地沟油中苯并芘检测方案(固相萃取)

上海安谱实验科技股份有限公司ANPEL Laboratory Technologies(Shanghai) Inc.100位专业人员全程服务2000万货值库存保证6000家客户口碑鉴证 版本号： PQ-2014120501-V1 上海安谱实验科技股份有限公司ANPEL Laboratory Technologies(Shanghai) Inc. 15年专注实验室色谱耗材业务 他沟沟油中黄曲霉毒素和苯并芘的检测 近几年来，地沟油事件频频爆发，严重危害人们的身心安全。2014年9月，正值中秋佳节，台湾地沟油事件震惊两岸。 “地沟油”是一种质量极差、极不卫生的非食用油。一旦食用“地沟油”，它会破坏人们的白血球和消化道黏膜，引起食物中毒，甚至致癌的严重后果。 目前没有特定科学方法检测和鉴别用“地沟油”制造的食用油。国际上一般会检测如苯并(a)芘、黄曲霉毒素和金属杂质等含量，香港食安中心和台湾当局均采取同类检测方法。 上海安谱一直致力于食品安全检测， 特推出地沟油中黄曲霉毒素和苯并芘的检测整体方案。 一、油中黄曲霉毒素的检测 1.1样品前处理 ·称取25g样品及2.5g氯化钠并转移到干净的三角瓶中。 加50ml 80%甲醇/水溶液。 ·漩涡混合震荡1mim， 4000r/min 离心6min。 ·取甲醇/水溶液至少10ml。 ·取5ml萃取液加入20ml水，彻底混合。 ·用玻璃纤维滤纸过滤至澄清，取10ml加入到免疫亲和柱 (SBHL-20-0383)中。 1.2使用免疫亲和柱纯化 1.2.1检测前的准备 ·将所需的免疫亲和柱在使用前回温至室温(20-25℃)。 ·免疫亲和柱的上下端有塑料塞子，在使用时可以取下。 ·在使用的过程中避免免疫亲和柱的干燥。例外情况为1.2.2.中第4步(洗脱前短暂的排空)和5步(洗脱后的完全排空)。 ·过高的压力或真空提取设备产生的负压会压紧凝胶而导致回收率降低。 1.2.2检测操作 。将10ml注射器连接于免疫亲和柱上端。 ●处理好的样品液以1-2滴/秒的速度通过亲合柱，弃掉流出的液体。 ·以10ml水淋洗柱子两次，弃掉流出的液体。 ·利用真空设备压入空气(约10秒)，确保所排除所有的液体。 ·用1ml甲醇缓慢洗脱(流速约为2-3秒每滴)，残留的洗脱液使用空气压出或真空 抽出(30秒)并将洗脱液收集于干净的比色皿或其他容器中用于检测。 17869g0 1 安谱总部 地址：上海市斜土路2899弄甲号B幢606室 网址：www.anpel.com.cn Tel：021-54890099 Fax： 021-54248311 北京办事处 广州办事处 深圳办事处 武汉办事处 成都办事处 南京办事处 Tel： 010-83130651 Tel： 020-38811673 Tel：0755-26075073 Tel：027-59812739 Tel： 028-85254001/2 Tel： 025-83737312/83716726 Fax：010-83130098 Fax：020-38811631 Fax：0755-26075056 Fax：027-59812738 Fax：028-85254001*209 Fax：025-83701408 15年专注实验室色谱耗材业务100位专业人员全程服务2000万货值库存保 证 版本号：PQ-2014120501-V1 二、油中苯并(a)芘的检测 2.1样品前处理 称取0.5g油样，加入3mL正己烷涡旋混合震荡溶解10s，待净化。 SPE操作过程： 活化：依次用5ml二氯甲烷，5mL正己烷活己小柱(SBEQ-CA4854) 上样：将待净化液上样到小柱上，然后再用2mL正己烷润洗样品瓶，然后也上样到柱上 淋洗：用10ml正己烷淋洗小柱 洗脱：5ml二氯甲烷，并收集 浓缩定容：将收集液在40℃下氮气吹干，用1mL乙腈定容，超声1min，再漩涡混合10s，过0.22um亲水PTFE针式滤器(SCAA-114)，待上机检测； 2.2液相色谱法 2.3实验谱图 色谱条件： 色谱柱： Athena C18-WP液相色谱柱4.6*150mm， 5um 流动相：乙乙：水(95：5，v/v) 流速：1.0mL/min； 荧光检测器：激发波长384nm，发射波长406nm 柱温：35℃ 进样量：20uL； 2.4实验数据 5ppb 10ppb 20ppb 1 101.35% 101.10% 99.52% 2 102.47% 106.01% 110.75% 3 108.52% 101.38% 97.10% 4 104.03% 101.28% 97.17% 三、实验中所用耗材 货号 名称 规格 品牌 价格/元 SBHL-20-0183 黄曲霉毒素总量免疫亲合柱 1ml/支，25支/盒 Beacon 3350 SBHL-20-0383 黄曲霉毒素总量免疫亲合柱 3ml/支，20支/盒 Beacon 3350 SBEQ-CA4854 BAP苯并(a) 芘 专用SPE小柱 500mg， 6ml/30pcs CNW 980 CDGG-013938-01-1ml 黄曲毒素B1标准品(定制) 3mg/L于苯：乙腈(98：2)， 1ml于Certan Vial，-10度 o2si 756 CDGG-116870-01-1ml 黄曲毒素B1、B2、G1、G2、混标 (GB/T5009.23-2006) 不同浓度于甲苯：乙腈(98：2)，1ml于Certan Vial，-10度 o2si 693 CDCT-C20635000 苯并(a)芘标准品 纯品型，有证书， 10mg Dr 360 CDGG-010020-01 苯并(a)芘标准品 100mg/L于乙腈， 1ml(6℃保存) o2si 288 SBEQ-CRO002 SPE小柱连接件【1，3，6ml】PP材质 12个/包 CNW 240 SCAS-1825-047 Whatman GF/F玻璃纤维滤纸(无粘合剂)，0.7um 47mm， 100片/盒 whatman 887 SCAA-114 亲水PTFE针式滤器 13mm*0.22um， 金色，100只/罐 ANPEL 100 QBAA-002012 2ml无针注射器 100只/包 ANPEL 60 QBAA-002014-50 10ml无针注射器 50只/包 ANPEL 50 安谱总部 地址：上海市斜土路2899弄甲号B幢606室 网址：www.anpel.com.cn Tel：021-54890099 Fax： 021-54248311 北京办事处 广州办事处 深圳办事处 武汉办事处 成都办事处 南京办事处 Tel： 010-83130651 Tel：020-38811673 Tel： 0755-26075073 Tel：027-59812739 Tel： 028-85254001/2 Tel： 025-83737312/83716726 Fax：010-83130098 Fax：020-38811631 Fax：0755-26075056 Fax：027-59812738 Fax：028-85254001*209 Fax：025-83701408