蔬菜中抑霉唑检测方案(液相色谱仪)

[应用纪要]THE SCIENCE OF WHAT'S POSSIBLE. [应用纪要] Waters Dominic Roberts、 Mike McCullagh、Sara Stead、Gareth Cleland'、Dimple Shah'、Lauren Mullin'、Jennifer Burgess沃特世公司，美国马萨诸塞州米尔福德 方案优势 配备UNIFITM的农药筛查应用解决方案设计用于可靠地报告样品中是否存在最大残留限量(MRL)的农药残留物。该解决方案简化了数据分析定制流程使用带有灵活报告模板的科学库功能实现对复杂基质的快速分析。 沃特世解决方案 基于UNIFI的农药筛查解决方案 ACQUITY UPLCI-Class系统 Xevo°G2-SQTof质谱仪 关键词农药筛查、食品基质、QTof 引言 目前全球常用的农药有500多种。此外，世界上的各个国家都制定了有关农药许可和最大残留限量((MRL)的法规。随着全球贸易发展，对于能够高效地检测残留物超标的多农残筛查方法以维护消费者安全利益的需求也凸显出来。在质谱和分离技术领域的最新进展显示出先进样品提取技术可显著提高分析结果。例如可改善质谱灵敏度以及提高UPLC分析的峰容量。本研究展示了新型台式QTof平台，该平台将StepWavelM技术和结合了UNIFI的QuanTofIM技术整合在一起。UNIFI是一种革命性的科学信息系统，专门设计用于非目标精确质量筛查应用，使得科学家能够对更多样品中不断增加的残留物和污染物进行分析报告。UNIFI可采集高分辨的、精确质量的LC-MS数据，并在单一软件环境中进行快速的处理对残留物进行确证和定量。 采集测定精确质量的全扫描数据的优势是易于解读，可查阅历史数据以及进行非目标筛查实验。 StepWave技术在提高灵敏度的同时，还具有常规农药定量筛查所需的宽泛的线性动态范围。这项在Tof硬件技术中的发展已提高了数据的精度和准确度，拍动了更加智能的数据处理软件系统的创新和优化。 在本应用纪要中通过分析一个独立的能力测试样品，对新型农药筛查解决方案的性能进行了评估。通过比较中位值和Z比分值报告新农残筛查方法的性能。 实验条件 时间 流速 %A %B (分钟) (mL/min) 1. 初始 0.45 98 2 2. 0.25 0.45 98 3. 12.25 0.45 99 4. 13.0 0.45 99 5. 13.1 0.45 98 2 6. 15 0.45 98 2 MS条件： 质谱仪： Xevo G2-S QTof 电离模式： ESI+ 毛细管电压： 1kV 取样锥孔电压： 20V 离子源温度： 120℃ 脱溶剂温度： 550℃ 脱溶剂气体流速： 1000L/H 参比质量： 亮氨酸脑啡呔 [M+H]+=556.2766 采集范围： m/z 50~1200 低能碰撞能量： 4 eV 高能渐变碰撞能量：：10~45eV 样品制备和分析条件 样品萃取物，与基质匹配的校准物，用于EU-RL能力测试 (FV-13 2011)的质控样品由比利时布鲁塞尔的WIVISP提供。制备6个不同浓度、含有135种农药的混合农药标准品。根据标准液-液萃取方案制备大批柑橘空白萃取物。完成溶剂萃取步骤后，将萃取物分成数等份，加入50pL相应的加标溶液，得到相当于1、5、10、20、50、100 pg kg 的浓度，涵盖了欧盟“适用各种情形”的10ug kg 农药残留物的最大残留限量。分析前，用水将加标溶剂萃取物稀释10倍。得到的最终溶液浓度为0.1、0.5、11.0、2.05.0、10.0 ngmL。 结果与讨论 在UNIFI内，使用科学数据库对农药进行筛查。科学数据库能够根据准确的母离子的质量(包括常见加合物如Na*、K*、NH)、保留时间、碎片离子，以及同位素模型及强度进行鉴别。使用多个化合物标准鉴别农药的能力使分析人员自信地进行鉴别；同时，通过使用用户自定义的过滤程序和工作流程步骤，加快审核进程。工作流程步骤与用户自定义的过滤程序联合使用提供了一种在单一软件环境中对定性分析和定量分析进行高效审核的方法。图1是可以由用户定义的示例视图。本例显示从当前进样中被选择的农药的提取离子色谱，并同时显示低能量(母离子)和高能量(碎片离子)的图谱。 图1UNIFI组分汇总表(上方数据栏)显示柑橘样品中鉴别出的组分。MS数据同时采集了甲霜灵母离子和碎片的图谱(下方数据栏)。 [应用纪要] 此外汇总表也可由用户自定义设置，将其包括在内可以显示进一步的信息(例如质量误差、鉴别出的加合物、保留时间和同位素匹配)，以帮助确认鉴别出的分析物。样品中鉴别出的农药的预期质量和结构可以在组分图中快速浏览到，如图2所示。UNIFI的另一个实用功能是提供汇总图，如图3的示例视图所示。该绘图使用户可以看到整个样品组内的农药的浓度，实现了对空白和样品中存在的任何农药进行快速查看，并确定这些进样的浓度之间是否有差异。 图2UNIFI组分图视图显示了样品 (FV-13 2011)中鉴别出的农药汇总及其相对强度。各个峰以预期的准确质量和结构标识。 用户自定义的过滤程序实现了对符合特定标准的匹配农药的选择。通过这种方法，用户可以选择如何分步审核这些数据。这些鉴别出的具有高置信度(由用户定义)的农药可以被快速进行审核。如果存在不符合规定标准的匹配农药，则可以将这些农药抽提出来，采用其他的信息进行审核。对未符合合格限度的标准进行标记，以便能够易于识别。可以标记的示例标准包括精确质量数漂移或可疑的同位素比率。除对农药是否存在进行筛查以外，农药的定量也可在同一视图中进行配置。这样使分析人员能够排除那些高于作用浓度(例如最大残留限量：((MRL)的一半)以上的农药，通过确保不合格的样品能够进行准确检测和报告提高了实验室的工作效率。 图3UNIFI汇总图视图显示了性能测试中抑霉唑在整个校准标准品范围内的响应。该汇总图可以进行自定义，显示对用户重要的任何参数，例如一个批次内的质量差异或者分析物的计算浓度。 使用适合于液相色谱检测的农药目标列表对柑橘萃取物进行筛查，确定是否存在农药残留物。对于鉴别出的每种农药残留物使用外标校准法测定其浓度，将结果与公布的中值进行比较，这些中值从参加欧盟参考实验室性能测试 (FV-13 2011) 的大约150个实验室中得到。如表1所示所有8个液相可检分析物能够使用新的农药筛查方案进行正确鉴别并定量。此外样品中的两个低浓度的气相可检分析物也被检测出来。还对这些分析物的Z-分值进行了计算(根据性能测试组织者使用的公式计算)。在检出的10个分析物中，9个分析物的Z-分值小于2.0并被列为“合格”。其中的一种最常使用气相进行分析的分析物EPN得到Z-分值为2.7被列为“可疑。对于所有检出的10个分析物，质量精度(母离子和碎片)小于3 ppm(满足SANCO 12495要求的5ppm)。相关系数值表明，仪器的定量性能在存在复杂基质的情况下表现优秀。 残留物标记 分析物 指定值 检测值 Z-分值 Z-分值归类 相关系数 质量精度 (mg/kg) (mg/kg) (R2) \ppm) 苯菌灵和多菌灵的总 多菌灵 1.25 0.97 -0.9 合格 0.989 1.49 和(以多菌灵表示) EPN EPN* 0.42 0.70 2.7 可疑 0.985 -1.75 抑霉唑 抑霉唑 1.30 1.36 0.2 合格 0.999 0.73 S和R异构体的总和 茚虫威 0.79 0.94 0.7 合格 0.993 -0.32 灭多虫和硫双灭多威 灭多虫 0.20 0.10 -1.9 合格 0.998 -0.95 的总和(以灭多虫表 示) 欧杀灭 欧杀灭 0.13 0.14 0.3 合格 0.992 1.69 仅母体化合物 咪鲜胺 0.30 0.43 1.8 合格 0.984 -0.93 蚊蝇醚 蚊蝇醚* 0.44 0.50 0.6 合格 0.994 0.30 多杀菌素A和多杀菌 多杀菌素 0.61 0.89 1.8 合格 0.998 -0.68 素D的总和(以多杀 菌素表示) 涕必灵 涕必灵 0.81 0.85 0.2 合格 0.990 2.27 表1相对于公布的中值计算结果在欧盟参考实验室性能测试样品(柑橘FV-132011)中鉴别出液相色谱可检农药的筛选查法的性能对比。*通常使用气相色谱进行分析的化合物。 分析物特定信息可用于残留物的确认(例如元素组成和碎裂途径))，这些信息可由日常一次进样中采集的精确质量数据生成。通过新型的科学信息系统对同时得到的精确质量母离子和碎片离子数据进行处理，使农药药留物的鉴定具有很高的置信度和很低的假阳性率。 抑霉唑的标准系列数据如图4所示。在基质萃取物中通常可得到量级大于或等于0.99的相关系数和小于5%的残差值。同时，以图示给出了组分汇总信息、组分详细信息以及组分绘图信息，提供了易于理解的信息，进一步提高分析结果的置信度并加快审核进程。 图4UNIFI组分图(上方数据栏)显示了测试样品中鉴别出的农药残留物以及抑霉唑校准系列(1~100ppb) 的线性和相关系数R=0.999. 硬件和软件技术的发展促进了农药残留物筛查的稳定Tof解决方案的发展。这些技术的发展促使Waters 农药筛查应用解决方案实现了最大残留限量浓度下的复杂基质的日常检测、鉴别和定量分析。在本研究中，研究的动态范围内得到小于5%的残差值和2ppm量级的质量准确度。Z分值(s2)表明，适用液相色谱检测的农药与欧盟参考实验室性能测试样品 (FV-132011)之间的相关性良好。 所有鉴别出的农药结构解析信息是同时采集母离子的精确质量和碎片离子的精确质量信息获得。通过新型的科学信息系统对同时得到的精确质量的母离子和碎片离子数据进行处理，使农药残留物的鉴定具有很高的置信度和很低的假阳性率，从而加快审核进程，最终提高实验室通量。 THE SCIENCE OF WHAT'S POSSIBLE. Waters、ACQUITY UPLC、ACQUITY和Xevo是沃特世公司注册商标。UNIFI、StepWave、 QuanTof和The Scienceof What's Possible是沃特世公司商标。其他所有商标均归各自的拥有者所有。 O2012年沃特世公司。印制于中国。2012年11月720004491ZH AG-PDF 沃特斯中国有限公司沃特世科技(上海)有限公司 北京：010-52093866 上海：021-61562666 广州：020-2829 6555 成都：028-65545999 香港：852-29641800 免费售后服务热线：800(400)8202676Www.waters.com 结合UNIFI科学信息系统的新型质谱筛查方法用于食品中法规限量农药残留的常规分析