辣椒粉中罗丹明B检测方案(固相萃取)

食品中罗丹明B检测的固相萃取方法 WGLabs ALN 一、实验目的 本研究利用固相萃取法作为样品的前处理方法， HPLC法作为检测手段。该方法可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用，操作简便。 二、实验目标物 罗丹明B(CAS：81-88-9)。 三、应用范围 本方法适用于进出口食品中罗丹明B的检测的HPLC检测及确证。 四、参考标准 《SN/T2430-2010进出口食品中罗丹明B的检测方法》。 五、实验材料 WGLabsALN 1g/6ml Cat：WGALN61000 六、实验方法 1、样品提取 称取辣椒粉2g(精确至0.01)于50 mL离心管中，准确加入20 mL 20%丙酮正己烷，于涡旋混匀器上混合提取2 min， 再超声提取15 min， 于4000 r/min离心5 min， 上清液过滤待净化。 2、SPE柱净化 (1)活化：中性氧化铝柱使用前使用6mL正己烷活化。 (2)上样和洗脱：取待净化液10 mL加入中性氧化铝小柱，1滴/秒流速通过中性氧化铝小柱后，弃去溶液，加入10 mL 丙酮-正己烷溶液(20：80， v/v)淋洗，弃去淋洗液，抽干小柱。取10 mL 2%氨水甲醇溶液洗脱小柱，收集洗脱液，洗脱液于50℃氮吹至干。 (3)重新溶解：用1mL甲醇定容，0.22 pm微孔滤膜过滤，供HPLC上样测试。 3、HPLC条件 设备： Waters Alliance 2690 色谱柱： Welch Ultimate XB-C18 (4.6X250mm) 检测器： Waters 2475荧光检测器，激发波长(Ex)550 nm， 发射波长(Em)580 nm 流速：1mL/min WGLabs 为您提供完整的食品检测前处理方案! 进样体积：20pL 流动相A：纯水 流动相B：甲醇 洗脱方式：等度洗脱 表1等度洗脱条件 时间/min A/% B/% 10 25 75 七、实验结果 1、 25pg/kg辣椒粉中罗丹明B的添加回收结果 表2 25pg/kg辣椒粉中罗丹明B的添加回收结果 目标物 回收率(%) 平均 回收率(%) RSD(%) 1 2 3 罗丹明B 86 88 88 87.33 1.32 2、添加水平为25pg/kg辣椒粉中罗丹明B检测色谱图 图1添加水平为25pg/kg辣椒粉中罗丹明B检测色谱图 WGLabs 为您提供完整的食品检测前处理方案! 本研究利用固相萃取法作为样品的前处理方法，HPLC法作为检测手段。该方法可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用，操作简便。1、样品提取称取辣椒粉2g(精确至0.01)于50ml离心管中，准确加入20ml 20%丙酮正己烷，于涡旋混匀器上混合提取2min，再超声提取15分钟，于4000r/min离心5min，上清液过滤待净化。2、SPE柱净化（1）活化：中性氧化铝柱使用前使用6ml正己烷活化。（2）上样和洗脱：取待净化液10ml加入中性氧化铝小柱，1滴/秒流速通过中性氧化铝小柱后，弃去溶液，加入10ml丙酮-正己烷溶液（20:80  v/v）淋洗，弃去淋洗液，抽干小柱。取10ml 2%氨水甲醇溶液洗脱小柱，收集洗脱液，洗脱液于50°C氮吹至干。（3）重新溶解：用1ml甲醇定容，0.22μM微孔滤膜，供HPLC上样测试。实验结果参考请详见附件！！！