玉米中有机氯检测方案(固相萃取仪)

全自动固相萃取-气相色谱质谱法测定玉米中的16种有机氯 北京莱伯泰科仪器股份有限公司 前言： 有机氯农药是用于防治植物病、虫害的组成成分中含有氯元素 (​https:​/​​/​baike.baidu.com​/​item​/​%E6%B0%AF%E5%85%83%E7%B4%A0" \t "https:​/​​/​baike.baidu.com​/​item​/​%E6%9C%89%E6%9C%BA%E6%B0%AF%E5%86%9C%E8%8D%AF​/​_blank​)的有机化合物。常见的有机氯农药有艾氏剂、狄氏剂、滴滴涕、硫丹、氯丹、六氯苯、七氯等。主要应用于水果、蔬菜、棉花和粮食作物上。此类农药具有毒性大、难降解、水溶性低和酯溶性高的特点，可随食物链发生富集放大，对人体健康和生态环境造成很大危害。我国对此类农药制定了严格的限量标准。 本实验参考“GB 23200.9-2016 粮谷中475种农药及相关化学品的残留量的测定 气相色谱∕质谱法”建立了使用莱伯泰科高效压力溶剂萃取系统（HPSE）提取玉米中的16种有机氯，SPE1000全自动固相萃取系统净化后用气质联用仪进行检测的一整套方法。 关键词：玉米 GB 23200.9-2016 有机氯 SPE1000 HPSE 1、实验部分 1.1仪器和设备 1.1.1 HPSE高效压力溶剂萃取系统（莱伯泰科公司）； 1.1.2 SPE 1000全自动固相萃取系统 （莱伯泰科公司)； 1.1.3 ET浓缩仪（莱伯泰科公司）； 1.1.4 7890B气相色谱-5977B质谱联用仪（安捷伦公司）； 1.2 试剂和标准品 1.2.1甲苯（分析纯）； 1.2.2乙腈（色谱纯）； 1.2.3正己烷（色谱纯）； 1.2.4高效压力溶剂萃取系统溶剂：乙腈； 1.2.5有机氯标准贮备液（100mg/L）溶剂：甲苯正己烷（5+5） 1.2.6有机氯标准中间液（5mg/L）：取0.5ml标准储备液（1.2.5）于10ml容量瓶中，用正己烷定容至刻度； 1.2.7 C18固相萃取柱（2g/10mL，LabTech）； 1.2.8 Carb-NH2 固相萃取柱 （500mg/500mg/6mL，LabTech） 1.2.9硅藻土（置于马弗炉中450℃烘4h，冷却后贮于玻璃瓶中于干燥器内保存） 1.3实验过程 1.3.1 样品 扦取玉米样品经粉碎机粉碎，样品全部过425μm的标准网筛，混匀，制备好的试样均分成两份，装入洁净的盛样容器内，密封并标明标记。 1.3.2 提取 称取 10g 玉米试样（精确至 0.01g）与 10g 硅藻土混合，移入高效压力溶剂萃取系统(1.1.1)的 34mL 萃取罐中，在10.34MPa 压力、80℃条件下，加热 5min，用乙腈静态萃取 3min，循环 2 次，然后用池体积 60%的乙腈（20.4mL）冲洗萃取池，并用氮气吹扫 100 秒。萃取完毕后，将萃取液混匀，取萃取液体积的四分之一待净化。萃取液收集到60mL收集管中。 1.3.3 净化 采用全自动固相萃取方式，将待净化液移入SPE1000中，使用C18固相萃取柱（1.2.7）按照图1方法进行净化实验。 图1 C18净化方法 1.3.4 浓缩 　　　将收集液置于ET浓缩仪（1.1.3）中，浓缩至2ml，进行第二步净化。 1.3.5 净化 　　将待净化液移入SPE1000中，使用Carb-NH2 固相萃取柱（1.2.8）按照图2方法进行净化实验。 图2 Carb-NH2净化方法 1.3.6 浓缩 将收集液，置于ET浓缩仪（1.1.3）中，浓缩至1ml，用5ml正己烷进行溶剂置换两次，最后使样液体积为1ml，供GCMS分析。 1.4样品加标回收率实验 分三个级别进行加标，加标浓度分别为20ng/ml、50ng/ml、100ng/ml。 然后按照1.3.1～1.3.3方法进行实验，测定加标回收率。并进行4个平行样品实验，测定精密度。 1.5 仪器条件 色谱柱：HP-5MS，30m*0.25mm*0.25μm；进样口温度：250℃；不分流进样；载气流速：1.0mL/min；恒流模式；进样量：1.0μL；柱温：60℃保持2min，以15℃/min升至210℃；再以6℃/min升至230℃，保持8min；后程序升温至280℃保持5min。 离子源：电子轰击源，70eV；四极杆温度：150℃；离子源温度：230℃；辅助加热温度：280℃；溶剂延迟时间：9.0min；扫描模式：SIM（化合物保留时间，定量和定性离子见下表） 表1 有机氯定量和定性选择离子 序号 化合物中文名称 RT 定量离子 定性离子1 定性离子2 1 α-六六六 12.5 183 181 219 2 β-六六六 12.9 181 183 219 3 γ-六六六 13.0 183 181 219 4 δ-六六六 13.4 183 181 219 5 七氯 14.3 100 272 274 6 艾氏剂 14.9 263 66 293 7 环氧化七氯 15.7 353 355 81 8 а-硫丹 16.6 195 339 341 9 p,p'-DDE 17.3 246 318 176 10 狄氏剂 17.1 281 263 378 11 异狄氏剂 18.0 263 281 378 12 β-硫丹 18.3 195 207 237 13 o,p'-DDD 18.5 235 237 165 14 硫丹硫酸酯 19.9 272 387 229 15 p,p'-DDT 19.9 235 237 165 16 甲氧滴滴涕 23.0 227 228 274 2、实验结果 2.1 16种有机氯化合物色谱图 图2 有机氯标准液总离子流谱图 图3 有机氯基质标准液总离子流谱图 2.2 空白样品色谱图 图4 样品空白总离子流谱 2.3 加标样品色谱图 图5 样品加标总离子流重叠图 2.4 加标样品回收率 表2 不同浓度的加标回收率 物质名称 回收率（%） 20ng/ml 50ng/ml 100ng/ml α-六六六 119.1 93.2 76.5 β-六六六 103 97.7 99.0 γ-六六六 98.5 93.6 85.4 δ-六六六 115.4 94.3 92.7 七氯 117.8 100.0 93.2 艾氏剂 114.2 97.9 81.4 环氧化七氯 105.6 104.1 98.3 а-硫丹 113.15 91.8 75.2 p,p'-DDE 103.35 100.5 92.1 狄氏剂 99.5 94.3 90.1 异狄氏剂 120.5 102.5 99.8 β-硫丹 109.65 101.9 87.8 o,p'-DDD 111.5 100.5 98.7 硫丹硫酸酯 102.15 91.0 80.8 p,p'-DDT 105.35 110.0 108.5 甲氧滴滴涕 112.75 103.7 101.0 2.5精密度 表3 4组浓度50ng/ml 加标样品重复性 物质名称 50ng/ml 平均值（%） RSD (%) 1 2 3 4 α-六六六 44.3 50.2 49.7 42.1 46.6 8.6 β-六六六 48.2 53.4 46.6 47.1 48.8 6.4 γ-六六六 44.7 50.4 50.1 42.0 46.8 8.9 δ-六六六 48.0 49.9 49.7 41.1 47.2 8.8 七氯 47.0 53.5 54.9 44.7 50.0 9.9 艾氏剂 44.7 54.3 51.8 44.9 48.9 10.0 环氧化七氯 49.5 57.8 54.1 46.8 52.1 9.4 а-硫丹 43.7 44.5 47.8 47.6 45.9 4.6 p,p'-DDE 45.2 54.3 54.4 47.1 50.3 9.5 狄氏剂 46.3 48.7 51.2 42.3 47.1 8.0 异狄氏剂 48.4 54.1 56.4 46.1 51.3 9.4 β-硫丹 48.0 50.9 49.3 55.5 50.9 6.4 o,p'-DDD 47.8 53.1 54.4 45.8 50.3 8.2 硫丹硫酸酯 42.1 49.8 45.6 44.4 45.5 7.1 p,p'-DDT 51.5 58.9 54.3 55.2 55.0 5.6 甲氧滴滴涕 47.3 55.7 56.2 48.2 51.9 9.2 3、结论 由表2表3可知，使用高效压力溶剂萃取萃取-全自动SPE净化-气相色谱质谱法测定玉米中的16种有机氯，样品加标回收率为75.2%~119.1%， RSD在10%以下。 综上所述，全自动固相萃取-气相色谱质谱法测定玉米中的有机氯这一实验中，SPE 1000全自动固相萃取系统 、HPSE 高效压力溶剂萃取系统，具有良好的回收率和平行性，适合玉米中有机氯的检测。 参考标准： 1、GB 23200.9-2016 粮谷中475种农药及相关化学品的残留量的测定 气相色谱∕质谱法 有机氯农药是用于防治植物病、虫害的组成成分中含有氯元素的有机化合物。常见的有机氯农药有艾氏剂、狄氏剂、滴滴涕、硫丹、氯丹、六氯苯、七氯等。主要应用于水果、蔬菜、棉花和粮食作物上。此类农药具有毒性大、难降解、水溶性低和酯溶性高的特点，可随食物链发生富集放大，对人体健康和生态环境造成很大危害。我国对此类农药制定了严格的限量标准。     本实验参考“GB 23200.9-2016 粮谷中475种农药及相关化学品的残留量的测定 气相色谱∕质谱法”建立了使用莱伯泰科高效压力溶剂萃取系统（HPSE）提取玉米中的16种有机氯，SPE1000全自动固相萃取系统净化后用气质联用仪进行检测的一整套方法。