牛奶中甲砜霉素检测方案(液相色谱柱)

月旭科技牛奶中甲砜霉素测定解决方案（改进GB 29689-2013方法） 适用范围 适用于牛奶中甲砜霉素残留量的检测。 溶液的配置 甲砜霉素标准储备液（1mg/ml）：称取甲砜霉素对照品（15318-45-3）10mg，置于10ml容量瓶中，用乙腈定容至刻度。储藏条件2-8℃，保质期一个月。 甲砜霉素标准工作液（100μg/ml）：量取1mg/ml甲砜霉素标准储备液1.0ml至10ml容量瓶中，用流动相稀释至刻度。 甲砜霉素标准工作液（10μg/ml）：量取1mg/ml甲砜霉素标准储备液1.0ml至100ml容量瓶中，用流动相稀释至刻度。 提取步骤 纯牛奶：称取试样5g至50ml离心管中，加乙酸乙酯20ml，涡旋混匀2min，8000r/min离心5min，将上清液转移至100ml鸡心瓶中；再次重复上述提取步骤两次。合并三次提取液，于45℃旋转蒸发至近干；鸡心瓶中残液加入5ml水，超声5min使之充分溶解，再向鸡心瓶中加入10ml正己烷，一并转移至50ml离心管中；再加5ml水与10ml正己烷于鸡心瓶中重复溶解后转至同一离心管中，涡旋混匀2min，4000r/min离心2min，取下层清夜待净化。 SPE净化步骤 加标水平 选用的SPE 小柱型号及规格 - 月旭Welchrom®BRP 2mg/kg 200mg/6ml 活化：5mL乙腈，5mL水，弃去 上样：待净化液全部上样，弃去 淋洗：2mL水（润洗离心管），弃去，抽干 洗脱：10mL乙腈，收集于15ml离心管中，抽干 氮吹吹干,用流动相定容至1mL，并过0.45 µm滤膜，上HPLC检测。 色谱条件 色谱柱：月旭Ultimate®XB-C18（4.6 x 250 mm, 5 μm） 流动相：水/乙腈=(4/1) 流速：1.0mL/min 柱温：30℃ 进样量：20μL 检测波长：225nm； 6、色谱图及加标回收率结果 图1.甲砜霉素标准品500μg/L谱图 图2.牛奶样品加标2.0mg/kg谱图（SPE柱：BRP） 表1：牛奶样品BRP小柱处理加标回收率 加标水平 平均回收率% RSD% N=3 2.0mg/kg 90.53 2.03 8、相关产品信息 货号 名称 规格 00522-20014 Welchrom BRP 200mg/6ml,30pk 0000-30016 50mL螺口尖底离心管 50支/包 00824-31001 Welch 固相萃取装置 12位方缸 00821-32291 盖子+垫子 预切口红色色特氟龙/白色硅胶隔垫，9mm蓝色短螺纹开口盖 中心孔6mm 100pk 00821-40927 样品瓶 2ml 透明短螺纹广口样品瓶（带手写处），11.6*32mm，一级水解玻璃100pk 00201-31043 Ultimate®XB-C18 4.6 x 250 mm, 5 μm 00826-T338P250 甲砜霉素 CAS No.:15318-45-3,250mg 声明:除非另有说明，此报告结果仅对该测试样品负责。本报告未经公司许可，不可复制。 Add:浙江省金华市婺城区双林南街168号Tel:400-810-6969 邮编：321000 E-mail:lingyuyu@welchmat.com 牛奶是我们日常生活中十分常见的一种饮料，其营养丰富，能够补充人体日常所需的蛋白质，补充钙质等等。牛奶还是非常棒的早餐饮品之一，同时晚上睡觉之前喝一杯温热了的牛奶，还具有安神的效果，能美美的香香的睡上一觉。而牛奶中会含有一种甲砜霉素，为白色到类白色结晶性粉末或晶体。甲砜毒素在临床上主要用于治疗呼吸、泌尿、肝胆、伤寒等肠道外科、妇产科和五官科感染等症，特别对中轻度感染作用尤其明显。服用甲砜霉素可发生腹痛、腹泻、恶心、呕吐等消化道反应，其发生率在10%以下。本品亦可引起造血系统的毒性反应，主要表现为可逆性的红细胞生成抑制，白细胞和血小板减少等。因此通过有效的实验技术手段，对牛奶中的有关甲砜霉素残留进行监控，以确保消费者对牛奶消费的安全具有重要意义。适用范围适用于牛奶中甲砜霉素残留量的检测。溶液的配置甲砜霉素标准储备液（1mg/ml）：称取甲砜霉素对照品（15318-45-3）10mg，置于10ml容量瓶中，用乙腈定容至刻度。储藏条件2-8℃，保质期一个月。甲砜霉素标准工作液（100μg/ml）：量取1mg/ml甲砜霉素标准储备液1.0ml至10ml容量瓶中，用流动相稀释至刻度。甲砜霉素标准工作液（10μg/ml）：量取1mg/ml甲砜霉素标准储备液1.0ml至100ml容量瓶中，用流动相稀释至刻度。提取步骤纯牛奶：称取试样5g至50ml离心管中，加乙酸乙酯20ml，涡旋混匀2min，8000r/min离心5min，将上清液转移至100ml鸡心瓶中；再次重复上述提取步骤两次。合并三次提取液，于45℃旋转蒸发至近干；鸡心瓶中残液加入5ml水，超声5min使之充分溶解，再向鸡心瓶中加入10ml正己烷，一并转移至50ml离心管中；再加5ml水与10ml正己烷于鸡心瓶中重复溶解后转至同一离心管中，涡旋混匀2min，4000r/min离心2min，取下层清夜待净化。SPE净化步骤活化：5mL乙腈，5mL水，弃去上样：待净化液全部上样，弃去淋洗：2mL水（润洗离心管），弃去，抽干洗脱：10mL乙腈，收集于15ml离心管中，氮吹吹干,用流动相定容至1mL，并过0.45 μm滤膜，上HPLC检测色谱条件色谱柱：月旭Ultimate®XB-C18（4.6 x 250mm, 5μm）流动相：水/乙腈=(4/1)流速：1.0mL/min柱温：30℃进样量：20μL检测波长：225nm色谱图及加标回收率结果图1.甲砜霉素标准品500μg/L谱图图2.牛奶样品加标2.0mg/kg谱图（SPE柱：BRP）表1：牛奶样品BRP小柱处理加标回收率相关产品信息