食品中维生素D检测方案(液相色谱仪)

「技术简报]WatersTHE SCIENCE OF WHAT'S POSSIBLE.◎2018年沃特世公司。中国印刷。2018年6月720006303ZHTC-PDF 使用ACQUITY UPLC H-Class PLUS系统分析维生素D 目的 采用ACQUITY""UPLC" H-Class PLUS/XevoTQ-Smicro色谱-质谱联用系统分析食品中的维生素D。 背景 维生素D是一种脂溶性维生素，可促进人体对钙的吸收，使血清中维持足够浓度的钙和磷，从而保证骨骼能够正常矿物化。最常见的维生素D包括麦角钙化醇(维生素D2)和胆钙化醇(维生素D3)。有少量的维生素D(维生素D2和D3)会以维生素D前体的形式存在，也具有生物活性。维生素D前体与维生素D之间能够可逆地进行异构转化。美国食品药品监督管理局(FDA)最近修订了食品标签法规，要求所有的常见食品和膳食补充剂都必须在营养成分或保健成分标签中标明维生素D的含量2。此项标签法规的修订旨在提高消费者关注维生素D的意识。 我们之前已经采用ACQUITY UPLC H-Class/Xevo TQ-S micro色谱-质谱联用系统开发了一种新的维生素D分析方法3。 图1.ACQUITY UPLC H-Class系统(A)和ACQUITY UPLC H-Class PLUS系统(B)得到的维生素D色谱图。 这种新方法可以分别测定维生素D前体和维生素D，相较于只能测定维生素D而不能测定维生素D前体的现有方法“，有很大改进。本技术简报证明， ACQUITYUPLC H-Class PLUS系统的性能与开发原始分析方法的ACQUITY UPLC H-Class系统相当，为准确分析食品中的维生素D提供了一种稳定可靠的解决方案。 解决方案 ( ACQUITY UPLC H-Class PLUS系统与Xevo TQ-S micro质谱仪联 用 ，为准确 ) ( 测定食品中的维生素D和维生素D前体提供了一种快速可靠的分析方法。 ) 进样次数 保留时间(平均值) 保留时间 理论塔板数(平均值) 理论塔板数(%RSD) (% RSD) 维生素D. 6 5.037 0.07% 66120 3.5% 维生素D前体 6 5.422 0.06% 96830 1.6% 胆钙化醇-d。 6 5.029 0.00% 68578 2.8% 胆钙化醇-d，前体 6 5.411 0.06% 97538 3.2% 维生素D 6 5.013 0.04% 61767 5.5% 维生素D，前体 6 5.400 0.06% 93657 2.8% ACQUITY UPLC H-Class PLUS 进样次数 保留时间 (平均值) 保留时间 (%RSD) 理论塔板数(平均值) 理论塔板数(%RSD) 维生素D. 6 4.994 0.06% 68001 2.3% 维生素D，前体 6 5.375 0.00% 95119 1.9% 胆钙化醇-d， 6 4.985 0.05% 69031 4.7% 胆钙化醇-d，前体 6 5.364 0.00% 93302 3.0% 维生素D. 6 4.972 0.04% 52147 9.1% 维生素D，前本 6 5.350 0.06% 90478 2.6% 表1.分别使用ACQUITY UPLC-H Class和UPLC H-Class PLUS系统分析维生素D标准品得到的色谱保留时间和柱效结果。 在食品生产、运输或存放期间，可能会有总量不可忽略的维生素D在热作用下异构转化为维生素D前体，因此检测维生素D前体可消除导致维生素D检测结果出错的一个主要原因。 我们分别采用ACQUITY UPLC H-Class和ACQUITYUPLC H-Class PLUS系统分析了维生素D标准品(胆钙化醇、麦角钙化醇、稳定同位素标记的胆钙化醇-d，以及它们相应的维生素前体)。如图1所示，两套系统得到的色谱分离结果相当。表1所示为六次重复进样的保留时间(RT)和柱效(理论塔板数)重现性。 ACQUITY UPLC H-Class PLUS系统得到的RT和理论塔板数相对标准偏差(%RSD)分别小于0.06%和9.1%， 而ACQUITY UPLC H-Class系统得到的RT和理论塔板数相对标准偏差分别小于0.07%和5.5%。 THE SCIENCE OF WHAT'S POSSIBLE." 由此可见，两套系统得到的RSD值相当。相较于H-Class系统， H-Class PLUS系统得到的RT平均缩短0.045 min。两套系统RT的微小差异不会影响维生素D的测定结果。 总结 ACQUITY UPLC H-Class PLUS与Xevo TQ-S micro质谱仪联用可组成一套稳定可靠的分析系统，用于分析食品中的维生素D。 ACQUITY UPLC H-Class PLUS系统的RT和柱效重现性与ACQUITY UPLC H-Class系统相当。因此， ACQUITYUPLC H-Class PLUS-与Xevo TQ-S micro联用系统能够准确可靠地测定食品中的维生素D。 ( 参考文献： ) ( 1. V itamin D F a ct Sheet for Health Professionals， National Institutes of Health. Website： https： / /ods.od.n i h.gov / fa c tsheets/VitaminD -H ea l thProfessi o na l/ visited May 1， 2018 ) ( 2. F oodlabeling： Revision of the nutritional and supplement facts labels， FDA， Federal R egister/Vol.81， No. 1 0 3/Friday， May 27， 2016/Rules and Regulations. ) ( 3. Determination of vitamin D and previtamin D in food products， Waters application note 7 2 00 06 064e n ， J u ly 2017， Waters corporation， 34 Maple Street， Milford， MA， USA. ) ( 4. AOAC Official Method 2016.05， Official Methods of Analysis of AOAC INTERNATIONAL (2016)20th Ed.， AOAC INTERNATIONAL， Gaithersburg， MD，USA. ) Waters、ACQUITY、UPLC、Xevo和The Science of What's Possible是沃特世公司的商标。其它所有商标均归各自的拥有者所有。 本技术简报证明，ACQUITY UPLC H-Class PLUS系统的性能与开发原始分析方法的ACQUITY UPLC H-Class系统相当，为准确分析食品中的维生素D提供了一种稳定可靠的解决方案。