食品（菠菜）和环境样品中农药多残留检测方案(液相色谱仪)

作者 Jerry Zweigenbaum， Michael Flanagan， Peter Stone， Thomas Glauner， Limian Zhao Agilent Technologies， Inc. 2850 Centerville Road Wilmington， DE 19808 使用三重串联四极杆液质联用仪和动态多反应监测功能(DMRM)进行复杂样品中农药多残留的快速定性定量分析 采用安捷伦分析方法包和农药化合物参数数据库的快速而高效的方法开发 应用报告食品安全和环境 摘要 由于需要监测和定量的农药组分种类繁多而且浓度低，因此食品和环境样品中农药残留的分析一直是个挑战。另外，由于不同化合物需要不同的优化质谱参数，因此三重串联四极杆液质的分析方法的开发是一个繁复耗时的工作。本文就是针对这种情况，介绍了一种利用安捷伦农药药留分析方法包快速而高效地建立使用 LC/MS/MS进行农药多残留检测的方法。该分析包中包括了农残测试标样、含600种农药组分的多反应监测数据库(MRM)、快速起始应用指南以及几种用于农残检测的动态多反应监测(DMRM)的分析方法，该分析包可以轻松应用于特定农残分析方法。动态反应监测数据库包括了世界上最普遍被监监的农药，可以提供快速及定制式的农药分析物列表方法开发。在 Agilent1200高分离度快速液相色谱和带喷射流离子聚集技术的6460三重串联四极杆串联质谱仪上演示了100和300种农药残留分析的结果。另外还利用安捷伦最高性能的1290Infinity 超高压液相色谱与6460LC/MS分析了以上300种农药组分。与1200高分离度快速液相色谱 (RRLC) 相比， Agilent 1290 Infinity 超高效液相色谱具有更高的耐压能力、更快的分析速度、更高的峰容量和更少的重叠峰。以菠菜为基质添加了16种农药，采用了安捷伦的 SampliQ 萃取、分散 SPE 试剂盒和安捷伦的三重串联四极杆液质联用仪进行了食品中农药残留的高灵敏度快速分析。 目标农药残留的传统检测方法一般是气质联用或液质联用的方法。由于被使用的农药的种类繁多和一次进样实现复杂样品中几百种农药的高灵敏度检测的要求，所以两种技术都是必须的。气质联用法用于弱极性同时具有一定挥发性的农药的分析，而液质联用法则适合于极性或者热不稳定的农药分析，有不少农药是属于既适合气质分析又适合液质联用技术分析的化合物。但是，在近20年来开发的农药，大多数适合液质分析。对于复杂样品中痕量组分的检测使用三重串串四极杆液质(QQQ)及多反应监测功能。在进行多反应监测(MRM)采集时， QQQ监测母离子在经过中间的四极杆(碰撞反应池)时碰撞产生的子离子，见图1。多反应监测(MRM)对于目标化合物分析具有最高的灵敏度和选择性。 图1.三重串联四极杆质谱上多反应监测(MRM)的工作原理示意图。母离子在第一个四杆(Q1)中选择，在碰撞反应池中(Q2)产生碰撞解离碎片，在第三个四极杆上进行子离子的选择。因为使用了两个阶段的质量选择性，所以来自样品基质的背景干扰极低，产生优异的灵敏度 长久以来，监管机构不断地要求增加检测农药的数量以及农药残留种类。现在通常要求一次进样实现对上百种农残的分析。为了应对这一挑战，需要将监测的 MRM transitions 转换为使用进行时间编程的多反应监测。这就是所谓的时间编程 MRM。它通过将QQQ编程，在不同的 LC/MS分析时间段来监测特定的子离子。然而这样的方法需要良好定义的保留时间窗口以避免在组分流出时进行时间段的切换。如果时间编程的多反应监测(MRM)用于包含几百种农药残留的样品，那么时间编程 MRM分析将受到循环时间限和离子驻留时间限的影响，该时间限会影响分析灵敏度和 选择性。动态多反应监测(MRM)，一种新的技术，大大消除这个限制，使得更容易地进行方法的建立和修正，例如增加新的需要分析的农药组分。当组分离子从液相色谱洗脱时，动态多反应监测只监测组分离子。在这一点上，与时间编程多反应监测(MRM)相比较，动态多反应监测(MRM)显著改善了复杂样品的负载循环时间[1]，并提高了灵敏度和选择性。 无论是时间编程 MRM 还是动态 MRM， 建立多反应监测方法的挑战之一是创建 MS/MS 事件的时间序列和灵敏度及专一性最大化的质谱参数。获得每个分析化合物的两个或更多 MRMtransitions 列表以及化合物组分的特定参数、碰撞电压和碰撞能量非常必要。安捷伦已经开发出包含600种农药的 MRM 数据库，可以与安捷伦的所有三重串联四极杆液质联用配合使用，不再需要繁复而耗时的手动程序来获得此信息。数据库可以将选择的组分直接导入用户的分析方法。数据库的一部分见图2。除了建立定制方法之外，只读式数据库允许用户拷贝用户定制的数据库以满足特殊的分析要求。关于数据库更细的信息请参见相关的技术报告[2]。安捷伦农药分析方法包还包括了相关的农药测试混合物标样，它们被用于系统性能的测试和预设方法的校验，允许快速方法开发。无论是分析方法包还是测试标样都没有减少对定义合适QC/QA程序的实验室的需求。每个实验室必须具有适合各种目的的质量控制程序并且分析相应的测试标准品来校验分析结果。 ( 本应用报告详细地介绍了安捷伦农药分析方法包和600种农药的数据库，以及动态 MRM 进行复杂农药混合物的分析。液相色谱系统采用1200 SL 系列 RRLC 或者1290 Infinity UHPLC， 串联 Agile n t 6460型喷射流离子聚焦的三重串联四极杆质谱仪[3]。 本文介绍的这些方法都可以采用 Agilent MassHunter数据分析软件和动态多反应监测农药数据库方便的建立。采用 Agilent 6460 系列 QQQ LC/MS 系统， ，- 一些农药的检测限(LOD) 达到了100 fg甚至更低。这些方法适用于所有的 Agilent 6400系列LC/MS系统。 ) 实验部分 试剂和化学品 安捷伦农药测试标样混合物，部件号5190-0469，酸性和碱性化合物在10%的乙腈/90%水溶液中分别稀释到10 ppb Agilent SampliQ QuEChERS AOAC 提取试剂盒，部件号5982-5755。 Agilent SampliQ QuEChERS AOAC分散固相萃取试剂盒用于色素含量高的水果和蔬菜样品，部件号5982-5321(2mL) 和部件号 5982-5356(15mL) 农药多残留标样购自 Sigma， Chemservice 和 Erhenstofer博士 仪器参数设置 *附录Ⅰ：测试混合物正离子和负离子样品分析的 LC/MS/MS条件 附录Ⅱ：100种农药同时检测的LC/MS/MS条件 ( *附录Ⅲ：使用Agilent 1200 系列SL 型LC/MS/MS分析 300种农药的液质条件 ) ( 附录Ⅱ：采用 Agi l ent 1290 I nfini t y LC/MS/MS分析300种农药的液质条件 ) ( 附录V： QuECHERS提取试剂盒用于菠菜样品中农药分析的LC/MS/MS条件 ) ( *附录VI：采用 Agilent 1200 系列 InfinitySL 分析165种农药 残留组分的LC/MS/MS条件 ) ( *附录VI： 采用 Agilent 1200 系列SL分析224种农残的 LC/MS/MS分析条件 ) ( 附录VI：采用 Agilent 1290 Infinity LC 分析224种农药的 LC/MS/MS条件 ) *上述所有的方法都已经包括在分析方法包中 菠菜样品的前处理步骤 称取15g(±0.1g)已经均质好的菠菜样品 添加标准品或者如果需要，添加内标 涡旋震荡30秒 加15mL含1%乙酸的乙腈溶液 将预装的1包提取试剂盒中的缓冲液(部件号5982-5982-5755)加入专用的 QuEChERS 萃取管， AOAC Method2007.01， 6gMgSO 和1.5 g NaAc 旋紧盖并手持震荡1分钟 4000 rpm 下离心5分钟 1mL 或8 mL上清液转移至分散固相萃取试剂盒中(部件号5982-5321或部件号5982-5356)，用于高色素的水果和蔬菜样品 涡旋震荡1分钟 2 mL的离心管在 13000 rpm 下离心2分钟，或者15 mL 离心管在4000 rpm下离心5分钟 200pL上清液转移至自动进样器的样品瓶中 加800 pL水或者标准添加液 涡璇震荡1 min， 以备LC/MS/MS分析 结果和讨论 正离子和负离子模式测试标样混合物 除了600个化合物库之外，安捷伦农药分析方法包还包括了正负离子模式的测试标样，以及分析方法，参见附录I。方法包含化合物名称、MRM transtions、碰撞电压、碰撞能量和动态 MRM的保留时间。测试混标和提供的方法可以帮助用户验证系统一经安装就可以进行农药分析。动态 MRM的正离子和负离子模式下，测试标样的LC/MS/MS 提取离子流图见图3和图4. 分析方法包快速使用指南[4]指导用户如何分析测试混标和创建动态 MRM方法。为了建立新的方法，首先在 MRM 下分析高浓度的标样。用安捷伦的 MassHunter 质谱工作站软件生成包含保留时间的报告。通过从定制报告导入结果和指定保留时间增量窗口来生成动态 MRM 方法。该步骤在不久的将来即可实现自动化。 图3.正离子模式下测试混标的提取离子流图(参见附录的化合物和对应的保留时间的数据) 图4.负离子模式下测试标样的提取离子流图(参见附录/的化合物和对应的保留时间的数据) 表1是动态 MRM 方法采集参数的部分信息。注意：在这篇应用 举例中，保留时间窗口 (Delta RT) 是2分钟，这对于窄峰太宽了。 宽的时间窗口适用于当保留时间发生偏移并且需要在用户定制分 析方法中更新的时候运行标样。 表1.动态多反应监测(DMRM)采集参数的屏幕截图 Acquisition Source Chromatogram Instrument Diagnostics Scan segments- Compound Name ISTD? Precursorlon MS1 Res Productlon MS2 Res Fragmentor CollisionEnergy Ret Time[min] Delta RetTime Acephate 184 Unit 125 Unit 80 i0 1.212 2 Aminocarb 209 Unit 137 Unit 120 20 1.251 2 Atrazine 厂 216 Unit 132 Unit 120 20 7.602 2 Azinphos-methyl 厂 318 Unit 132 Unit 80 10 9.346 Carbofuran 222 Unit 123 Unit 120 15 7.13 2 Chlorpyrifos methyl 322 Unit 125 Unit 80 15 12.168 2 Diazinon 305 Unit 153 Unit 160 20 11.822 2 Dimethoate 230 Unit 171 Unit 80 10 4.645 2 Imazalil 297 Unit 159 Unit 160 20 6.498 2 利用动态多反应监测(DMRM)对100种农药进行快速而高效的筛查 利用100种农药混合物来演示动态多反应监测(DMRM)的有效性。附录Ⅱ包括了每个组分的含量为100 pg的100种农药的LC/MS/MS条件和部分动态多反应监测方法列表。值得注意是采用的色谱柱只有50mm，所以分析速度更快但是分离度会相应降低。图5所示的LC/MS/MS 提取离子流图证明了系统的性能。整个的液相色谱分析用时少于15分钟。图6所示，在1分钟的时间窗口内包含了11个组分(即22个MRM)。图7是对于每一个动态多反应监测 transition 的1分钟增量保留时间窗口。注意 到有很多的共流出峰。在定量分析中，为了获得所需的循环时间，保证每个峰都能获得足够的数据点， 动态 transition 代替时间段transition 更有优势和必要性。而且当监测物峰在时间段附近或两个时间段之间流出时，时间段 MRM 会发生固有的“死时间”而致的数据丢失。对于在时间段切换边缘洗脱的组分，时间编程MRM 需要重复进样分析。另外动态多反应监测 (DMRM)对于重叠组分峰最大地利用了离子驻留时间，在保持恒定循环时间的同时增强了分析物的信噪比。值得注意的是所选的循环时间最好在一个色谱峰上有20个数据点， 在一个保留时间窗口(保留时间增量窗口)最少能有64个数据点。 图5.100种农药的提取离子流图(每个组分100pg) 化和物名称 母离子 子离子 保留时间 醚磺隆 414.1 183 5.579 醚磺隆(Q) 414.1 157 5.579 绿磺隆 213.1 72 5.642 绿磺隆(Q) 213.1 140 5.642 阿特拉津 216.1 174 5.682 阿特拉津 (Q) 216.1 132 5.682 西维因 202.1 145 5.736 西维因(Q) 202.1 117 5.734 萎锈灵 236.1 143 5.836 萎锈灵(Q) 236.1 87 5.836 氯磺隆 358.0 167 5.896 氯磺隆(Q) 358.0 141 5.896 乙硫苯威 226.1 107 5.937 乙硫苯威(Q) 226.1 164 5.936 吗菌灵 283.3 116 6.073 吗菌灵(Q) 282.3 98 6.074 敌草隆(Q) 233.0 160 6.101 嘧菌环胺 226.1 108 6.245 嘧菌环胺(Q) 226.1 93 6.246 枯莠隆 287.1 123 6.509 枯莠隆(Q) 287.1 72 6.509 图6.左图：表中是1分钟的时间窗口中被检测的11个组分；右图：被检测组分的动态MRM 结果 图7.对于每个 MRM transition 的动态多反应监测窗口 图8是本方法的一个典型分析结果。它显示了100种农药中的一个组分，阿特拉津的分析结果。可以看出阿特拉津色谱峰有20个数据点。这表明有足够多的数据点来保证定量分析的准确度。分析结果证明了动态多反应监测(DMRM)的效果和优点。 图8.10 pg阿特拉津的典型分析结果，充分证明了动态多反应监测 (DMRM)的成效 图9是四种农药组分的校正曲线。每种农药的线性相关系数(R2)是0.998。在恒定的循环时间条件下，动态多反应监测(DMRM)的定量结果极好。 图9.动态多反应监测 (DMRM)的定量校正曲线，10pg-1ng(7个浓度水平) 使用全新的 Agilent 1290 Infinity LC 分析300种农药，得到更加尖锐的色谱峰 附录Ⅲ包含了动态多反应监测分析300种农药(浓度为每个组分100 pg)的部分分析结果列表。提取离子流图见图10。该分析采用Agilent 1200 系列SL型RRLC，色谱柱为 Plus C18 2.1mmx100 mm， 1.8pm， 流速为 0.5 mL/min， 分析总时间小于20分钟。采用 Agilent 1290 Infinity UHPLC， Eclipse-Plus C18， 2.1mm×150 mm， 1.8pm 色谱柱对相同组分进行了分析。图11为相应的 提取离子流图，图12为该提取离子流图的部分扩展，可以看出Agilent 1290 Infinity LC 的分析时间是15分钟，比 1200 系列 SL型 RRLC 快了 25%。Agilent 1290 Infinity LC比 1200 SL RRLC 具有更高的峰容量，重叠峰更少。以阿特拉津为例，在 Agilent1290 Infinity UHPLC 上，它的半峰宽是1.8秒。这是因为长色谱柱能使分离效率更高，而 Agilent 1290 Infinity LC 能在满足此条件的柱压下工作(约900 bar)。 图11.在Agilent 1290 Infinity UHPLC上，300种分药组分的提取离子流图 响应值与采集时间(分钟) 图12.在1290 Infinity UHPLC 上， 300种农药组分的提取离子流图，充分证明了Agilent 1290 Infinity UHPLC具有更高的峰容量 在Agilent 1290 Infinity UHPLC 上，224种农药的快速分析 Agilent 1290 Infinity LC/6460 系列 QQQ LC/MS的另一个优点是它具有采用大流速，从而减少分析时间的能力。采用1200系列SL 型 RRLC检测 225种农药用时15分钟，其结果见图13，其分析方法见附录Ⅳ。采用 Agilent 1290 Infinity LC/MS/MS，流速可以 增加一倍，梯度时间减少一半。这样总的分析时间少于7分钟，分析结果见图14。其分析方法可以参见附录Ⅴ。要想一次进样就可以检测几百种农药，就需要系统具有更高的组分峰容量，参见300种农药的一次检测。但是如果必须满足分析速度的话，那么Agilent 1290 Infinity LC 同时配备更高耐压能力的色谱柱是您最佳的选择。 图13.在Agilent 1200 系列 SL 型LC/6460 QQQ LC/MS上分析224种农药的提取离子流图 图14. Agilent 1290 Infinity LC/6460QQQ LC/MS分析224种农药的提取离子流图 用于食品分析的农药分析方法包——使用 SampliQ 提取和分散固相萃取分析菠菜样品 为了演示使用安捷伦易于使用的 SampliQ 提取和分散固相萃取 试剂盒及安捷伦分析方法包在食品分析的应用，用菠菜样品添加 10 ppb的16种农药(见表2)进行说明，磷酸三苯(TPP)为内标。 表2.16种农药和仪器参数列表，样品是添加了10ppb 农药的菠菜样品 MRM通道(m/z) 碰撞电压 碰撞能量(V) 保留时间 待测组分 定量离子 定性离子 (V) 定量离子 定性离子 (分钟) 乙酰甲胺磷 184.0>94.9 184.0>110.0 60 3 15 2.55 甲胺磷 142.0>94.0 142.0>124.9 60 8 8 2.54 吡蚜酮 218.1>105.0 218.1>78.0 115 20 50 2.97 多菌灵 192.1>160.0 192.1>105.0 95 18 40 5.07 吡虫啉 256.1>209.1 256.1>175.0 60 12 18 5.53 噻苯咪唑 202.1>175.0 202.1>131.0 110 27 38 5.65 残杀威 210.1>111.0 210.1>92.9 50 12 15 6.89 甲基托布津 343.1>151.0 343.1>117.9 105 17 65 7.08 西维因 202.0>145.0 202.0>115.0 50 3 40 7.30 灭线磷 243.1>130.9 243.1>172.9 80 15 15 8.50 抑霉唑 297.1>158.9 297.1>200.9 80 22 15 8.52 戊菌唑 284.1>158.9 284.1>172.9 80 32 32 8.95 嘧菌环按 226.1>93.0 226.1>108.0 120 35 35 9.23 苯氟磺胺 333.0>123.0 333.0>223.9 85 28 5 9.40 醚菌酯 314.0>222.1 314.0>235.0 70 10 10 9.44 甲苯氟磺胺 347.0>136.9 347.0>238.0 60 25 3 9.73 磷酸三苯(内标) 327.1>77.0 327.1>151.9 70 45 45 9.49 图15.添加10ppb农药的菠菜样品的提取离子流图。结果表明在10ppb 的水平上，所有的农药都可以被检测到，整个分析时间少于10分钟。 图15.添加10ppb 农药的菠菜样品的提取离子流图 添加农药的菠菜样品的组分的线性校正曲线见图16。校正范围是5-250 ng/g，7个浓度水平， 5 ng/g、10 ng/g、25ng/g、100 ng/g 和250 ng/g。通过西维因的峰面积/内标物峰面积的比值与西维因的浓度/内标物浓度的比值建立校正曲线，R2=0.998。 图16.西维因的校正曲线 ( 安捷伦用于 LC/QQQ的农药应用方法包为用户提供了几百种农药的快速检测方法，具有多重 transitions 并可以将该定制方法应用于用户特定的分析需求。 ) ( 本应用介绍了安捷伦利用几种技术以及分析方法包进行农药多残留的筛查和定量分析。主要技术包括： ) 600种农药的 MRM 数据库和 Agilent MassHunter数据采集和数据分析软件。该组合可以帮助用户快速地进行数据采集和数据分析。分析方法可以根据用户要求定制，快速调整以满足未来不同的分析要求 当要分析几百种农药组分时，动态态反应监测(DMRM) 可以最大程度地提高检测能力 Agilent 1200 系列 SL 型 RRLC/6400 系列三重串四极杆质谱仪进行快速高分离的LC/MS/MS检测。配备喷射流离子聚焦电喷雾离子源的三重串联四极杆液质联用仪可以获得最低的检测限。当然任何一款6400 系列LC/QQQ 都能获得优异的分析结果 ( 简单易用的 SampliQ QuEChERS样品制备试剂盒可以使用 户快速而重现地进行样品的净化，特别是复杂样品的处理， 只需几个步骤 ) ( 易于使用的方法采用 Agilent 1200 系列 SL型LC系统和含 有保留时间的动态多反应监测。*详细的信息请参见附录[14]。 ) 这些技术手段可以帮助用户快速地建立分析方法以及进行复杂样品中几百种残留化合物的扫描和定量分析，其灵敏度在 fmol 水平。 此分析方法包法Agilent 1200 系列 LC/6400系列三重串联四极杆液质联用系统完全兼容，它可以帮助用户快速地进行农药多残留的检测。对于更高的分析要求，可以考虑 Agilent 1290 InfinityLC/6460 三重串联四极杆液质联用系统。还有更多的分析方法将陆续推出。 ( 1. 应用报告5990-3595 E N， 全新的动态多反应监测提高数据质量和三重串联四极杆在复杂样品定量分析中的能力 ) ( 2. 技术报告5990-3595EN，农药的动态多反应监测数据库 ) ( 3. 技术报告5990-3494EN，安捷伦喷射流离子聚焦技术 ) ( 4. 安捷伦出版物 5990-4262EN，农药动态多反应监测数据库快 速入门指南 ) 更多信息 ( 欲了解有关产品和服务更多的信息，请浏览 www.agilent.com/chem/cn。 ) 附录| 测试混合物正离离和负离子样品分析的 LC/MS/MS条件 正离子模式下， MS/MS 扫描 化合物名称 内标定量? 母离子 MS1分辨率 子离子 MS2分辨率 碰撞电压 碰撞能量 保留时间 保留时间窗口 极性 口 (V) (V) 灭害威 209 单位 137 单位 120 20 3.128 1 正离子模式 灭草烟 262 单位 217 单位 160 15 3.959 1 正离子模式 噻苯咪唑 202 单位 131 单位 120 30 4.072 1 正离子模式 乐果 230 单位 171 单位 80 10 5.064 1 正离子模式 抑霉唑 297 单位 159 单位 160 20 5.918 1 正离子模式 甲氧隆 229.1 单位 72.1 单位 93 14 5.992 1 正离子模式 呋喃丹 222 单位 123 单位 120 15 7.019 1 正离子模式 阿特拉津 216 单位 132 单位 120 20 7.437 1 正离子模式 磺草唑胺 418 单位 175 单位 144 26 7.472 1 正离子模式 吡唑草胺 278.1 单位 134.1 单位 75 18 8.038 1 正离子模式 环草丹 188.1 单位 55.1 单位 78 22 9.113 1 正离子模式 马拉硫磷 331 单位 99 单位 80 10 9.615 1 正离子模式 唑菌胺酯 388 单位 163 单位 120 20 10.679 1 正离子模式 二嗪农 305 单位 153 单位 160 20 10.776 1 正离子模式 负离子模式下， MS/MS扫描 (V) (V) 灭草松 239.1 单位 132 单位 80 32 6.572 1 负离子模式 2，4，5-三氯苯氧乙酸 252.9 单位 194.8 单位 76 9 8.047 1 负离子模式 三氯苯氧丙酸 口 266.9 单位 194.9 单位 90 5 8.805 1 负离子模式 三氟羧草醚 360 单位 315.9 单位 78 5 9.650 1 负离子模式 地乐酚 239.1 单位 207 单位 154 21 10.503 1 负离子模式 六伏隆(氟铃脲) 459 单位 438.9 单位 102 5 10.877 1 负离子模式 附录Ⅱ 100种农药同时检测的LC/MS/MS 条件 后运行时间 图7是方法中某个组分的 MRM transitions、碰撞电压和碰撞能量 附录Ⅲ 使用 Agilent 1200 系列 SL 型LC/MS/MS分析300种农药的液质条件 5 min 300种农药分析中10个代表性组分的MS/MS Transitions (V) (V) 猛杀威 208.1 单位 151 单位 80 5 11.635 猛杀威 208.1 单位 109 单位 80 10 11.635 呋草酮 334.1 单位 303 单位 120 20 11.644 呋草酮 334.1 单位 247 单位 120 30 11.644 异噁氟草 377.1 单位 360.1 单位 100 5 11.669 异噁氟草 360.1 单位 251 单位 120 10 11.669 高效二甲吩草胺 276.1 单位 244 单位 120 10 11.683 高效二甲吩草胺 276.1 单位 168 单位 120 15 11.683 乙霉威 268.2 单位 226 单位 80 5 11.706 乙霉威 268.2 单位 152 单位 80 20 11.706 附录IV 采用 Agilent 1290 Infinity LC/MS/MS分析 300种农药的液质条件 300种农药中10个代表性组分的 MS/MS扫描 (V) (V) 杀草敏 222 单位 104 单位 120 25 5.841 杀草敏 222 单位 92 单位 120 30 5.841 灭害威 209.1 单位 152.1 单位 120 10 5.841 灭害威 209.1 单位 137 单位 120 20 5.841 氟草烟 255 单位 209 单位 80 10 5.845 氟草烟 0 255 单位 181 单位 80 15 5.845 啶虫脒 223.1 单位 126 单位 80 15 5.858 啶虫脒 223.1 单位 56 单位 80 15 5.858 完灭硫磷 288 单位 146 单位 80 10 5.996 完灭硫磷 288 单位 118 单位 80 20 5.996 附录V QuECHERS 提取试剂盒用于菠菜样品中农药分析的LC/MS/MS条件 Agilent 1200 系列 HPLC 条件 色谱柱： Agilent ZORBAX Eclipse Plus Phenyl- hexyl， 150 mm × 3 mm， 3.5 pm 安捷伦部件号 959963-312 柱温：30 °C进样量：10uL流动相： A=5mM醋酸铵， pH 5.0 的 20：80 甲醇/水的溶液 B=5 mM醋酸铵， pH 5.0的乙腈溶液洗针：1：1：1：1乙腈/甲醇/异丙醇/水，及/0.2%的甲酸梯度：时间流速(min)%B (mL/min)010.010.112.0停止时间：13.0 min后运行时间：4 min 总分析时间： 17 min Agilent 6410质谱条件 正离子模式 干燥气温度： 350 C 干燥气流速： 10L/min 雾化器压力： 40 psi 毛细管电压： 4000V 附录VI 采用 Agilent 1200 系列 InfinitySL 型分析165种农药残留组分的 LC/MS/MS条件 25.00 167种农残中10个代表性组分的 MS/MS Transitions (V) (V) 乙硫苯威砜. 275 单位 201 单位 80 0 6.89 1 乙硫苯威砜. 275 单位 107 单位 80 10 6.89 1 噻虫胺. 口 250 单位 169 单位 90 5 7.064 1 噻虫胺. 口 250 单位 132 单位 90 15 7.064 1 吡虫啉 256.1 单位 209 单位 80 15 7.071 1 吡虫啉 口 256.1 单位 175.1 单位 80 20 7.071 1 乙硫甲威亚砜 242 单位 185 单位 80 15 7.153 1 乙硫甲威亚砜 242 单位 107 单位 80 5 7.153 1 庚酰草胺 257.1 单位 200.1 单位 105 4 7.165 1 庚酰草胺 257.1 单位 137.1 单位 105 8 7.165 1 附录VI 采用 Agilent 1200 系列 SL型分析224种农残的 LC/MS/MS分析条件 后运行时间 3 min 224种农残中 10个代表性组分的 MS/MS Transitions (V) (V) 噻嗪酮 306.2 单位 201.1 单位 115 4 14.321 1 噻嗪酮 306.2 单位 57.2 单位 115 16 14.321 1 甲丙硫磷 323 单位 247.1 单位 130 5 14.327 1 甲丙硫磷 323 单位 219 单位 130 12 14.327 1 乙酰氨基阿维菌素 914.6 单位 468.3 单位 150 5 14.372 1 乙酰氨基阿维菌素 914.6 单位 330.3 单位 150 10 14.372 1 氟伏虫脲 540 单位 383 单位 115 16 14.402 1 氟伏虫脲 540 单位 158 单位 115 16 14.402 1 氰氟草酯 422.2 单位 366.2 单位 130 15 14.428 1 氰氟草酯 422.2 单位 135 单位 130 40 14.428 1 附录 VIII 采用 Agilent 1290 Infinity LC 分析 224种农药的 LC/MS/MS条件 Agilent1200 液相色谱条件 喷射流离子聚焦参数 色谱柱：Agilent ZORBAX Eclipse Plus-C18，干燥气温度：225℃2.1 mm × 100 mm， 1.8 pm干燥气流速(氮气)：10 L/min安捷伦部件号959764-902雾化器压力(氮气)：25 psig柱温：毛细管电压：455℃500V鞘流气温度：350℃进样量：5.0 pL鞘流气流速：11L/min样品温度：6°℃喷嘴电压：500 V洗针：针座洗针，甲醇：水75：25， 5s流动相：A=5mM甲酸铵+0.01%甲酸水溶液B=5mM甲酸铵+0.01%甲酸水溶液95：5乙腈：水流速：0.6 mL/min梯度泵时间表时间流速压力 溶剂比例B不变60067不变600 不变600 停止时间10 min 后运行 3 min www.agilent.com/chem/cn 安捷伦公司对本材料中可能存在的错误或使用这一材料而带来的意外伤害和问题不负任何何任。 本文中的信息、说明和指标，如有变更，恕不另行通知。 安捷伦科技(中国)有限公司，2009年 2009年8月3日中国印刷 5990-4253 CHCN Agilent Technologies Agilent Technologies 由于需要监测和定量的农药组分种类繁多而且浓度低，因此食品和环境样品中农药残留的分析一直是个挑战。另外，由于不同化合物需要不同的优化质谱参数，因此三重串联四极杆液质的分析方法的开发是一个繁复耗时的工作。本文就是针对这种情况，介绍了一种利用安捷伦农药残留分析方法包快速而高效地建立使用LC/MS/MS 进行农药多残留检测的方法。该分析包中包括了农残测试标样、含600 种农药组分的多反应监测数据库(MRM)、快速起始应用指南以及几种用于农残检测的动态多反应监测(DMRM)的分析方法，该分析包可以轻松应用于特定农残分析方法。动态反应监测数据库包括了世界上最普遍被监测的农药，可以提供快速及定制式的农药分析物列表方法开发。在Agilent 1200 高分离度快速液相色谱和带喷射流离子聚集技术的6460 三重串联四极杆串联质谱仪上演示了100 和300 种农药残留分析的结果。另外还利用安捷伦最高性能的1290 Infinity 超高压液相色谱与6460LC/MS 分析了以上300 种农药组分。与1200 高分离度快速液相色谱（RRLC）相比，Agilent 1290 Infinity 超高效液相色谱具有更高的耐压能力、更快的分析速度、更高的峰容量和更少的重叠峰。以菠菜为基质添加了16 种农药，采用了安捷伦的SampliQ 萃取、分散SPE 试剂盒和安捷伦的三重串联四极杆液质联用仪进行了食品中农药残留的高灵敏度快速分析。扫描下方二维码，关注“安捷伦视界”微信公众号，获取更多解决方案资讯。