一步分离培养出与原珠形状不同的细胞群，成为亚株 INFORSHTWIGGENS SOCOREX 北京桑翌实验仪器研究所 北京总部：北京市朝阳区酒仙桥东路1号院M8号楼C厅3层303室 不同哺乳动物细胞在各个阶段的培养，都需要有基础的培养条件，归纳如下： 1)无菌无毒的环境：对培养液和所有培养用具无菌处理；培养液中添加抗生素防止培养过程中污染；定期更换培养液以清除代谢产物，防止对培养细胞造成危害。 2)营养：液体合成培养基包含糖、氨基酸、促生长因子、水、无机盐、微量元素等；通常还需加入血浆、血清等天然成分 3)适宜的温度和pH：人和哺乳动物细胞最适宜温度大多为36±0.5℃。适宜的酸碱度为 pH 7.2-7.4。 4)气体环境：气体环境一般为"95%空气+5%CO2"混合气体。氧气是细胞代谢必须气体，CO2维持培养液pH. 德国 WIGGENS 二氧化碳培养箱，为细胞生长提供最佳环境，为您的细胞培养保驾护航。 INFORSHTWIGGENSSSOCOREX 北京桑翌实验仪器研究所 北京总部：北京市朝阳区酒仙桥东路1号院M8号楼C厅3层303室 Shinetek Instruments Research Institute 技术中心：北京东燕郊经济开泼区迎宾北路天山国际工业园45号 Shinetek Instruments Research Institute 技术中心：北京东燕郊经济开发区迎宾北路天山国际工业园Sales： +Service： +Fax： +www.shinetek.comlE-mail：info@shinetek.com 哺乳动物细胞在培养过程中会经过组织提取，原代培养，传代培养等过程。传代培养会根据具体情况分为细胞株培养和细胞系培养。如下对各个过程进行简述：原代培养：从动物机体取出组织后切碎，经过各种酶（常用胰蛋白酶），螯合剂（常用EDTA）结合机械方法（吸液管反复吸吹）处理，分散成单细胞，置于合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖。一般把从动物有机体内取出细胞开始培养，到繁殖十代以内的细胞培养称为原代细胞培养。经过原代细胞培养，细胞分裂繁殖，培养物逐渐增多长满培养空间，继而相互之间接触，发生接触抑制现象，生长速度逐渐减慢甚至停止。需要重新接种到新的培养瓶内进行传（继）代培养。传（继）代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传（继）代培养。细胞系：初代培养物开始第一次传代培养后的细胞，即称之为细胞系。如果细胞系的生存期有限，则称为有限细胞系。已获得无限繁殖能力，能持续生存的细胞系称为连续细胞系或无限细胞系。细胞株：从一个经过生物学鉴定的细胞系，用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增值形成的细胞群，称为细胞株。再由原细胞株进一步分离培养出与原珠形状不同的细胞群，成为亚株不同哺乳动物细胞在各个阶段的培养，都需要有基础的培养条件，归纳如下：1）无菌无毒的环境：对培养液和所有培养用具无菌处理；培养液中添加抗生素防止培养过程中污染；定期更换培养液以清除代谢产物，防止对培养细胞造成危害。2）营养：液体合成培养基包含糖、氨基酸、促生长因子、水、无机盐、微量元素等；通常还需加入血浆、血清等天然成分3）适宜的温度和pH：人和哺乳动物细胞最适宜温度大多为36±0.5℃。适宜的酸碱度为pH 7.2-7.4。4）气体环境：气体环境一般为“95% 空气+5% CO2”混合气体。氧气是细胞代谢必须气体，CO2维持培养液pH。