水产品中氯霉素的残留量检测方案(气相色谱仪)

水产品中氯霉素的残留量的检测：气相色谱法 氯霉素属广谱抑菌抗生素，是治疗伤寒，副伤寒的首选药，治疗厌氧菌感染的特效药物之一，其次用于敏感微生物所致的各种感染性疾病的治疗。氯霉素曾广泛用于治疗各种敏感菌感染，后因对造血系统有严重不良反应，故对其临床应用现已做出严格控制。因其抗菌效果好、成本低，上世纪八、九十年代长期应用于水产养殖业。尽管农业部出台公告禁止使用，但仍有一些不法的水产品养殖户，特别是散户依然在偷偷使用。 水产养殖户会在饲料、养殖（包括环境、器械等的消毒）、加工、保鲜、包装和运输等生产环节使用氯霉素，用于延长水产品的寿命、方便运输。我国在养殖过程中滥用抗生素已经成为一个严重的水产品安全问题，而且由于氯霉素在水产品中的残留超标，我国水产品出口已经受到严重冲击，并且开始波及到其他动物制品的出口。现在我国政府也明文禁止在渔牧养殖中使用含有氯霉素的兽药和渔药，并加强了对食物性产品中氯霉素的监督力度。仅凭肉眼无法分辨水产品是否含有氯霉素，只有经过专业部门才能检测出来。 仪器准备 GC5890N气相色谱仪 (​http:​/​​/​www.kj17.cn​/​" \t "http:​/​​/​www.kj17.cn​/​shiping_0222​/​_blank​)（南京科捷分析仪器有限公司）全兼容Agilent 6890N气相色谱仪，可直接接驳Agilent 6890N检测器及相关检测器控制板，可连接安捷伦色谱工作站和自动进样器，仪器技术指标、性能、检测器灵敏度可与Agilent 6890N相媲美。 独特的进样口设计解决进样歧视，双柱补偿功能不仅能解决升温带来的程序漂移，可以得到更低的最小检测限；可选填充柱、毛细管分流/不分流（具有隔膜清扫功能）两种进样系统。适用于食品卫生、医疗器械、电子高纯气体行业、精细化工、石油开采及炼制、石油化工、环境监测、生物工程以及职卫检测、质量监督检验所等分析检测机构。 检测过程 样品处理： 提取 准确称取5.00g样品，置于50mL玻璃离心管中，加入乙酸乙酯20mL，均质机均质1min，分散均匀，4000r/min离心3min，将乙酸乙酯层转移到100mL细口鸡心瓶中。再向离心管中加乙酸乙酯10mL，均质1min，4000r/min离心3min，合并乙酸乙酯提取液于原鸡心瓶中，于40℃水浴中旋转蒸发至干。 脱脂净化 向鸡心瓶中加1mL盐酸溶液（0.01moL/L），漩涡混合溶解残留物，再加入2mL正己烷，漩涡混合1min，充分混匀提取脂肪，转移到5mL离心管中，4000r/min离心2min，弃去正己烷层，再向盐酸层中加入2mL正己烷重复提取两次，弃去正己烷层。 向盐酸层中加入2mL乙酸乙酯，漩涡混合2min，4000r/min离心3min，弃去盐酸层，将乙酸乙酯于50~55 ℃砂浴中氮气吹干。 衍生 向干的残留物中加200μL乙酸乙酯和100μL衍生试剂，封口超声反应15min。再在50~55℃砂浴中用氮气吹除多余的试剂，至刚好吹干为止。加入0.5mL正己烷，漩涡混合10s， 供气相色谱分析用。 色谱条件： 色谱柱 HP-5（30m × 0.25mm × 0.25μm） 进样口 260℃ 检测器 ECD，300 ℃ 进样量 1μL 程序升温 初始温度150℃，保持1min；以15℃/min升至260℃，保持10min；以30℃/min升至280℃，保持5min。 载气流速 1.3mL/min   氯霉素属广谱抑菌抗生素，是治疗伤寒，副伤寒的首选药，治疗厌氧菌感染的特效药物之一，其次用于敏感微生物所致的各种感染性疾病的治疗。氯霉素曾广泛用于治疗各种敏感菌感染，后因对造血系统有严重不良反应，故对其临床应用现已做出严格控制。因其抗菌效果好、成本低，上世纪八、九十年代长期应用于水产养殖业。尽管农业部出台公告禁止使用，但仍有一些不法的水产品养殖户，特别是散户依然在偷偷使用。  水产养殖户会在饲料、养殖（包括环境、器械等的消毒）、加工、保鲜、包装和运输等生产环节使用氯霉素，用于延长水产品的寿命、方便运输。我国在养殖过程中滥用抗生素已经成为一个严重的水产品安全问题，而且由于氯霉素在水产品中的残留超标，我国水产品出口已经受到严重冲击，并且开始波及到其他动物制品的出口。现在我国政府也明文禁止在渔牧养殖中使用含有氯霉素的兽药和渔药，并加强了对食物性产品中氯霉素的监督力度。仅凭肉眼无法分辨水产品是否含有氯霉素，只有经过专业部门才能检测出来。  仪器准备  GC5890N气相色谱仪（南京科捷分析仪器有限公司）全兼容Agilent 6890N气相色谱仪，可直接接驳Agilent 6890N检测器及相关检测器控制板，可连接安捷伦色谱工作站和自动进样器，仪器技术指标、性能、检测器灵敏度可与Agilent 6890N相媲美。 独特的进样口设计解决进样歧视，双柱补偿功能不仅能解决升温带来的程序漂移，可以得到更低的最小检测限；可选填充柱、毛细管分流/不分流（具有隔膜清扫功能）两种进样系统。适用于食品卫生、医疗器械、电子高纯气体行业、精细化工、石油开采及炼制、石油化工、环境监测、生物工程以及职卫检测、质量监督检验所等分析检测机构。检测过程  样品处理：  提取 准确称取5.00g样品，置于50mL玻璃离心管中，加入乙酸乙酯20mL，均质机均质1min，分散均匀，4000r/min离心3min，将乙酸乙酯层转移到100mL细口鸡心瓶中。再向离心管中加乙酸乙酯10mL，均质1min，4000r/min离心3min，合并乙酸乙酯提取液于原鸡心瓶中，于40℃水浴中旋转蒸发至干。脱脂净化 向鸡心瓶中加1mL盐酸溶液（0.01moL/L），漩涡混合溶解残留物，再加入2mL正己烷，漩涡混合1min，充分混匀提取脂肪，转移到5mL离心管中，4000r/min离心2min，弃去正己烷层，再向盐酸层中加入2mL正己烷重复提取两次，弃去正己烷层。  向盐酸层中加入2mL乙酸乙酯，漩涡混合2min，4000r/min离心3min，弃去盐酸层，将乙酸乙酯于50~55 ℃砂浴中氮气吹干。衍生 向干的残留物中加200μL乙酸乙酯和100μL衍生试剂，封口超声反应15min。再在50~55℃砂浴中用氮气吹除多余的试剂，至刚好吹干为止。加入0.5mL正己烷，漩涡混合10s，供气相色谱分析用。  色谱条件：色谱柱HP-5（30m × 0.25mm × 0.25μm）进样口260℃检测器ECD，300 ℃进样量1μL程序升温初始温度150℃，保持1min；以15℃/min升至260℃，保持10min；以30℃/min升至280℃，保持5min。载气流速1.3mL/min