头孢尼西钠分析报告中头孢尼西钠分析报告检测方案(制备液相色谱)

博纳艾杰尔产品应用案例 Agela Technologies博纳艾杰尔产品应用案例 头孢尼西钠分析报告 AP10066 应用及技术服务部 摘要：本实验按照头孢尼西钠2015版中国药典方法进行测定，以含量测定项下的分离度溶液为探针，进行色谱柱筛选。在选定的色谱柱上，进一步考察了该色谱柱用于头孢尼西钠系统适用性、含量、有关物质等项测试的结果，并初步考察了色谱柱的使用寿命，结果表明Durashell C18-AM 适用于头孢尼西钠的分析：(1)在分离度溶液中， Durashell C18-AM 对分离度溶液中各杂质的最小分离度为3.72，符合标准要求；(2)对照品平行进样6针 RSD为0.27%，保留时间16.798分钟，柱效5361，拖尾因子1.372，均符合标准要求；(3)含量测定中，头孢尼西钠保留时间 16.877分钟，柱效5689，拖尾因子1.254，符合标准要求；(4)有关物质测定中共检出7个杂质，分离度均符合标准要求；(5)用于头孢尼西钠含量测试时，连续进样350针，保留时间、柱效和拖尾因子均无显著变化，表明 Durashell C18-AM对该样品和流动相有较好耐受性。 关键词：头孢尼西钠； Durashell C18-AM； 2015版药典；液相色谱法 前言 头孢尼西钠为中国药典2015版二部收录品种，本实验按照该标准进行测试，通过测试得出 Durashell C18-AM 适用于头孢尼分钠分析，其测试结果令人满意。 表1.头孢尼西钠样品信息 样品名称 英文名 结构式 分子式 分子量 CAS 编号 头孢尼西钠 Cefonicid Os、ONa C18H16N6Na2O8 S3 586.53 Sodium H H ONa 61270-78-8 OH 实验部分 ( 地址：天津经济开发区西区南大街179号 邮编：300462 ) ( 电话：022-25321032 传真：022-25321033 ) ( Email： s e r v i ce@a g e l a. co m. c n 网址： w w w. agela.c o m. c n 客服：400-606-8099 ) 仪器、试剂与材料 试剂材料 超纯水、甲醇、磷酸二氢铵、氨液； 高效液相色谱柱： Durashell C18-AM； 5 um， 100A，4.6×250mm样品制备 分离度溶液的制备：取头孢尼西对照品适量，加流动相溶解并稀释制成每1ml 中约含 0.2 mg的溶液，置70℃水浴40分钟，放冷，作为对照品溶液(1)，另分别称取7-氨基头孢烷酸(7-ACA)、5-巯基-1-1磺酸甲基四唑(3-TSA)杂质对照品各适量，加对照品溶液(1)溶解并稀释制成每1ml中各约含0.1 mg 的混合溶液，即得。 色谱条件 色谱柱： Durashell C18-AM； 5 um， 100 A， 4.6×250 mm； 流动相：0.02 mol/L 磷酸二氢铵溶液(用氨液调节 pH 值至7.0)-甲醇(84：16)，等度洗脱； 检测波长：272nm； 流 速：1.0mL/min： 柱 温：30℃； 进样量： 20 uL 结果与讨论 系统适用性测定 系统适用性测定图谱 ( Email： s e r v i ce@a g e l a. co m. c n 网址： w w w. agela.c o m. c n 客服：400-606-8099 ) [min] 「mAU*s1 [mAU] 因子 [min]- - -- - - .---2.693 二 1681.46790 364.56073 0.88 0.0692 8400 - 图1.3-TSA溶液测定图谱 25- 0- 保留时间 k' 峰面积 峰高 对称 峰宽塔板数分离度选择性 lminl 0 5 10 15 20 min [mAU*g1 [mAU1 因子 [minj --1- ---1-- ---1-----1- ---· 6.653 1808.29333 186.90486 0.95 0.1467 11400 图2.7-ACA 溶液测定图谱 ( 电话：022-25321032 传真：022-25321033 ) ( Email：s er v ice@a g e l a. com .c n 网址： w w w. agela.c o m. c n 客服：400-606-8099 ) 6.385 1.42132e4 1201.78113 0.47 0.1833 671913.90 2.01 16.717 4454.78223 134.41084 0.71 0.5067 603117.59 2.62 22.196 一 31.35043 7.63703e-1 0.98 0.6433 6595 5.60 1.33 图3.分离度溶液测定图谱 -- -- - 16.798 5639.07129 164.50148 0.67 0.5400 5361 地址：天津经济开发区西区南大街179号 邮编：300462 电话：022-25321032 传真：022-25321033 Email： service@agela.com.cn 网址： www.agela.com.cn 客服：400-606-8099 图4. Std1图谱 保留时间 k' 峰面积 峰高 对称 峰宽塔板数分离度选择性 图5.Std2图谱 16.798 - 5623.54346 163.34767 0.67 0.5433 5296 - 图6.Std3图谱 电话：022-25321032 传真：022-25321033 ( Email： s e r v i ce@a g e l a. co m. c n 网址： w w w. agela.c o m. c n 客服：400-606-8099 ) 保留时间 k' 峰面积 峰高 对称 峰宽塔板数分离度选择性 因子 [min] 「mAU*s1 [mAU] [min]--16.804 5616.34082 163.10571 0.68 0.5433 5299 一 图7.Std4图谱 图8.Std5图谱 ( 电话：022-25321032 传真：022-25321033 ) ( Email： s e r v i ce@a g e l a. co m. c n 网址： w w w. agela.c o m. c n 客服：400-606-8099 ) 16.797 5597.77197 162.41426 0.68 0.5433 5295 一 图 9.Std6图谱 系统适用性测定结果 表2.Durashell C18-AM 用于头孢尼西钠分离度溶液测定结果 名称 保留时间/min 相对保留时间 RRT 分离度 3-TSA 2.681 0.1604 未知杂质 3.178 0.1901 3.72 7-ACA 6.385 0.3819 13.90 头孢尼西 16.717 1.000 17.59 去乙酰头孢尼西 22.196 1.3278 5.60 表 3. Durashell C18-AM用于头孢尼西钠对照品溶液定定结果 进样针数 保留时间/min 峰面积 峰面积平均值 RSD/% 理论塔板数 拖尾因子 1 16.798 5639.07129 2 16.789 5630.65527 3 4 16.798 16.804 5623.54346 5616.34082 5619.40511 0.27 5361 1.372 5 16.803 5609.04785 6 16.797 5597.77197 含量测定 含量测定图谱 ( 地址：天津经济开发区西区南大街179号 邮编：300462 ) ( 电话：022-25321032 传真：022-25321033 ) ( Email： s e r v i ce@a g e l a. co m. c n 网址： w w w. agela.c o m. c n 客服：400-606-8099 ) 冬10.Durashell C18-AM 用于头孢尼西钠含量测定图谱 含量测定结果 表4.Durashell C18-AM 用于头孢尼西钠含量测定结果 主峰名称 保留时间/min 理论塔板数 拖尾因子 头孢尼西 16.877 5689 1.254 有关物质测定 有关物质测定图谱 mAU1000-800-600-400 200 0- VWD1 A， Wavelength=272 nm (E：\天津博纳艾杰尔... 头孢尼西钠20141918 2014-12-18 16-38-09\完善数据0000001.D) 图11.空白(流动相)测定图谱 ( 电话：022-25321032 传真：022-25321033 ) ( Email： s e r v i ce@a g e l a. co m. c n 网址： w w w. agela.c o m. c n 客服：400-606-8099 ) 保留时间 k' 峰面积 峰高 对称 峰宽塔板数分离度选择性 [min] 「mAU*s1 mAU1 因子 minl 2.686 - 192.12405 40.69532 0.90 0.0700 8159 - 3.184 - 7.71541 1.30428 0.95 0.0900 6935 3.66 1.19 7.082 - 14.48082 1.17955 1.03 0.1867 797416.55 2.22 10.062 8.47292 3.86872e-1 1.39 0.3600 4328 6.41 1.42 16.491 - 1.03749e4 262.36578 0.48 0.6333 3756 7.60 1.64 22.329 121.56419 2.66753 1.04 0.7167 5378 5.08 1.35 24.760 - 39.86638： 9.45678e-1 1.00 0.6967 6998 2.02 1.11 37.932 44.3281318.26750e-1 1.14 0.8933 9988 9.73 1.53 图12. Durashell C18-AM 用于头孢尼西钠有关物质测定图谱 有关物质测定结果 表 5.Durashell C18-AM用于头孢尼西钠有关物质测定结果 名称 保留时间/min 相对保留时间RRT 分离度 3-TSA 2.686 0.1629 未知杂质1 3.184 0.1931 3.66 未知杂质2 7.082 0.4294 16.55 未知杂质3 10.062 0.6102 6.41 头孢尼西 16.491 1.000 7.60 去乙酰头孢尼西 22.329 1.3540 5.08 未知杂质4 24.760 1.5015 2.02 ( 地址：天津经济开发区西区南大街179号 邮编：300462 ) ( 电话：022-25321032 传 真：022-25321033 ) ( Email： s e r v i ce@a g e l a. co m. c n 网址： w w w. agela .c o m. c n 客服：400-606-8099 ) 未知杂质5 37.932 2.3002 9.73 色谱柱批次验证结果 色谱柱批次验证图谱 一- --- -- 16.594 4514.47510 144.34929 0.69 0.4933 6268 - 图13.第1批次色谱柱测定图谱 电话：022-25321032 传真：022-25321033 ( Email： s e r v i ce@a g e l a. co m. c n 网址： w w w. agela.c o m. c n 客服：400-606-8099 ) 图14.第2批次色谱柱测定图谱 14.325 4217.74121 155.87572 0.66 0.4267 6245 - 图15.第3批次色谱柱测定图谱 色谱柱批次验证结果 表 6.Durashell C18-AM 批次验证结果 色谱柱名称 批次 主峰保留时间(min) 理论塔板数 拖尾因子 Durashell 1 16.594 6268 1.321 2 15.084 5547 1.329 C18-AM 3 14.325 6245 1.388 色谱柱寿命测定结果 色谱柱寿命测试图谱 ( 地址：天津经济开发区西区南大街179号 邮编：300462 ) ( 电话：022-25321032 传真：022-25321033 ) ( Email： s e r v i ce@a g e l a. co m. c n 网址： w w w. agela.c o m. c n 客服：400-606-8099 ) 一 -1- -- -1-- -- .-- -- -----16.753 - 4218.20361 132.44572 0.73 0.4967 6303 一 图16.第1针测定图谱 --1 一 --1-----1-------1- ---11-----16.863 4209.03516 131.45450 0.74 0.5000 6302 图17.第50针测定图谱 ( 电话：022-25321032 传真：022-25321033 ) ( Email：s er v ice@a g e l a. com .c n 网址： w w w. agela.c o m. c n 客服：400-606-8099 ) [min] 「mAU*s1 [mAU] [min]16.908 - 4205.00586 129.47169 0.75 0.5100 6089 一 图18.第100针测定图谱 16.915 4194.90967 129.31966 0.75 0.5067 6174 图19.第150针测定图谱 ( 电话：022-25321032 传真：022-25321033 ) ( Email： s e r v i ce@a g e l a. co m. c n 网址： w w w. agela.c o m. c n 客服：400-606-8099 ) lminl 「mAU*s1 mAU1 因子 Iminl --16.996 一 4158.99951 127.53751 0.76 0.5100 6153 - 图20.第200针测定图谱 16.852 4123.52490 126.00637 0.78 0.5133 5970 图21.第300针测定图谱 ( 电话：022-25321032 传真：022-25321033 ) ( Email： s e r v i ce@a g e l a. co m. c n 网址： w w w. agela.c o m. c n 客服：400-606-8099 ) 16.872 - 4101.46338 124.61572 0.80 0.5133 5985 一 图22.第350针测定图谱 色谱柱寿命测试结果 表7. Durashell C18-AM 用于头孢尼西钠寿命测试结果 进样针数 保留时间/min 理论塔板数 拖尾因子 1 16.753 6303 1.279 50 16.863 6302 1.273 100 16.908 6089 1.264 150 16.915 6174 1.267 200 16.996 6153 1.268 300 16.852 5970 1.247 350 16.872 5985 1.235 结论 本实验按照中国药典2015版标准，考察了 Durashell C18-AM 用于头孢尼西钠检测的适用性，结果表明 Durashell C18-AM 色谱柱适用于头孢尼西钠分析， ( 电话：022-25321032 传真：022-25321033 ) ( Email： s e r v i ce@a g e l a. co m. c n 网址： w w w. agela.c o m. c n 客服：400-606-8099 ) 效果良好，能够满足检测要求。 附：相关产品 产品名称 规格描述 包装数量 订货号 Durashell C18-AM 5 um，100 A， 4.6x250 mm 1支 DC952505-AM 分析型色谱柱温箱 室温+5-50℃，箱内一对夹套 1个 CC-100 1.5mL样品瓶 短螺纹透明带书写处32×11.6mm 100/PK 1109-0519 1.5mL样品瓶盖 9mm 中心孔蓝盖，红色橡胶/米色 PTFE 隔垫45°Shore A；1.0 mm 100/PK 0915-1819 微孔滤膜 单膜， 13 mm， 0.45 um 100个/包 AS021345-T 一次性注射器 2mL无针头 100支/包 LZSQ-2ML 甲醇 4L/瓶，色谱纯 4×4L/箱 AH230-4 地址：天津经济开发区西区南大街179号 邮编：300462 ( Email： s e r v i ce@a g e l a. co m. c n 网址： w w w. agela.c o m. c n 客服：400-606-8099 ) 地址：天津经济开发区西区南大街 邮编：话： 传真： 地址：天津经济开发区西区南大街 邮编：