红葡萄酒中柠檬酸检测方案(液相色谱仪)

采用高效液相色谱法测定红葡萄酒中的柠檬酸 应用简讯 食品检测与农业 作者 前言 吴翠玲、张聪聪 柠檬酸的含量对食品的味道有很大影响，并且是某些食品品质的一项重要检测指标，例如其作为酸度调节剂在葡萄酒中的应用。在葡萄酒的酿造过程中，添加的柠檬酸可以帮助 SO， 防止葡萄酒变质、起抑菌作用、维持和稳定红葡萄酒的颜色。有人认为柠檬酸是安全无毒的，其实不然，经过多次实验证明， 2.15 g/kg 的柠檬酸对小鼠的体重有明显影响，毒理实验也证实了柠檬酸对受试小鼠的肝脏有影响。 GB 15037-2006规定干、半干和半甜葡萄酒中柠檬酸的含量小于等于1 g/L，甜葡萄酒中柠檬酸的含量小于等于2 g/L。 本文所述方法参照法标 GB/T 15038-2006和进出口行业标准 SN/T 2007-2007 方法，建立了一种分析红酒中柠檬酸的高效液相分析方法。该方法使用 Agilent Poroshell120 SB-AQ 极性改性反相色谱柱，可以长时间耐受100%水相流动相，并且在普通仪器上即可实现快速高效的分离，整个运行仅需6min， 系统压力在150 bar 以下。 柠檬酸分析 对样品进行前处理，取1g红葡萄酒样品，用水涡旋稀释，定容到 10mL， 取适量样品，过 Agilent Captiva 优级 0.2 pm RC 过滤膜。使用配备了 Agilent Poroshell120快速分析色谱柱的高效液相色谱系统对其进行分析，表1所示为液相色谱分析条件。 表1.液相色谱分析条件 液相色谱： Agilent 1260 Infinity ll 液相色谱系统-二极 管阵列检测器 (HPLC-DAD) 色谱柱： Agilent Poroshell 120 SB-AQ， 4.6×100 mm， 2.7 um， 部件号685975-914 流速： 1mL/min 柱温： 40°C 进样体积： 10pL 流动相A： 0.02 mol/L 的磷酸二氢钾水溶液， pH 2.4 流动相B： 甲醇 梯度洗脱： 时间(min) B(%) 0 0 3 0 3.5 80 6 80 6.5 0 10 0 检测波长： 210nm 图1.三个浓度点(0.5、0.1、1.0mg/mL)的柠檬酸标准溶液的色谱图(上)和光谱图(下) 本文所述方法适用于分析红葡萄酒中的柠檬酸，使用Poroshell 120 快速分析色谱柱，6 min 即可完成一次样品分析，见图1、2、3；0.1 mg/mL柠檬酸标准溶液连续进样六次，所得色谱峰的峰面积 RSD <0.6%，证明系统具有很好的稳定性，见图4；柠檬酸在 0.05-1 mg/L 浓度范围内具有良好的线性，见图5。 图2.红葡萄酒空白基质样品(上)、1 mg/mL 柠檬酸标准样品(中)，10 mg/mL红葡萄酒加标样品(下)的色谱图 图3.红葡萄空白基质样品(蓝色)和1 mg/mL 红葡萄酒加标样品(红色)的重叠色谱图 图4.0.1 mg/mL 柠檬酸标准溶液重复进样所得色谱叠加图和峰面积(n=6， RSD%=0.55) 图5.柠檬酸标准溶液校正曲线 本文所采用的 Poroshell 120 SB-AQ 柱为表面多孔性硅胶极性修饰反相固定相，可长时间耐受100%水相流动相。由图2、6、7可以看出，色谱图中柠檬酸出峰位置无杂质峰干 扰，有效实现了红葡萄酒样品经稀释、萃取、简单过膜处理后的基质干扰和目标分析物的良好分离，并且具有快速分离分析的效果。如表2所表，在10 mg/mL、1.0mg/mL、0.5 mg/mL 三个不同浓度添加水平下，柠檬酸的平均添加回收率均在88%以上(n=3)。 图6.红葡萄酒空白基质样品(红色)、0.05 mg/mL 柠檬酸标准溶液(蓝色)、0.5 mg/mL 红葡萄酒加标样品(绿色)的重叠色谱图 图7.红葡萄酒空白基质样品(红色)、0.1mg/mL柠檬酸标准溶液(绿色)、1 mg/mL 红葡萄酒加样品(蓝色)的重叠色谱图 表2.柠檬酸的平均添加回收率(n=3) 添加浓度 0.5 mg/L 1.0 mg/L 10.0 mg/L 平均回收率 88.9% 89.0% 91.2% 消耗品订购信息 液相色谱柱： Poroshell120 SB-AQ， 4.6×100 mm， 2.7 um，部件号685975-914 针头过滤器： Captiva 优级过滤膜 PES， 0.2 pm， ( 部件号5190-5096 ) 查找当地的安捷伦客户中心： www.agilent.com/chem/contactus-cn 免费专线：800-820-3278，400-820-3278(手机用户) 联系我们： LSCA-China_800@agilent.com 在线询价： www.agilent.com/chem/erfq-cn www.agilent.com 安捷伦对本资料可能存在的错误或由于提供、展示或使用本资料所造成的间接损失不承担任何责任。 本文中的信息、说明和技术指标如有变更，恕不另行通知。 @安捷伦科技(中国)有限公司，2017 2017年10月22日， 中国印刷 5991-8631ZHCN Agilent Technologies 柠檬酸的含量对食品的味道有很大影响，并且是某些食品品质的一项重要检测指标，例如其作为酸度调节剂在葡萄酒中的应用。在葡萄酒的酿造过程中，添加的柠檬酸可以帮助 SO2 防止葡萄酒变质、起抑菌作用、维持和稳定红葡萄酒的颜色。有人认为柠檬酸是安全无毒的，其实不然，经过多次实验证明，2.15 g/kg 的柠檬酸对小鼠的体重有明显影响，毒理实验也证实了柠檬酸对受试小鼠的肝脏有影响。GB 15037-2006 规定干、半干和半甜葡萄酒中柠檬酸的含量小于等于 1 g/L，甜葡萄酒中柠檬酸的含量小于等于 2 g/L。本文所述方法参照国标 GB/T 15038-2006 和进出口行业标准 SN/T 2007-2007 方法，建立了一种分析红酒中柠檬酸的高效液相分析方法。该方法使用 Agilent Poroshell 120 SB-AQ 极性改性反相色谱柱，可以长时间耐受 100% 水相流动相，并且在普通仪器上即可实现快速高效的分离，整个运行仅需 6 min，系统压力在 150 bar 以下。