牛奶中氢化可的松检测方案(固相萃取)

牛奶中氢化可的松检测的固相萃取方法 WGLabsSilica 一、实验目的 本研究利用固相萃取法作为样品前处理方法，HPLC法作为检测手段。该方法操作方便，可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用。 二、实验目标物 氢化可的松(CAS：50-23-7)。 三、应用范围 本方法适用于牛奶中氢化可的松的检测及确证。 四、实验材料 WGLabsS SSilica 500mg/6ml Cat：WGSIL6500 五、实验方法 1、样品提取 称取牛奶试料5 g于50mL离心管中，加30 mL乙酸乙酯，均质1 min， 350 r/min摇床振动20 min， 4200 r/min离心10 min，移取乙酸乙酯层。残渣中加乙酸乙酯25 mL，均质1 min，350 r/min摇床振动20 min， 4200 r/min离心10 min， 移取乙酸乙酯层。合并两次提取液，40℃旋转至近干，加乙酸乙酯1 mL和正己烷5 mL， 溶解残渣，待净化。 2、SPE净化 (1)活化：用6mL正己烷活化Silica固相萃取柱。 (2)上样和洗脱：取待测液，通过Silica固相萃取小柱富集，弃去流出液。用6mL正己烷淋洗固相萃取柱，真空抽干5 min， 弃去流出液。用6mL正己烷-丙酮(6：4，v/v)洗脱萃取柱，收集集脱液。 (3)重新溶解：洗脱液于40℃氮气吹干，加20%乙腈水溶液2.0 mL溶解残余物，过0.22pm滤膜，供高效液相色谱测定。 3、HPLC条件 设备： Waters Alliance 2690 检测器： Waters 2487 双波长检测器 检测波长：254 nm 色谱柱： Welch Ultimate XB-C18 (4.6X250mm) 流动相：A：乙腈 B：0.1%甲酸水溶液 洗脱方式：梯度洗脱 WGLabs 为您提供完整的食品检测前处理方案! 表1梯度洗脱条件 时间/min A/% B/% 0 20 80 15 40 60 15.1 90 10 19 90 10 19.1 20 80 21.1 20 80 流速：1mL/min 进样体积：20pL 六、实验结果 1、牛奶中氢化可的松的1mg/kg添加回收结果 表2牛奶中氢化可的松的1mg/kg添加回收结果 目标物 回收率(%) 平均 回收率(%) RSD(%) 1 2 3 氢化可的松 98.8 97.8 98.4 98.6 0.29 2、添加水平为1mg/kg牛奶中氢化可的松检测色谱图 图1添加水平为1mg/kg牛奶中氢化可的松检测色谱图 WGLabs 为您提供完整的食品检测前处理方案! 本研究利用固相萃取法作为样品前处理方法，HPLC法作为检测手段。该方法操作简便，可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用。具体操作步骤详见附件！！！