食品牛奶中苯甲酸检测方案(固相萃取)

食品中苯甲酸检测的固相萃取方法 实验目的 本研究利用固相萃取法作为样品的前处理方法， HPLC 法作为分析方法，检测食品中苯甲酸含量。该方法可简化样品的前处理过程， 节省有机溶剂的使用，操作简便。 二、 实验目标物 苯甲酸 (CAS：65-85-0)。 三、 应用范围 本方法适用于食品中苯甲酸的检测的 HPLC 检测及确确。 四、参考标准 《GB/T23495-2009食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定高效液相色谱法》。 五、 实验材料 RONCHON MAX(PAX)混合阴离换交换固相萃取柱 60mg/3mL(20301 MA00603)。 六、 实验步骤 1、样品提取 准确角取牛奶10 g于50mL离心管中，加入0.25 mol/L 的亚铁氰化钾溶液2mL，摇匀，再加入1 mol/L的乙酸锌溶液2mL，摇匀，4000 r/min 离心 10 min。上清液待净化。 2、SPE 柱净化 (1)活化： RONCHON MAX(PAX)混合阴离子交换固相萃取柱使用前用 3mL 甲醇、3mL水活化。 (2)上样和洗脱：在RONCHON MAX(PAX)混合阴离子交换固相萃取柱上加入5mL备用样液，弃去流出液。用3mL2%氨水水溶液(v/v)、3mL甲醇淋洗，弃去淋洗液；抽干小柱；用2mL5%甲酸甲醇溶液(v/v)洗脱，收集洗脱液(整个上样、洗脱过程保持流速 1mL/min)。 (3)重新溶解：洗脱液过 0.45um滤膜，上机测试。 3、HPLC条件 设备： Waters Alliance 2695 色谱柱： Welch Ultimate XB-C18 (4.6×250mm， 5um) 检测器： Waters 2487紫外检测器 流动相：A：乙腈B：磷酸盐缓冲溶液(称取磷酸二氢钾 2.5g+磷酸氢二钾2.5g，加水溶解定容到1000mL) 洗脱方式：等度洗脱A：B=10：90 流速：1.0mL/min 检测波长：230 nm 进样体积：20uL 七、 实验结果 1、25 mg/kg牛奶中苯甲酸的添加回收结果 表1牛奶中苯甲酸25 mg/kg添加回收结果 名称 回收率(%) 平均回收率(%) RSD(%) 1 2 3 苯甲酸 97.58 97.88 100.44 98.63 1.59 2、添加水平为25 mg/kg牛奶中苯甲酸测测的液相色谱图 图1添加水平为25 mg/kg牛奶中苯甲酸检测的液相色谱图 本研究利用固相萃取法作为样品的前处理方法，HPLC法作为分析方法，检测食品中苯甲酸含量。该方法可简 化样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用，操作简便。