谷氨酰胺和色氨酸中稳定性检测方案(氨基酸分析仪)

Application 谷氨酰胺和色氨酸稳定性测试 在进行氨基酸分析时，一般使用市场购买的混合标准品，由于谷氨酰胺(GluNH2)和色氨酸(Trp)稳定性的问题，在进行这两个氨基酸分析检测时需要自行配制添加到混合标准品中，一般都会推荐现用现配制，不建议使用长期保存的标准品。 为了解决广大氨基酸分析工作者最为关心的保存时间问题，本文探讨了不同溶剂和保存方法对GluNH2和Trp的稳定生的影响。 1、稳定性验证方法 (1) 样品配制方法： 称量 GluNH2 7.3 mg和Trp10.2mg，用不同溶液配成 2.5 umol/mL溶液，进一步稀释成0.1 umol/mL溶液(更详细的样品配制、稀释信息、测试方法请咨询天美公司) (2) 分析方法： 仪器：L-8900高速全自动氨基酸分析仪 分析柱：：60mm高理论塔板数分离柱 除氨柱：：40 mm 长寿命除氨柱 衍生单元：40mm 长寿命高灵敏度反应柱 缓冲液：MCI缓冲液(可从和光、关东、三菱购买，也可根据说明书组分表自行配制) 衍生试剂：茚三酮(可从和光、关东、三菱购买，也可根据说明书组分表自行配制) 检测波长：440 nm、570nm，采用光栅分光 进样量：20pL 2、稳定性验证图谱 图1溶剂A刚配制的标准品图谱 图2溶剂A保存12周的标准品图 图3溶剂B刚配制的标准品图谱 图4 溶剂B配制12周后的标准品图谱 3、不同溶液不同保存条件下的数据比较： 图5谷氨酰胺随时间浓度变化趋势 图6色氨酸随时间浓度变化趋势 天美(中国)科学仪器有限公司 北京市朝阳区天畅园7号楼(100107) 通过以上图谱可得出如下结论： t 010-64010651 f 010-64060202 e techcomp@techcomp.cn w www.techcomp.cn (1)以刚用溶剂B溶解之后的峰面积值为基准、计算了面积比(%)。 (2)用溶剂A溶解的谷氨酰胺的浓度慢慢降低、但溶剂B稀释能减缓其降低。 (3)色氨酸是与溶解液或保管温度关系相对较小，变化不是很明显。 在进行氨基酸分析时，一般使用市场购买的混合标准品，由于谷氨酰胺(GluNH2)和色氨酸(Trp)稳定性的问题，在进行这两个氨基酸分析检测时需要自行配制添加到混合标准品中，一般都会推荐现用现配制，不建议使用长期保存的标准品。