阿齐沙坦中氯离子检测方案(离子色谱仪)

thermoscientific 标准溶液制备 在线基体消除离子色谱法测定难溶药物阿齐沙坦中氯离子 廖冬丽潘广文李仁勇 赛默飞世尔科技(中国)有限公司 关键词 阿齐沙坦，氯离子，电导检测，JF离子色谱 目标 采用阀切换技术，直接进样通过在线消除药物基体的干扰，抑制电导检测，建立一种灵敏、准确度高的离子色谱法测定阿齐沙坦药物中氯离子。线性回归系数达0.9998，且样品加标回收率良好。 引言 阿齐沙坦是一款正处于研发中的治疗高血压症铂血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂药物，多用于治疗高血压症，也是目前唯一处于末期临床的血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂(沙坦类)药物。药物中存在的杂质无论有机、无机，或残留溶剂即使是含量很小，都会影响的药效甚至用药安全性，因此需要进行控制。 其中许多无机杂质在低浓度时很少有毒性，但各批次药品之 间无机杂质差异显著的话，也可说明该药品生产过程中质量 控制出现问题。因此，在制药行业中鉴别、定量和控制无机 杂质是十分重要的。[1，2] 本文建立了一种利用阀切换技术，直接进样通过在线消除药物基体的干扰，离子色谱法测定阿齐沙坦此水难溶药物中氯离子的分析方法，取得了令人满意的结果。 仪器 Thermo ScientificTM DionexTM ICS-5000*离子色谱系统，包括 -ICS-5000*DP高压泵 -ICS-5000* EG 淋洗液发生器 -ICS-5000* DC 检测器 Thermo Scientific Dionex AS-AP 自动进样器 试剂和标准品 去离子水(Thermo Scientific GenPure Pro UV-TOC， P/N：50131948) 氯离子(Fisher Scientific P/N S671-500) N，N-二甲基甲酰胺(安谱) ( 耗材 ) Thermo Scientific Target2 Nylon Syringe Filters(0.45 pm， 30 mm， P/N F2500-1)一次性使用无菌注射器，1mL(上海米沙瓦医科工业有限公司) 准确称取一定量(精确到0.001 g)的含氯离子 1.000 g/L的标准品储备液。取上述标准品储备液配制含氯离子的浓度分别为0.02，0.05，0.1，0.2，0.5， 1.0 mg/L的标准工作溶液。 样品溶液制备 称取50mg样品，置于10mL容量瓶中，加入N，N-二甲基甲酰胺溶解，然后用N，N-二甲基甲酰胺定容至刻度，摇匀。过滤，待测。 色谱条件 分析柱： lonPac AG11-HC 分离柱，250×4mm， (P/N：052960) 浓缩柱： lonPac AG11-HC 保护柱，50×4 mm，(P/N052962) 捕获柱： lonPac ATC-HC 9×35mm 前处理柱： lonPac NG 1 4×35 mm 四元梯度泵流速：1mL/min 淋洗液：0-10 min， 7 mM， 10.1-19 min， 40 mM，19-30 min，7 mM 流速：1mL/min 柱温：30℃ 检测器：电导检测 定量环：25uL 抑制器：阴离子自动电解连续再生微膜抑制器 ASRS300-4mm (P/N： 064554)，抑制电流mA 背压：1433psi 背景电导：1.0 psi 结果与讨论 图1.实验装置图 lonPac NG1 柱的填料是乙基乙烯基苯交联55%二乙烯基苯的聚合物(DVB-EVB)，无离子交换功能基，在 pH为0~14稳定，截留疏水性成份。在纯水作流动相下，无机阴离子在 lonPac NG1 柱上没有保留，直接从死体积流出， 而阿齐沙坦基体中的有机疏水性成分则保留在 NG1 柱上，从而达到基体消除的目的。 本研究的实验装置图(见图1)。图1实验装置图左边采用一个电磁六通阀，处理好的样品可直接由自动进样器注入25 uL量量环，四元梯度泵泵入去离子水将样品带入系统，流经NG1 柱去除基体干扰，无机阴离子直接进入右边离子色谱系统六通阀上的浓缩柱 lonPac AG11-HC 浓缩后，即可由淋洗液带入离子色谱系统分析测定，采用lonPacAS11-HC 柱分离。在分析过程中，左边六通阀切换到四元梯度泵泵入甲醇一路，用甲醇将NG1上保留的有机基体成分洗脱至废液，该柱得到再生后可处理后续样品。最终确定阀切换的时间程序(见表1)。 表1.阀切换时间程序 时间(min) 左阀状态 右阀状态 描述 0 Inject Load 进样 2 Inject Inject 将浓缩柱上阴离子带入分析系统 8 左阀切入甲醇相冲洗，去NG1上 有机基体 15 左阀切入水相，去NS1上甲醇 29 Inject Load 左阀切入水相，去浓缩柱上KOH 标准品色谱图 uS min 图2.标准阴离子溶液色谱图(色谱峰1-氯离子) 氢氧化物作为淋洗液可以由淋洗液发生装置通过水的在线电解自动产生。同时，其抑制产物是水，本底电导值低，易做梯度淋洗。在上述的阀切换条件下进氯离子标液，相应的色谱图见图2。为考察方法的重现性，连续进样6含氯离子均为 0.2 mg/L的标准溶液，得到相关离子的保留时间和峰面积的相对对准偏差(RSD)见表2。 表2.离子的保留时间和色谱峰面积的相对标准偏差 离子 A RSD(%) RSD(%) 氯离子 0.02 2.09 配制不同浓度的标准溶液，从低到高浓度依次进样，以离子浓度(mg/L)为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，线性方程为 A=0.1587c-0.0007(R=0.9998)，线性范围 0.02-1 mg/L，线性相关系数良好，满足定量分析需要。 样品测定 在同样的色谱条件下测定空白，样品以其谱图见图2。然后在此样品中加入氯离子标液，计算加标回收率见表3示。氯离子的回收率达92.5%，可见方法的样品前处理和分析方法均是可靠的。 图2.色谱图。(1)空白，(2)样品，i，(3)加标样品。1-氯离子 表3.样品测定结果 加标样品 被测离子 检出量 加入量 测得量 回收率 (mg/g) [mg/g) (mg/L) (%) 氯离子

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