玉米中赭曲霉毒素 A(OA)检测方案(固相萃取仪)

Best ValueGuaranteed Product QualityInnovation to Benefit Customers Agela Technologies (GB/T 25220-2010) 离子交换固相萃取-HPLC 检测粮食赭曲霉毒素A(OA)研究 应用编号： CU1010 参考《GB/T 25220-2010 粮食中赭曲霉毒素A的测定高效液相色谱法》 1.样品处理 1.1提取用试剂 提取液：含20%0.1 mol/L 氢氧化钾溶液60%甲醇水溶液； 淋洗液：含30%0.1mol/L氢氧化钾溶液50%乙腈水溶液； 洗脱液：甲醇：乙腈：甲酸：蒸馏水=4：5：0.5：0.5 1.2提取 a)玉米：将样品粉碎，称取玉米粉 10 g， 加入50 mL氯仿，震荡3~5 min，用滤纸过滤，取滤液 10 mL 进入一个100 mL 烧底烧瓶中，于60℃水浴中旋转蒸发至近干，用20mL石油醚迷解残渣，加入10 mL提取液，震荡3~5 min，分层后，用滤纸过滤，取下层提取液 5 mL 进行固相萃取。 b)糙米、小麦、小麦粉和大豆：将样品粉碎，称取粉碎样品10g， 加入50mL提取液，震荡3~5 min， 用滤纸过滤，取取液10 mL进入一个100mL平底烧瓶中，加入20 mL石油醚，震荡3~5min，分层后，用滤纸过滤，取下层提取液5 mL 至Qdaura 卓睿全自动固相萃取仪上样管中进行固相萃取操作。 2.固相萃取净化 CleanertPAX 固相萃取柱置于 Qdaura 卓睿全自动固相萃取仪中，上样管至于对应位置，设定操作程序如下：5mL甲醇，3mL提取液活化，加样5mL， 10 mL淋洗液淋洗，吹干，最后用5mL洗脱液洗脱OA， 收集(以上操作流速均为1mL/min)。收集液于60℃水浴中旋转蒸发至干，用1mL流动相溶解残留物，经滤器过滤后上液相色谱检测。 3.色谱条件 色谱柱： VenusilASB C18，，4.6mm×250 mm， 5 um 保护： Venusil"ASB C18， 4.6 mm×10 mm， 5 um 流动相：乙腈：水：乙酸=48：51：1； 检测器波长：激发光333 nm， 发射光460nm； 进样量：25uL；流流：1mL/min；柱温：30℃ 4.结果 以小麦粉、小麦、玉米、糙米和大豆为研究对象，分别作三个不同浓度OA 添加水平，这三个浓度分别为0.8 ug/kg、4 ug/kg、10 pug/kg，每个浓度水平作6次平行性检测。检测回收率和精密度数据见表1、表2和表3；典型色谱图见图3。 表1添加OA 浓度为 0.8 pg/kg 时各种粮食回收率和精密度 粮食 各个平行试验回收率(%) 平均回收率(%) RSD(%) 1 2 3 4 5 6 小麦粉 101.8 107.0 101.4 89.1 107.6 93.4 104.1 4.93 小麦 98.2 94.6 90.2 102.5 89.9 93.4 94.8 5.13 玉米 1130.3 112.2 100.5 98.5 101.9 105.7 104.8 5.13 糙米 86.7 89.0 90.9 85.7 90.0 86.7 88.2 2.36 大豆 101.2 100.9 92.9 92.2 99.4 98.4 97.5 4.07 表2添加OA浓度为 4 pg/kg 时各种粮食回收率和精密度 粮食 各个平行试验回收率(%) 平均回收率(%) RSD(%) 1 2 3 4 5 6 小麦粉 96.8 92.8 83.7 85.5 89.8 92.6 90.2 5.34 小麦 101.0 99.3 98.8 106.2 100.2 98.6 100.7 2.78 玉米 91.5 92.7 90.8 86.8 87.7 91.3 90.1 2.60 糙米 90.3 85.7 94.1 96.3 96.1 95.8 93.0 4.56 大豆 89.5 93.8 93.7 89.4 89.1 88.9 90.7 2.61 表3添加OA浓度为 10pg/kg 时各种粮食回收率和精密度 粮食 各个平行试验回收率(%) 平均回收率(%) RSD(%) 1 2 3 4 5 6 小麦粉 98.0 95.8 92.2 78.2 95.6 89.8 91.6 7.85 小麦 85.9 91.7 90.1 86.0 90.5 88.9 88.8 2.71 玉米 91.5 93.3 83.3 82.1 88.1 90.6 88.1 5.22 糙米 96.2 87.9 92.6 91.1 95.4 94.7 93.0 3.35 大豆 99.0 95.3 102.8 97.2 98.4 91.0 97.3 4.05 图1小麦中OA检测典型色谱图 5. 订货信息 产品名称 规格包装 订货号 Qdaura"卓睿全自动固相萃取仪 4通道24位 SPE-40 LC-10F 高效液相色谱仪 10mL/min，梯度系统，200-800 nm 双波长检测器 FL-LC010GS CC-100分析型色谱柱温箱 温控范围：5-70℃；可安装1-2支300 mm 色谱柱 CC-100 Cleanert"PAX 固相萃取柱 200 mg/6 mL， 30/pk AX2006 VenusilASB C18液相色谱柱 4.6mm×250mm， 5 um VS952505-0 VenusilASB C18保护柱 4.6 mmx10 mm， 5 um VS950105-0 针式过滤器(Nylon) 0.22 um， 直径13 mm， 200/pk AS021320 一次性无针头注射器 5mL， 100/pk ZSQ-5ML 1.5 mL样品瓶 短螺纹透明带书写32×11.6 mm， 100/pk 1109-0519 1.5mL样品瓶盖 9mm 中心孔蓝盖，红色橡胶/米色 PTFE 隔垫，45.Shore A 1.0 mm， 100/pk 0915-1819 www.agela.com.cn—