药用辅料硫酸铵中氯离子检测方案(离子色谱仪)

2混合标准贮备溶液4 电导检测； AS19色谱柱；氯离子；硝酸根离子；磷酸根离子；阀切换；氢氧化钾梯度淋洗 建立抑制型电导检测离子色谱法测定药用辅料硫酸铵原料中痕量氯离子、硝酸根、磷酸根，控制硫酸铵中阴离子杂质含量。 引言 硫酸铵是药品生产过程中最常用的一种辅料。硫酸铵的纯度是判定其品质优劣的首要指标。硫酸铵中常见的杂质阴离子有氯离子、磷酸根和硝酸根，这些杂质阴离子过去在药典中多采用滴定比色等化学方法来测量，该类方法灵敏度低、专属性差、分析时间长以及误差大等缺点。离子色谱测定阴离子专属性好，灵敏度高，且一针进样可以同时测定多种阴离子。本实验采用阀切换方法，在第一次分离中将大部分的硫酸根基质去除，并富集收集氯离子、磷酸根和硝酸根；在第二次分离中将富集到的阴离子切换到同一根色谱柱中，实现分离和定量。由于难以找到不含氯离子、磷酸根和硝酸盐的空白样品，因此本实验采用的是标准加入法。 仪器 离子色谱仪 (Thermo ScientificM Dionex'M ICS-2100 免试剂系列)，配置： 一等度泵 一真空脱气机 一淋洗液发生器 一柱温控制箱 一高高压六通进样阀 一电导检测器 AS-AP自动进样器 (Thermo ScientificM DionexM) KOH淋洗液发生罐 (Thermo Scientific DionexM EGCⅢ， P/N074532) 试剂和标准品 去离子水，18.2 MQ-cm (Thermo Scientific GenPure Pro UV-TOC，P/N 50131948) 水中氯离子(国家标准物质研究中心，浓度1000mg/L) 水中硝酸根(国家标准物质研究中心，浓度1000mg/L) 水中磷酸根(国家标准物质研究中心，浓度1000mg/L) 标准溶液的制备 标准贮备溶液1 精密吸取氯离子标准溶液1mL，置10mL量瓶中，加去离子水稀释并定容至刻度，摇匀，备用。 标准贮备溶液2 精密吸取硝酸根标准溶液1mL， 置10mL量瓶中，加去离子水稀释并定容至刻度，摇匀，备用。 标准贮备溶液3 精密吸取磷酸根标准溶液1mL，置10mL量瓶中，加去离子水稀释并定容至刻度，摇匀，备用。 分别精密吸取标准贮备溶液1(氯离子100 mg/L)1mL、标准贮备溶液2(硝酸根100mg/L)1mL、标准贮备溶液3(磷酸根 100 mg/L) 1 mL 同置10mL量瓶中，加水稀释并定容至刻度，摇匀，备用。 混合标准系列溶液 分别精密吸取混合标准贮备液4(氯离子、硝酸根、磷酸根各10mg/L) 0.5、1.0、2.0、4.0、10mL置5个100mL的量瓶中，加25mg/mL的样品溶液稀释，并定容至刻度，摇匀，得到浓度分别为0.05、0.1、0.2、0.4、10mg/L氯离子、硝酸根、磷酸根的混合标准系列溶液。 样品前处理 样品：取样品约0.5g，置于20mL量瓶中，加水至刻度，摇匀，过0.22 um 滤膜，取续滤液，待测。 分析柱： lonPac AS19I9(250×4mm，7.5 um)保护柱： lonPac AG19(50×4 mm，11um) (P/N062887)淋洗液： KOH梯度淋洗，由KOH 淋洗液发生器产生梯度程序：0-15min，10 mmol/L， 15.1-28min， 30 mmol/L，28.1-43min， 10 mmol/L43.1-49 min， 40 mmol/L， 49.1-53 min， 14mmol/L流速：1.0mL/min (P/N 062885) 进样体积：25uL 柱温：30℃ 检测方式：抑制型电导检测， ASRS 300 (4mm)电解自再生抑制器 (P/N064554))，自循环模式，99mA 系统压力：~2000psi 背景电导：<0.7 us 噪音：<2.0nS 运行时间： 53 min 结果与讨论 色谱柱的选择及淋洗液条件优化 尝试 lonPac AS11-HC 和 lonPac AS18色谱柱，但在上述两种色谱柱中由于硫酸根的浓度较高，硝酸根离子与硫酸根离子的色谱峰相距较近；在高容量的 lonPac AS19色谱柱中，硝酸根和硫酸根的色谱峰离开较远，利用阀切换可以去除大部分硫酸根离子基质，捕获硝酸根和磷酸根离子；因此最终选择各离子分离好 lonPac AS19 色谱柱。 分离氯离子和硝酸根离子及硫酸根离子时，为了达到更好的分离效果，采用等度将氯离子和硝酸根分离，之后迅速将氢氧化钾浓度调高，洗钥高浓度的硫酸根。最后在硫酸根即将被完全洗脱时，再用阀切换技术将磷酸根捕获到浓缩柱中，用10mmol KOH等度将捕获的氯离子和硝酸根洗脱。最后，为了提高灵敏度将 KOH 浓度提高至40mmol 将磷酸根洗脱。 在上述色谱条件下，标准品的色谱图如图1所示。 图1.标准溶液色谱图(氯离子，硝酸根，磷酸根0.4 mg/L) 方法的重现性、线性范围和检出限 表1.标准曲线的线性方程、线性范围和检出限 将其中一个浓度标准系列溶液连续进样7针，氯离子和硫酸根离子保留时间的 RSD 均小于0.2%，峰面积的RSD均小于1.0%。将上述标准系列溶液分别进样分析后，以峰面积为纵坐标，以浓度为横坐标建立标准曲线，各离子的线性范围、回归方程、相关系数和检出限均见表1， 分析物 标准拟合方程 线性范围(mg/L) 相关系数(r) 检出限(mg/L) CI v=0.1354x+0.009 0.05-1.0 99.7626 0.015 NO， v=0.081x-0.0003 0.05-1.0 99.8319 0.025 PO y=0.048x+0.07 0.05-1.0 99.9131 0.030 实际样品分析及加标回收试验 表2.实际样品测定结果 取硫酸铵样品，按上述样品前处理方法处理和上述色谱条件进样分析，其测定结果见表2，色谱图见图2。 No. Peak Name 含量 mg/kg 1 CI 3 2 NO： 2 3 PO 6 图2.实际样品分析色谱图 结论 离子色谱法测定硫酸铵中痕量阴离子，方法灵敏度高、专属性强，样品前处理简单，可用于控制硫酸铵中阴离子杂质的含量。 ( [1] Zhongping Huang， Y a n Zhu et al. Journal of Chromatography A，1251(2012)154-159 ) 赛默飞世尔科技(中国)有限公司 免费服务热线：8008105118400 6505118(支持手机用户) S CIENTIFICChromeleon Chromatography Data System . AN_C_IC-